山东地区规模化牛场三种常见疫病的流行病学研究

程子龙，刘 朋，刘思当

(1.山东农业大学 动物科技学院，山东 泰安 271000)



山东地区规模化牛场三种常见疫病的流行病学研究

程子龙1，刘 朋1，刘思当

(1.山东农业大学 动物科技学院，山东 泰安 271000)

[目的]为弄清山东地区规模化牛场三种常见疫病的流行病学特点。[方法]2015年1月到2015年6月从山东省部分地区20个规模化牛场随机采集420份血清样品，包括种牛血清41份、奶牛血清278份、肉牛血清101份，利用ELISA方法检测牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎及牛副结核病三种常见疫病抗体水平，20个牛场均未免疫上述三种传染病疫苗。检测[结果]表明，在山东地区牛场中，这三种传染病普遍存在感染，其中病毒性腹泻病毒抗体场阳性率为65%，个体平均阳性率为52.62%；牛传染性鼻气管炎病毒gE抗体场阳性率为55%，个体平均阳性率为23.33%；牛副结核分支杆菌抗体场阳性率为10%，个体平均阳性率为2.14%。[结论]通过本次流行病学调查，进一步了解三种常见传染病在山东地区不同类型牛场的流行情况，对山东地区牛场疫情预测及疫病防控起到一定的指导作用。

山东；牛病毒性腹泻；牛传染性鼻气管炎；牛副结核病；流行病学调查

牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea，BVD)，又称黏膜病，是由牛病毒性腹泻病毒引起的以发热、黏膜糜烂、溃疡、白细胞减少、腹泻、持续感染、咳嗽、流产为主要特征的牛的急性、热性、接触性传染病[1]。除侵害牛以外，BVDV还能感染羊、鹿、牦牛等反刍动物以及猪[2]，宿主比较广泛。目前该病在世界范围内广泛流行，BVDV是造成全球奶牛、肉牛养殖业经济损失的主要病原体[3]，也是牛源生物制品(如血清等)的重要污染物。在我国将BVD定为三类动物疫病，世界动物卫生组织(OIE)将其列为须申报的动物疫病及国际动物胚胎交流病原名录三类疫病。

牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis, IBR)又称“坏死性鼻炎”或“红鼻病”，是由牛传染性鼻气管炎病毒引起牛的一种急性、热性、接触性传染病[4]，主要表现为呼吸道黏膜发炎、呼吸困难、流鼻涕等症状，可引起脓疱性阴道炎、龟头炎、结膜炎、幼牛脑膜脑炎、乳房炎、奶牛流产、产奶量下降等[5]。IBRV具有广泛的组织嗜性，可引起牛的呼吸系统和生殖系统疾病[6]，在临床上常呈隐性感染，持续性排毒，同时也可削弱机体的抵抗力，世界卫生组织(OIE)将该病列为B类动物疫病，也是我国进出口动物必检病之一。

牛副结核病(Bovine Paratuberculosis)是由副结核分支杆菌(Mycobacterium aviumsubspecies. Paratuberculosis, MAP)引起的以牛、羊等反刍动物为主的慢性消耗性传染病，以慢性增生性、卡他性肠炎为特征，病畜进行性消瘦[7][8]，间歇性或持续性下痢，剖检肠黏膜脑回样增厚，肠黏膜固有层有大量淋巴细胞、巨噬细胞、上皮样细胞及多核巨细胞浸润[27]。可通过病畜传染给人类或其他动物。本病在全球范围内广泛流行，严重影响着养牛业的健康发展和人类健康。

1 材料与方法

1.1 样品来源与检测试剂盒

采集的血清样品来自山东地区20个规模化牛场，其中包括2个种牛场的41份血清、12个奶牛场的278份血清、6个肉牛场的101份血清，共计420份血清样品。采集的20个规模化牛场均未免疫牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛副结核病等三种疫病疫苗。

