大肠癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达

2016-12-28任秀英孙玉鸿朱艳丽王李鸣

黑龙江医药科学 2016年6期

关键词：远高于大肠癌肌层

王莉，任秀英，辛华，孙玉鸿，朱艳丽，王李鸣

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江佳木斯 154003)

大肠癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达

王莉，任秀英，辛华，孙玉鸿，朱艳丽，王李鸣

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江佳木斯 154003)

目的：探讨研究大肠癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达及其临床意义。方法：选择2013-01～2015-01于我院就诊的大肠癌患者共60例作为本次研究的观察组，同期60例正常黏膜者为对照组，依据免疫组化LSAB法检测两组患者的P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达，比较两组患者表达结果并探讨临床意义。结果：观察组患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达率分别为55.67%、40.00%和58.33%，对照组患者分别为11.67%、81.67%和6.67%，观察组患者P53和MMP-9基因表达远高于、nm23-H1基因表达远低于对照组，比较有统计学意义(P<0.05)。浸润深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表达远高于、nm23-H1基因表达远低于肌层及外肌层组，比较有统计学意义(P<0.05)，淋巴结转移患者的P53和MMP-9基因表达远高于、nm23-H1基因表达远低于淋巴结未转移患者，比较有统计学意义(P<0.05)。结论：利用LSAB法检测大肠癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达发现，P53和MMP-9基因表达高于正常，nm23-H1低于正常，P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与大肠癌患者的浸润深度和淋巴结是否转移有直接相关性，这对临床疾病诊断和预后判断有重要意义。

大肠癌；P53；nm23-H1；MMP-9；基因表达

大肠癌是临床上常见消化道恶性肿瘤的一种，是指患者结肠黏膜上皮在多因素作用下发生了基因改变，一般认为遗传因素占据主要地位，发病率和年龄呈正比关系。患者临床症状表现为腹部隐痛，排便习惯和粪便形状改变。近年来，大肠癌的发病率呈现逐渐上升的趋势，研究大肠癌患者的异常基因表达对于研究大肠癌发病机理和治疗方法有重要现实意义。本次研究的主要目的是观察研究大肠癌中P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达及其临床意义，选取2013-01～2015-01于我院就诊的60例大肠癌患者作为本次研究的对象，进行对照试验，分析报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2013-01～2015-01于我院就诊的60例大肠癌患者作为本次研究的观察组，同期60例正常黏膜者为对照组。60例观察组年龄53～78岁，平均(61.8±5.6)岁，其中男32例，女28例，35例为结肠癌，25例为直肠癌，15例患者浸润到黏膜及黏膜下，45例患者浸润到肌层和外膜层，38例为中高分化，22例为低分化，43例发生淋巴结转移，17例没有淋巴结转移；对照组患者年龄36～69岁，平均(53.2±5.4)岁，男33例，女27例。两组患者年龄和性别等一般资料的比较没有显著性差异(P>0.05)，因此具有可比性。

1.2 检测方法

免疫组化检测通过LSAB法进行，阴性对照选择PSB代替一抗，阳性对照选择已知阳性标本，检测步骤如下所述：①常规石蜡切片二甲苯脱蜡，使用梯度酒精逐级水化[1]。②通过3%的双氧水浸泡玻片5min实现阻断类圆形过氧化物酶活性的目的。③使用乙二胺四乙酸(EDTA)修复液修复10min完成微波抗原修复[2]。④在温室下孵育15min封闭非特异性抗原后，以1∶100稀释度的第一抗体滴加，冰箱温度设置4℃过夜。⑤分别将生物素标记的第二抗体、LSAB复合物滴加到玻片[3]。⑥DAB显色，苏木素复染，60℃下烤箱烤60min，最后显微镜观察表达结果。

1.3 评价指标

比较两组患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达情况，分析大肠癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与浸润深度的关系，分析大肠癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与淋巴结转移的相关性。

1.4 统计学方法

采用统计软件SPSS16.0分析，计数资料采取率(%)表示，组间率对比取χ2检验，P<0.05为具有统计学差异。

2 结果

2.1 两组患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达

观察组患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达率分别为55.67%、40.00%和58.33%，对照组患者分别为11.67%、81.67%和6.67%，观察组患者P53和MMP-9基因表达远高于对照组，nm23-H1基因表达远低于对照组，两组患者比较有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达情况比较(n=60)

2.2 大肠癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与浸润深度的关系

浸润深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表达远高于肌层及外肌层组，nm23-H1基因表达远低于肌层及外肌层组，两组患者比较有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 大肠癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与浸润深度的关系

2.3 大肠癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与淋巴结转移的相关性

淋巴结转移患者的P53和MMP-9基因表达远高于淋巴结未转移患者，nm23-H1基因表达远低于淋巴结未转移患者，两组患者比较有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 大肠癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与淋巴结转移的相关性

3 讨论

大肠癌致病原因是患者结肠黏膜上皮在多因素作用下发生了基因改变，因此笔者研究了P53、nm23-H1和MMP-9三种基因的表达[4]。P53是细胞分裂和增殖负调控作用的重要参与者[5]，突变P53不具有细胞调控作用，突变P53和野生P53结合形成的寡聚蛋白可以导致癌变基因的转录失控[6]，从而引起肿瘤的发生。nm23-H1是人类17号染色体上的一个基因[7]，又称为肿瘤的转移抑制基因，产物为17kd的蛋白质，包含152个氨基酸[8]，研究证明它的产物参与微管的集合和分解，通过影响细胞骨架状态开控制细胞的运动、黏连、传递信号以及增殖分化等活动[9]。基质金属蛋白酶是降解细胞外基质的重要参与者，它能有效破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，促进肿瘤的侵袭和转移[10]，肿瘤细胞中可以发现明显的上调活性增强现象。

本研究通过对60例大肠癌患者和正常黏膜者进行对照试验发现。观察组患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达率分别为55.67%、40.00%和58.33%，对照组患者分别为11.67%、81.67%和6.67%，观察组患者P53和MMP-9基因表达远高于对照组，nm23-H1基因表达远低于对照组，两组患者比较有统计学意义(P<0.05)。浸润深度在黏膜及黏膜下患者的P53和MMP-9基因表达远高于肌层及外肌层组，nm23-H1基因表达远低于肌层及外肌层组，两组患者比较有统计学意义(P<0.05)，淋巴结转移患者的P53和MMP-9基因表达远高于淋巴结未转移患者，nm23-H1基因表达远低于淋巴结未转移患者，两组患者比较有统计学意义(P<0.05)。结果表明P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与大肠癌的发生具有密切的相关性，在临床上可以作为疾病侵入的生物学标志物。

综上所述，利用LSAB法检测大肠癌患者P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达发现，P53和MMP-9基因表达高于正常，nm23-H1低于正常者，P53、nm23-H1和MMP-9基因的表达与大肠癌患者的浸润深度和淋巴结是否转移有直接相关性，对临床疾病和预后判断有重要意义。

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黑龙江省卫生和计划生育委员会科研项目，编号：2016-301。