茶籽油脂肪酸指纹图谱的比较与分析

李 梅，张 季，王兰兰，蔡 璐

(遵义市产品质量检验检测院，贵州 遵义 563000)



茶籽油脂肪酸指纹图谱的比较与分析

李 梅，张 季，王兰兰，蔡 璐

(遵义市产品质量检验检测院，贵州 遵义 563000)

以茶籽油为研究对象，将茶籽油与其它植物油通过气相色谱法，图谱数据采用平均矢量法，并通过导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统的软件”进行校准匹配，创建了茶籽油和其它植物油的标准指纹图谱，并对它们的相似度进行了分析。分析表明：同类植物油脂之间相似度高；不同类植物油脂间相似度低。建立茶籽油脂肪酸成分的特征指纹图谱。为茶籽油的品质评价和质量控制标准的制定提供了科学依据。

茶籽油；气相色谱法；脂肪酸；指纹图谱

茶油与椰子油、橄榄油、棕榈油都称为世界上的四大木本食用植物油，丰富的活性成分和独有的脂肪酸组成使它一直保有保健食用油的称号。主要分布在我国的广西、江西、浙江、广东、湖南等地[1]。茶籽油的脂肪酸组成通常含有79%的油酸、10%的亚油酸和1%的亚麻酸, 还含有丰富的生育酚、植物甾醇、角鲨烯等营养物质, 容易被人体消化吸收,具有降低人体血清的胆固醇，预防和治疗高血压、心血管系统疾病的功效[2-3]。

样品的前处理是GC分析植物油脂中脂肪酸的关键步骤，不恰当的前处理方法不仅耗时、繁琐，还会给我们带来极大的分析误差[4-5]。近年来，茶叶、白酒以及蜂胶等食品方面也开始逐步采用中药标准建立指纹图谱，帮助消费者和监管者控制产品质量和协助掺假检测[6-7]。本文对茶籽油进行了研究，主要比较了茶籽油和其它三种植物油的指纹图谱。

1 实 验

1.1 供试药剂

37种脂肪酸混标标准品(10 mg/mL, 1.2 mL)购于上海安谱实验科技股份有限公司；色谱甲醇，美国天地有限公司；色谱异辛烷，美国天地有限公司；氢氧化钠和氯化钠，天津市科密欧化学试剂有限公司；无水硫酸钠，天津市光复科技发展有限公司；三氟化硼甲醇溶液，上海安谱实验科技股份有限公司。

1.2 溶液的制备

0.5% mol/L的氢氧化钠-甲醇溶液: 将2 g氢氧化钠溶于100 mL纯度为99.5%以上的甲醇中。三氟化硼甲醇溶液：质量为14%的三氟化硼甲醇溶液。饱和氯化钠：称取36 g氯化钠于烧杯中，加入100 mL蒸馏水搅拌溶解即可。

1.3 仪器设备

气相色谱仪带FID检测器，美国安捷伦公司；工作站软件，Agilent OpenLab工作软件；色谱柱，CNW CD-2560(100.0 m×0.25 mm×0.25 μm)；电子天平，ALC-210.4型，德国Sartorius公司。数显恒温水浴锅，HH-6型，常州润华电器有限公司。

1.4 样品检测方法

1.4.1 前处理方法

称取植物油脂试样100～200 mg于250 mL磨口三角瓶中，加入4 mL 0.5% mol/L的氢氧化钠-甲醇溶液和少许沸石，向三角瓶中导入几分钟干燥氮气，排掉空气后迅速接上冷凝装置，在85 ℃左右的水浴中回流至油滴全部消失，大概20 min左右；回流过程中每隔1～2 min缓慢的摇动三角瓶，以防止氢氧化钠生成固态附着在瓶壁上。再用移液管从冷凝管上部缓慢的加入5 mL三氟化硼甲醇溶液于沸腾的溶液里，继续沸腾10 min；接着再继续加入10.0 mL异辛烷，取下冷凝装置和三角瓶，迅速向三角瓶中加入20 mL饱和氯化钠溶液，盖上瓶盖，猛烈振摇30 s；放置2 min使其静止分层，取上层溶液2～3 mL于10 mL比色管中，加入适量无水硫酸钠除去溶液中的水痕迹，静止过滤后取清液1 mL于进样瓶中上机检测。

1.4.2 样品的气相色谱检测条件

仪器: Agilent 7890A气相色谱仪(美国安捷伦公司)；色谱柱：CNW CD-2560 (100.0 m×0.25 mm×0.25 μm)；色谱柱升温程序：初始柱温140 ℃(保持5 min)→7 ℃/min升温→222 ℃(保持8 min)→10 ℃/min升温→240 ℃(保持15 min)；柱流速：0.6 mL/min；载气：高纯氮；纯度99.999%；进样量：1 μL；分流比30：1；进样口温度：240 ℃；检测器温度：260 ℃；空气流量：300 mL/min；氢气流量：30 mL/min；尾吹气流量：25 mL/min。