牛病毒性腹泻病毒抗体检测试剂盒、牛传染性鼻气管炎病毒gE抗体检测试剂盒、牛副结核病分枝杆菌抗体检测试剂盒均购于美国IDEXX公司。

1.2 方法

牛病毒性腹泻-黏膜病、牛传染性鼻气管炎、牛副结核病分支杆菌的抗体检测均按照IDEXX ELISA试剂盒的说明书进行操作。

2 实验结果及分析

对采集的41份种牛血清、278份奶牛血清、101份肉牛血清样品，利用上述方法进行检测，检测结果表明，牛病毒性腹泻病毒抗体场阳性率为65%，个体平均阳性率为52.62%，检测结果见表1；牛传染性鼻气管炎病毒gE抗体场阳性率为55%，个体平均阳性率为23.33%，检测结果见表2；牛副结核分支杆菌抗体场阳性率为10%，个体平均阳性率为2.14%，检测结果见表3。虽然在不同牛场都能检出这三种传染病，但是这三种传染病抗体阳性率存在差别，牛病毒性腹泻病毒抗体阳性率普遍较高，而牛副结核分支杆菌抗体阳性率最低。

表1 牛病毒性腹泻抗体检测结果

表2 牛传染性鼻气管炎gE抗体检测结果

表3 牛副结核分支杆菌抗体检测结果

图1 不同牛场三种常见疫病抗体阳性率对比

2.1 牛病毒性腹泻抗体阳性率分析

从检测结果来看，不同牛群牛病毒性腹泻抗体场阳性率和个体阳性率都很高，种牛场、奶牛场、肉牛场场阳性率分别达到100%、75%、33.33%，个体阳性率为73.17%、56.12%、34.65%，说明种牛场、奶牛场、肉牛场普遍存在BVDV感染现象，这可能与BVDV持续性感染(PI)的特点有关。BVDV可以在PI牛体内存活数月甚至终身，不表现临床症状或出现与免疫病理有关的症状，PI牛自身不产生中和抗体，可持续、反复不定地向外界排毒[9]，导致BVDV在牛群内散播，从而导致牛群高感染状态。

从三种牛群类型来看，种牛场阳性率最高，而肉牛场阳性率相对较低。这可能与肉牛饲喂周期相对较短、种牛饲喂周期较长有关，较长的饲喂周期可导致种牛群感染的机率显著增加，因此种牛群抗体阳性率较高。

从1980年我国首次报道分离到BVDV以来，陆续多个省份检出BVD阳性抗体，并且阳性率很高。邱昌庆等1998年报道山东省肉牛场BVD抗体阳性率为59.6%[10]；杨得胜等2008年报道福建省2006、2007、2008三年规模化牛场BVD抗体平均阳性率在80%以上[11]；陈备娟、王炜、菅复春、李树博、邓明亮、王淑娟、童钦等人在2010～2012年做的流行病学调查显示，BVD血清抗体奶牛阳性率最低为58.6%、最高为69.1%，肉牛阳性率最低为31.39%、最高为56.5%，牦牛阳性率为30.08%[9][12-17]。李智勇等2014年对内蒙古地区奶牛场调查结果显示，BVD血清抗体阳性率为88.9%[18]；2014年岳瑞超等报道山东省济南市、济宁市及莱西市牛BVD血清抗体平均阳性率为38.3%[19]。而此次我们的调查结果显示种牛场、奶牛场、肉牛场个体阳性率分别为73.17%、56.12%、34.65%，平均阳性率为52.62%，低于内蒙古地区，与其他省份基本一致。以上数据说明BVD在我国已经广泛流行，多呈亚临床型或隐性感染，虽然没有引起明显的临床症状，但是会造成产奶量降低、肢蹄病发病率升高，能增加其他疾病的易感性[20]，从而造成巨大的间接损失，应引起足够重视。

2.2 牛传染性鼻气管炎gE抗体阳性率分析

种牛场、奶牛场和肉牛场IBRVgE抗体场阳性率分别为50%、50%、66.67%，个体阳性率分别为26.83%、17.63%、37.62%，虽然场阳性率较高，但是个体阳性率相对较低，说明本病波及的牛场范围较大，阳性牛群中个体阳性率并不是很高。

