高效液相色谱法测定红景天胶囊中红景天苷含量

苏小军，杨怀镜

（云南省大理白族自治州食品药品检验所，云南 大理 671000）

高效液相色谱法测定红景天胶囊中红景天苷含量

苏小军，杨怀镜

（云南省大理白族自治州食品药品检验所，云南 大理 671000）

目的 建立测定红景天胶囊中红景天苷含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法 色谱柱为Waters Symmetry －C18柱（150 mm×4．6 mm，5 m），流动相为甲醇 －水(10∶90)，流速为 1．0 mL／min，检测波长为 215 nm，柱温为 30℃。结果 红景天苷进样量在 0．266 92～6．673 g范围内与峰面积呈良好线性关系(r＝0．999 9，n＝5），平均加样回收率为103．63%，RSD为1．19%（n＝9）。结论 该方法简便、灵敏、有效，可用于红景天胶囊中红景天苷的含量测定及质量控制。

高效液相色谱法；红景天胶囊；红景天苷

红景天具有抗辐射作用，能明显抑制辐射引起的心脏和肝脏过氧化脂质（LPO）的产生，可保护脂质和细胞膜，还具有抗缺氧、抗疲劳、抗菌、镇痛、延缓衰老、对内分泌系统的双向调节等作用[1－2]。目前，2003年版《保健食品检验与评价技术规范》收载的该品种为通用检验标准，缺乏对该类剂型的针对性，为有效控制该保健食品的质量，本研究中建立了高效液相色谱（HPLC）法测定红景天胶囊中红景天苷含量，能简便、有效控制产品的质量。

1 仪器与试药

Shimadzu LC20A型高效液相色谱仪，四元低压梯度泵，LCsolution数据系统，SPD－20A型检测器；GH－252型电子天平（日本AND）；SK5200HP型超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）。红景天苷对照品（批号为110818－201005，含量99.9%，中国食品药品检定研究院)；红景天胶囊(均为市场抽验样品)；甲醇（HPLC），甲醇（AR），水为娃哈哈纯净水。

2 方法与结果

2．1 溶液制备

精密称取红景天苷对照品16.70mg，分置25mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液Ⅰ（每1 mL含红景天苷0.667 3 mg）；精密量取对照品溶液Ⅰ2 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液Ⅱ（每1 mL含红景天苷0.133 46 mg）。精密称取样品0.3 g，置25 mL容量瓶中，加入甲醇适量，超声处理10 min，放冷至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，滤液用0.45 μm的微孔滤膜滤过作供试品溶液。

2．2 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱：WatersSymmetry®－C18柱（150mm×4.6mm，5 μm）；柱温：30℃；流动相：甲醇－水(10∶90)；流速：1.0 mL／min；检测波长；215 nm。各组分的保留时间与系统适用性参数见表1和图1。

图1 高效液相色谱图

表1 系统适用性参数

2．3 方法学考察

线性关系考察：精密吸取10，5，2 μL对照品溶液Ⅰ与5，2 μL对照品溶液Ⅱ，分别注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以进样量（Y，μg）为纵坐标、峰面积（X）为横坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y＝7.706 8－07 X＋0.014，r＝0.999 9(n＝5)。结果表明，红景天苷进样量在0.266 92～6.673 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液Ⅰ5 μL，连续重复进样 6次，测定峰面积。结果的 RSD＝0.75% (n＝6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一批供试品溶液，于配制后0，4，8，12，16 h时分别进样 5 μL，测定峰面积。结果的RSD＝0.45%(n＝5)，表明供试品溶液在16 h内稳定性良好。

加样回收试验：精密量取对照品溶液（每1 mL含红景天苷0.645 35 mg）适量，挥尽溶液，再精密称取已知含量（每1 g含红景天苷7.799 mg）的同一批样品9份，分置25 mL容量瓶中，照拟订方法制备供试品溶液并按拟订色谱条件测定，计算回收率。结果见表2。