2 植物油脂指纹图谱的建立

2.1 一般菜籽油指纹图谱及指纹图谱分析

把菜籽油的指纹图谱分为一般菜籽油标准指纹图谱和低芥酸菜籽油标准指纹图谱[8]。

本实验中菜籽油的样品量很多，我们随机选取8个芥酸值“3.0～60.0”之间的合格的菜籽油作为一般菜籽油的样品谱图，根据《中药注射剂色谱指纹图谱试验研究技术指南(试行)》的要求，导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统的软件”进行校准验证，生成指纹图谱[9-10]。

表1 一般菜籽油的标准指纹图谱分析

2.2 低芥菜籽油指纹图谱及指纹图谱分析

实验随机选取了8个芥酸值在“ND-3.0”之间的合格的菜籽油样品，经气相色谱检验获得脂肪酸甲酯组成成分及其相对含量，再通过人工选择有效峰和对所有峰共有率的筛查，确定共有峰含为14个。

表2 低芥酸菜籽油的标准指纹图谱分析

续表2

3C18 028 3541 8010C22 033 6810 334C18 1n9c29 17958 8011C22 1n934 6421 815C18 2n6c30 36619 2012C24 036 9660 166C20 030 8900 5813C24 138 1220 197C20 131 7231 65

2.3 大豆油的标准指纹图谱

本实验一共采集大豆油样品8个批次，经气相色谱检验获得脂肪酸甲酯组成成分及其相对含量，把样品谱图导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统的软件”进行校准验证，再通过人工选择有效峰和对所有峰共有率的筛查，确定共有峰含为11个。

表3 大豆油的标准指纹图谱分析

2.4 茶籽油的标准指纹图谱

本实验一共采集茶籽油样品8个批次，经气相色谱检验获得脂肪酸甲酯组成成分及其相对含量，把样品谱图导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统的软件”进行校准验证，再通过人工选择有效峰和对所有峰共有率的筛查，确定共有峰含为11个。将所有共有峰脂肪酸甲酯的峰面积和保留时间，采用平均矢量法，建立山菜籽油标准指纹图谱(见表4)。

表4 茶籽油的标准指纹图谱分析

2.5 植物油脂标准指纹图谱相似度分析

采用共有峰模式建立的标准指纹图谱，需要将所有的大豆油、茶籽油和菜籽油的样品谱图，导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统( 2004A) ”软件，通过夹角余弦法，建立样品之间和样品与标准指纹图谱之间的相似度[11-12]。详见表5。

表5 茶籽油指纹图谱相似度

参考国家药典委员会颁布的“中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南(试行) ”的相似度划分界限[13-14]，将相似度在0.90以上作为符合该种油脂相似度评定标准，相似度低于0.90的判定不符合。每种油脂的样品指纹图谱与标准指纹图谱很接近，说明该标准指纹图谱能代表该类样品的整体性[15]。

表6 茶籽油与其它植物油标准指纹图谱之间的相似度

通过大豆油、低芥菜籽油、一般菜籽油和茶籽油的标准指纹图谱间的相似度 (见表7)，比较每类油脂的标准指纹图谱的相似度。

表7 四类油脂标准指纹图谱相似度

大豆油与一般菜籽油之间的差异为0.712，一般菜籽油与低芥菜籽之间的差异为0.952。可见，一般菜籽油与低芥菜籽油虽然因为芥酸值的不同分为了高低两类，但是它们都棣属于菜籽油这一大类，组成成份相近，所以相似度高[16-17]。

3 结 论

本实验通过GC法将茶籽油和其它植物油的脂肪酸检验结果采用平均矢量法建立了茶籽油和其它植物油的标准指纹图谱并进行了相似度分析，得出一般菜籽油、低芥菜籽油、大豆油和茶籽油样品图谱与标准指纹图谱之间相似度分别为0.973、0.995、0.992和0.983，说明同类植物油脂之间相似度高；而把一般菜籽油、低芥菜籽油、大豆油和茶籽油之间进行标准指纹图谱分析，则发现大豆油与一般菜籽油之间的差异最大，为0.712，说明不同类植油脂间相似度低。茶籽油中饱和脂肪酸含量为11.07%，低于菜籽油以外的其它4种植物油，所以茶籽油会降低胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。茶籽油中不饱和脂肪酸含量为81.85%，高于大豆油和棕榈油等其它植物油的含量，说明茶籽油对胆固醇有明显降低的作用，使得人患冠心病的几率降低。

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Comparison and Analysis of Fatty Acid Fingerprint in Tea Seed Oil

LIMei,ZHANGJi,WANGLan-lan,CAILu

(Inspection and Testing Institute for Product Quality in Zunyi City, Guizhou Zunyi 563000, China)

Taking tea seed oil as the research object, using meteorological chromatography, tea seed oil and other vegetable oils were imported to Similarity Evaluation System for Chromatographic Fingerprint of TCM by mean vector technique. The standard fingerprint of tea seed oil and other vegetable oils were established. The results of similarity analysis of standard fingerprints indicated that higher similarity was observed between the similar vegetable oils. The characteristic fingerprint of fatty acid composition of tea seed oil was established, it had laid a foundation for controlling the quality of tea seed oil by fatty acid composition. It provided the scientific basis for the quality evaluation and quality control standard of tea seed oil.

tea seed oil; gas chromatography; fatty acid; fingerprint

李梅(1982)，女，硕士研究生，研究方向：食品检测。

O657.7+1

A

1001-9677(2016)022-0109-04