2007年～2013年张鹏飞、颜邦芬、贺晓龙、徐晓琴、王炜、李树博、王单晶等人采用ELISA或者血清中和试验方法分别对全国各地区牛血清进行IBRV抗体检测，阳性率最低为31.3%、阳性率最高为50.67%[9,15,21-25]；而2014年李智勇等报道内蒙古地区奶牛血清IBRV抗体平均阳性率高达75.7%[26]；2014年岳瑞超等报道的山东省济南市、济宁市及莱西市牛血清IBRV抗体平均阳性率为27%[19]；我们此次的流行病学调查结果显示山东地区牛血清IBRV抗体个体平均阳性率为23.33%，略低于岳瑞超等人2014年报道的结果，从上面数据来看，山东地区总体阳性率低于我国其它地区，但是波及的牛场范围较广，存在普遍感染现象。

2.3 牛副结核病分支杆菌抗体阳性率分析

种牛场、奶牛场、肉牛场副结核病分支杆菌抗体场阳性率分别为50%、8.33%、0，个体阳性率分别为9.76%、1.8%、0，不同牛场阳性率差别较大，种牛场阳性率高于奶牛场、肉牛场，并且在抽检的的肉牛场里，没有检测出副结核分支杆菌抗体阳性牛，仅在抽检的12个奶牛场中1个检出5份牛副结核分支杆菌抗体阳性牛。由于副结核病感染前期主要以细胞免疫为主，后期则出现体液免疫，因此使用ELISA方法很难检出感染副结核分支杆菌前期的牛，根据有关研究报道，两岁以前的牛很难利用ELISA方法检出是否感染副结核分支杆菌。奶牛场、肉牛场牛的年龄相对较小，抽检的牛场本身阳性率不高，因此在肉牛场未检出副结核分支杆菌抗体，在奶牛场副结核分支杆菌抗体阳性率很低。2005～2015年十年间，全国各地区牛血清副结核分支杆菌抗体阳性率在2.8%～18%[26-33]，我们调查的平均阳性率为2.14%，与之前调查的结果基本相符。虽然在山东地区肉牛场没有检出副结核分支杆菌抗体阳性牛，但是周边地区副结核阳性率相对较高，因此山东地区感染副结核病的压力比较大，山东地区牛场应做好生物安全措施，防止疫病传入。

2.4 三种疫病在不同牛场中阳性率对比分析

从图一可以看出，在三种牛场中BVDV抗体阳性率都在较高水平，副结核分支杆菌抗体阳性率普遍较低；种牛场三种疫病抗体阳性率普遍较高，属于高感染率牛群；肉牛IBRV抗体阳性率较高，与肉牛呼吸道疾病高发相吻合，可能与流动性较大有一定关系；这三种疫病在奶牛场普遍存在感染，奶牛场应尽早采取净化措施。

3 讨论

3.1 山东地区种牛场、奶牛场、肉牛场均存在牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛副结核病三种牛常见传染病的感染。并且种牛场、奶牛场阳性率相对较高，山东周边地区这三种疫病的感染率较高。因此各牛场应严格做好生物安全措施，不从疫区引牛，在引牛时应严格检疫这三种疫病，防止引进阳性牛、持续性感染牛、隐性感染牛。另外牛场应定期对三种疫病进行检疫、监测，及时隔离或淘汰阳性牛、持续性感染牛。

3.2 BVD在三种疾病中阳性率最高，提示在山东地区的牛场中BVDV感染较重。感染BVDV的牛虽然很少表现典型的临床症状，或临床症状较轻，直接引起的死亡率不高，但BVD有持续感染、免疫耐受和免疫抑制等特点，可使乳房炎、肢蹄病、生殖道疾病的发病率大大提高，由此带来的产奶量下降、牛奶质量降低、淘汰牛数量增加等间接损失巨大。病毒性腹泻持续性感染的特点是造成BVD广泛传播的主要原因，因此检出和消除PI牛是控制BVD的中心环节[9]。牛场应制定有效的BVD清除计划，做好牛病毒性腹泻病的监测工作，逐步实现BVD的净化。

3.3 牛副结核分支杆菌抗体阳性率较低，但由于牛副结核病ELISA检测方法的缺陷，ELISA只适用于两岁以上牛的检测，牛副结核分支杆菌感染的青年牛不易检出，因此并不代表牛场未存在牛副结核分支杆菌的感染，不能掉以轻心。

3.4 牛场应该提高饲养管理水平，饲喂优质的饲草饲料，改善牛舍环境，保证牛群健康，增强牛的体质，提高牛的抵抗力。定期对牛舍、饲养工具进行消毒，及时清除牛舍内的粪尿，并做无害化处理，禁止非本场人员及车辆进入牛场，尤其是养殖区，切实做好生物安全措施，防止三种疫病的发生。

[1] 殷震,刘景华.动物病毒学[M].第二版.北京:科学出版社,1997:645-652.