表2 红景天苷加样回收试验结果（n＝9）

2．4 样品含量测定

精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μL，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。3批成品的测定结果见表3。

3 讨论

超声提取时间确定：分别以超声处理5，10，15 min提取同一样品，计算峰面积与取样量的比值。结果表明，超声处理10 min与15 min，提取效果无差异，而与超声处理5 min提取效果差异显著，故选择以超声处理10 min为本试验的提取时间。

表3 样品测定结果

方法耐用性考察：按2010年版《中国药典（一部）》收载的方法（流动相为甲醇 ∶水＝15∶85；检测波长为275 nm）测定样品中红景天苷，结果红景天苷峰不能与其他物质峰有效分离[3]。考察了Shimadzu LC20A型高效液相色谱仪与Agilent 1100型液相色谱仪分别搭配Synersi Fusion－RP 80柱（150 mm×4.6 mm，4 μm）与Waters Symmetry®－C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）[4－5]，在本试验条件下分别测定同一样品的情况，色谱柱不同样品保留时间有差异，但测定结果一致。

色谱条件选择：分别考察了以甲醇－水(10∶90)为流动相，以甲醇－0.02 mol／L乙酸钠溶液(9∶91)为流动相，检测波长分别为215，275 nm时的样品分析情况[6－7]。结果显示，以甲醇－水(10∶90)为流动相时红景天苷峰与相邻峰的分离度（2.2）优于以甲醇－0.02 mol／L乙酸钠溶液(9∶91)为流动相（1.9）；以215 nm为检测时红景天苷峰的峰面积和峰高均大于以275 nm为检测波长时，故本试验选择以甲醇－水(10∶90)为流动相，以215 nm为检测波长[5－8]。

[1]金 萍．红景天的研究现状[J]．光明中医，2011，26（7）：1 508－1 511．

[2]季宇彬，耿 欣，汲晨锋，等．红景天研究进展[J]．天津中医药，2007，24（1）：81－85．

[3]国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2010：144．

[4]陶贵荣，赵银萍，齐建江，等．不同地区红景天植物红景天苷含量比较研究[J]．西北植物学报，2010，30（9）：1 902－1 905．

[5]李 青，宋志前，王 超，等．青海产红景天中红景天苷及酪醇含量分析[J]．中国实验方剂学杂志，2011(15)：110－112．

[6]李慧侠．RP－HPLC法测定大花红景天和长鞭红景天中红景天苷的含量[J]．中国药房杂志，2011，22（43）：4 098－4 099．

[7]方丽波，李成网，张 洁．HPLC法测定复方红景天胶囊中红景天苷的含量[J]．安徽医药，2011，15（3）：310－311．

Determination of Salidroside in Rhodiola Capsules by HPLC

Su Xiaojun，Yang Huaijing
（Dali Institute for Food and Drug Control，Dali，Yunnan，China 671000）

Objective To establish an HPLC method for the determination of salidroside in Rhodiola Capsules.Methods The Waters Symmetry®－C18column(150 mm×4.6 mm，5 μm)was used with methanol－water（10∶90）as the mobile phase at the flow rate of 1.0 mL／min，the detection wavelength was 215 nm，the column temperature was 30℃.Result The injection volume of salidroside showed good linear relationship with the peak area in the range of 0.266 92－6.673 μg(r＝0.999 9，n＝5）.The recovery rate was 103.63%，RSD was 1.19%（n＝9）.Conclusion The method is simple，sensitive and effective，it can be used for the content determination and quality control of Rhodiola capsule.

HPLC；Rhodiola Capsules；salidroside

R284．1；R286．0

A

1006－4931(2016)02－0066－02

苏小军（1981－），男，白族，大学本科，主管中药师，研究方向为药品检验及质量标准，（电话）0872－2165884（电子信箱）276595451＠qq．com。

2015－05－13)