吲哚美辛肠溶片近红外快速定量方法的建立

吴 群

（1．重庆市食品药品检验检测研究院，重庆 401121； 2．重庆市药物过程与质量控制工程技术研究中心，重庆 401121）

吲哚美辛肠溶片近红外快速定量方法的建立

吴 群1，2

（1．重庆市食品药品检验检测研究院，重庆 401121； 2．重庆市药物过程与质量控制工程技术研究中心，重庆 401121）

目的 采用近红外漫反射光谱（NIR）分析技术和化学计量学方法对吲哚美辛肠溶片进行快速定量分析。方法 选择8个厂家生产的156批吲哚美辛肠溶片，采集样品的 NIR，并以法定方法测定其含量，采用偏最小二乘法建立定量模型。结果 样品浓度范围为24．61% ～32．96%，用78个样品进行外部验证，外部验证均方差（RMSEP）为0．508%，平均相对偏差为0．45%。结论 该方法快速、简便，结果准确，适于药品的现场快检。

吲哚美辛；近红外漫反射光谱；定量模型

吲哚美辛肠溶片属非甾体抗炎药物，通过抑制体内前列腺素的生物合成而产生抗炎、解热及镇痛等作用[1]，临床应用广泛。现行质量标准为2010年版《中国药典（二部）》[2]，含量测定采用高效液相色谱（HPLC）法。近红外光是波长介于可见光区与中红外光区的电磁波，其波数范围约为12 500～4 000／cm[3]，近红外漫反射光谱（NIR）分析技术是集光谱分析技术、现代电子技术和化学计量学技术为一体的现代光谱技术，主要用于供试品的快速、无损分析。该方法有操作简便、分析速度快、非破坏性、无污染、实现现场分析的优点，故在药物分析、在线检测及质量控制等方面有巨大优势[4－7]。2010年版《中国药典（二部）》收载了近红外光谱法[2]。本研究中采用吲哚美辛片近红外光谱数据，以HPLC法测定含量为参考值，结合偏最小二乘法建立吲哚美辛肠溶片的近红外定量模型，实现对吲哚美辛肠溶片的快速、简便、准确测定[8]。现报道如下。

1 仪器与试药

1．1 仪器

Matrix－F近红外光谱仪，OPUS 5．0分析软件，均由德国Bruker公司生产；Agilent 1260型高效液相色谱仪；MSU225S－000－DA型电子天平(十万分之一，Sartorius公司)。

1．2 试药

本研究中收集了全国在产的8个厂家156批样本，分别来自全国生产、流通、销售、使用领域，均为2015年国家评价性抽验样品；吲哚美辛对照品（中国食品药品检定研究院，批号为0258－9602）。

2 方法与结果

2．1 方法

2．1．1 吲哚美辛含量测定

按照2010年版《中国药典（二部）》，采用HPLC法测定的含量作为理论含量，156批样品的浓度范围为24．61% ～32．96%。

2．1．2 光谱采集

采用Matrix－F随机配带的光纤探头，光谱扫描范围为12 000～4 000／cm，分辨率为8 cm，扫描次数为32次，每批样品测定6片，计算平均光谱，建模。

2．2 结果

2．2．1 建模参数选择

各厂家样品及吲哚美辛对照品平均光谱见图1，可见，各厂家NIR光谱图基本一致，吲哚美辛对照品NIR光谱图在 5 500～6 200／cm和4 100～4 800／cm谱段有很明显的特征吸收峰，且各厂家在相应谱段也有很强的吸收峰。选取特定谱段、适当的预处理方法、合理的化学计量学方法以突出活性成分的信息，是建立吲哚美辛肠溶片定量模型的关键。

2．2．2 内部交叉验证

156批样品全部作为校正集，利用 OPUS软件Quant－2中所有预处理方法和自动优化功能（NIR方式）对校正集样品进行内部交叉验证，确定建模参数：预处理方法为一阶导数和矢量归一化，最佳光谱范围6 202．3～5 596．7／cm，5 403．8～4 998．8／cm，4 802．1～4 196．6／cm，处理后的NIR图见图2。