[2] James F, Evermann, Julia F, et al. Clinical and epidemiologic observations ofbovine viral diarrhea virus in the northwestern United States [J]. Vet Microbiol,2002,89 : 129～139.

[3] 赵德明.养牛与牛病防治[M].北京:中国农业大学出版社,2004:186-189.

[4] Siiegl G. The Parovovirus[M]. New York:Plenum Press, 1984.

[5] 殷震,刘景华.动物病毒学[M].第二版.北京:科学出版社,1997:988-1029.

[6] Schultz R D, Sheffy B E. Current status of viral infection of bovine genital tract with emphasis on IBR/IPV virus[J].In: Current therapy in theriogenology, ed. Morrow D A,W B Saunders Co, Philadelphia P A,1980:503-509.

[7] Olsen I, Sigurgardottir G, jonne B. Paratuberculosis with Special Reference to Cattle[J].A Review Vet Q,2002,24:12-28.

[8] 陆承平.兽医微生物学[M].3版.北京:中国农业出版社,2001.

[9] 王炜. 牛主要呼吸道病毒病血清学调查、牛病毒性腹泻病毒分离株鉴定及疫苗研究[D].中国农业科学院,2014.

[10] 邱昌庆,高双娣,周继章,程淑敏,李英才,陈桂华,杨学礼. 我国规模化肉牛场牛病毒性腹泻-粘膜病流行状况监测[J]. 中国兽医科技,1998,19(8):15-16.

[11] 杨得胜,林芬,魏良宇,吴波平,王琳轰,黄雁,洪英. 福建省牛病毒性腹泻病的血清学调查[J]. 中国动物检疫,2008,27(12):36-37.

[12] 陈备娟,高全新,朱毅兴,陆仁初,李媛媛. 牛病毒性腹泻病的流行病学调查[J]. 上海畜牧兽医通讯,2010,55(05):43-44.

[13] 菅复春,王建领,王炜,刘海花,付彤,邓立新,郝丽影,寇亚楠,张龙现,宁长申. 河南牛病毒性腹泻-黏膜病流行病学调查[J]. 中国兽医杂志,2012,59(05):3-6.

[14] 邓明亮,费文涛,纪素坤,张瑞,陈颖钰,郭爱珍. 牛病毒性腹泻-黏膜病的流行病学调查[J]. 养殖与饲料,2012,11(11):33-35.

[15] 李树博. 辽宁省牛、羊BVDV、IBRV血清流行病学调查与IBRV病毒分离鉴定[D].中国农业科学院,2012.

[16] 王淑娟,王华,宋晓晖,孙成友,徐天刚,刘春菊,张永强,赵永刚,刘海生,王志亮. 牛病毒性腹泻/黏膜病的诊断流行病学调查及防控[J]. 中国兽医杂志,2014,61(03):38-40.

[17] 童钦. 牛呼吸道病毒病血清学调查及其多重RT-PCR诊断方法的建立与初步应用[D].吉林农业大学,2012.

[18] 李智勇,石顺利,王艳杰,陈德浩,李平安,关平原. 内蒙古地区奶牛病毒性腹泻/黏膜病血清流行病学调查[J]. 畜牧与饲料科学,2014,42(03):106-108.

[19] 岳瑞超,程子龙,李宁,刘思当. 山东牛场常见传染病血清流行病学调查[J]. 中国动物检疫,2014,35(06):58-61.

[20] 王炜,武华. 欧美牛病毒性腹泻防控措施及对我国的启示[J]. 中国畜牧兽医文摘,2010,26(05):64-67.