2．2．3 外部交叉验证建模

利用OPUS软件Quant－2中一一间隔自动选取校正和验证集，采用2．2．2项中的建模参数，采用外部交叉验证，决定系数（R2）为 97．95%，外部验证均方差（RMSEP）为0．508%，维数（Rank）为7，最大相对偏差为1．57%，平均相对偏差为0．45%，预测值与真实值的线性关系见图3。

图1 各厂家样品及吲哚美辛对照品NIR图

图2 处理后的NIR图

图3 预测值与真实值的线性关系示意图

2．3 模型验证

2．3．1 专属性考察

模型正确判定待测物是否为模型预测品种的能力称为专属性[9]。样品的马氏距离与限定值进行比较检验异常样品：限定值＝Factor×Rank／M，Rank为阶数即主成分维数；M为建模样品数；Factor为因子，因子范围为2～10，本试验因子选2。利用建立的定量分析模型对常见的阿司匹林、双氯芬酸钠、对乙酰氨基酚、布洛芬4类解热镇痛样品进行测定，其马氏距离均大于限定值（0．10），被认定是异常样品。说明所建立的吲哚美辛肠溶片定量模型具有较好的专属性。

2．3．2 线性关系考察

近红外的线性与传统分析方法的线性不同，由于近红外方法的建立一般采用多元回归，为二级分析方法，故其线性主要用待分析物的预测结果与真实值之间的关系来评价[10]。在 24．61% ～32．96%的浓度范围内，以NIR预测值（Y）对HPLC测定值（X）进行线性回归，得回归方程 Y＝0．975 4 X＋0．829 9（R2＝0．980 1），表明建立的近红外定量预测值与真实值之间具有良好的相关性。

2．3．3 准确性考察

验证集的NIR预测结果与法定方法测量结果比较，偏差（mg／mg，%）在0．1%以下的有10批，0．1%～0．2%有 16批，0．2%～0．3%有 10批，0．3～0．4%有12批，0．4% ～0．5%有 9批，0．5% ～1．0%有 16批，1．0%以上有 5批。最大偏差为 1．57%，平均偏差为0．40%。小于近红外快速检测对于偏差的限度要求为5%。

2．3．4 重复性考察

取样品1份，在同1天内、由同一操作者在同样的环境中按前述方法扫描NIR光谱，测定6次，分别求其平均光谱并利用所建模型预测其主成分的含量。测定的RSD为0．37%，表明该方法重复性良好。

3 讨论

近年来，近红外光谱法在各种质量控制中的应用逐渐增多[11－14]。本研究中建立的吲哚美辛肠溶片近红外定量分析模型在日常应用时，仅需扫描未知样品光谱后，计算出平均光谱代入模型，便可得出其含量，较传统检测方法具有快速、简便、不消耗试剂的优点，且本研究中样品几乎涵盖了全国所有生产企业，故样品数量多、代表性强，故可用于全国各企业的快速定量分析。同时，本方法不局限于实验室，也可用于市场、偏远地区的药品打假、质量控制，不局限于药品终端检测，为实现在线监控吲哚美辛肠溶片的质量提供了依据。

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Construction of a Quantitative M odel for Determination of Indometacin Enteric－Coated Tablets

Wu Qun1，2
（1．Chongqing Institute for Food and Drug Control，Chongqing，China 401121； 2．Chongqing Research Center for Drug Process and Quality Control Engineering，Chongqing，China 401121）

Objective To quantitatively analyze the Indometacin Enteric－coated Tablets by near infrared diffuse reflection spectroscopy technology and chemometrics．M ethods 156 batches of Indometacin Enteric－coated Tablets from 8 different manufacturers were chosen for analyzing．The near infrared diffuse reflection spectrum of the samples was collected；the active pharmaceutical ingredient（API）contents were determined by the conventional method；the model with the partial least square（PLS）algorithm available in the quant was developed．Results The model was based on cross validation with API from 24．61% to 32．96%．78 batches were used as validation set，the RMSEP was 0．508%，and the average relative deviation for the validation set was 0．45%．Conclusion The method is accurate，quick and convenient，which can be used for quick analysis in drug control．

indometacin；near infrared spectroscopy；quantitative model

R927．11；R971＋．1

A

1006－4931(2016)10－0066－03

吴群（1979－），女，大学本科，主管药师，研究方向为药物分析，（电话）023－86072731（电子信箱）920817428＠qq．com。

2016－01－10；

2016－02－07)