[21] 颜邦芬. 牛传染性鼻气管炎病毒抗体间接ELISA的建立及其在流行病学研究中的应用[D].华中农业大学,2007.

[22] 张鹏飞. 内蒙古地区牛传染性鼻气管炎病毒的分离与鉴定[D].内蒙古农业大学,2007.

[23] 贺晓龙,韩志辉. 青海省牛传染性鼻气管炎及病毒性腹泻黏膜病血清学调查[J]. 中兽医医药杂志,2011,30(01):29-32.

[24] 徐晓琴. 牛传染性鼻气管炎病毒LN01/08株分离鉴定及其主要功能基因序列分析[D].中国农业科学院,2010.

[25] 王单晶. 牛传染性鼻气管炎阻断ELISA抗体检测方法的建立与应用[D].华中农业大学,2013.

[26] 李智勇. 内蒙古地区奶牛主要传染病的血清流行病学调查[D].内蒙古农业大学,2014.

[27] 刘倩. 牛和羊驼副结核病间接ELISA检测方法的研究[D].南京农业大学,2009.

[28] 迟磊. 牛副结核病多重组抗原间接ELISA方法的建立及应用[D].吉林农业大学,2007.

[29] 钟映梅,张俊峰,包玉杰,刘洪雨. 牛副结核病的血清学监测[J]. 畜牧兽医科技信息,2005,21(05):56.

[30] 黄素文,张吉红,李如松,倪健波,黄绍棠. 吸附ELISA检测奶牛副结核病[J]. 畜牧与兽医,2005,71(07):43-44.

[31] 徐刚,蒋曙光,王蒴,王治才. 牛副结核及其防治[J]. 草食家畜,2014,35(04):53-56.

[32] 瞿慧,方桂明,顾晓,李东尧,刘淡宁,王恒安. 奶牛副结核病的血清学调查与防控措施[J]. 中国畜禽种业,2015,31(04):101-103.

[33] 田宝,白乙拉,蒋永禄,孙庆宇,王艳杰,李智勇,关平原,张七斤. 内蒙古地区部分奶牛场副结核病的血清学调查[J]. 畜牧与饲料科学,2014,42(12):21-22+67.

Epidemiological Investigation of Three Common Diseases in Large Scale Cow Farms in Shandong Province

CHENG Zi-long1, LIU Peng1, LIU Si-dang1*

(CollegeofAnimalScienceandTechnology,ShandongAgricultureUniversity,Tai'an,Shandong, 271000)

420 serum samples were randomly collected from 20 scale cow farms from some regions of Shandong province during January to June in 2015, which included 41 breeding cattle serum samples, 278 dairy cattle serum samples and 101 beef cattle serum samples. The antibody level of bovine viral diarrhea, infectious bovine rhinotracheitis and bovine paratuberculosis, which are three common diseases, were detected by ELISA and none of the 20 scale cow farms had been vaccinated with the three types of vaccines which are mentioned above. The results showed that the three types of infectious diseases above were widespread in cow farms in Shandong province. The positive rate of bovine viral diarrhea virus (BVDV) antibody was 65%, and the individual average positive rate was 52.62%.The positive rate of infectious bovine rhinotracheitis (IBR) antibody was 55%, and the individual average positive rate was 23.33%. The positive rate of MAP antibody was 10%, and the individual average positive rate was 2.14%. Through the epidemiological investigation, we could further understand the epidemic situation about the three types of common infectious diseases in large scale cow farms in Shandong province. It also played a guiding role in forecasting epidemic, preventing and controlling diseases of the cow farms in Shandong province.

Shandong; bovine viral diarrhea; infectious bovine rhinotracheitis; bovine paratuberculosis; epidemiological investigation

2015-07-20修改日期:2015-07-25

山东省牛产业技术体系资助(SDAIT-12-011-04)

程子龙(1991-)，男，山东聊城市人，在读硕士，主要从事动物临床病理学研究，E-mail：chengzilong2014@126.com

刘思当，教授，博士，博士生导师， E-mail：liusid@sdau.edu.cn

S823.2

A

1001-9111(2016)01-0044-05