CHEMCLIN 600化学发光仪筛查梅毒抗体假阳性分析

张春雷，李兰亚（沭阳县中医院检验科，江苏沭阳　223600）

技术方法

CHEMCLIN 600化学发光仪筛查梅毒抗体假阳性分析

张春雷，李兰亚
（沭阳县中医院检验科，江苏沭阳223600）

梅毒抗体；CLIA；TPPA

梅毒是由苍白螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病，绝大多数是通过性途径传播。我国自20世纪80年代梅毒开始复燃以来，发病率逐年升高[1]。目前，实验室常用的检查方法主要有两类：一类是非梅毒螺旋体抗原血清学试验，该类试验对早期、晚期和潜伏期梅毒的诊断存在假阴性；另一类是梅毒螺旋体抗原血清学试验，检测血清中抗梅毒螺旋体IgG或IgM，具有高敏感性和高特异性，一般用作确认试验[2]。微粒子化学发光免疫测定法（CLIA)是用于检测微量抗原或抗体的一种标记免疫检测技术，具有操作简便，自动化程度高，结果易于保存，高敏感度和高特异度等优点[3]。我院2014年引进北京科美生物技术有限公司生产的CHEMCLIN 600全自动化学发光仪，2015年全年共检测31023例标本，发现316例阳性标本，但使用明胶颗粒凝集试验(TPPA)法复查，其中61例为假阳性，为了探查原因，进行分析研究如下。

1　材料与方法

1.1标本来源血液标本采集的对象为沭阳县中医院2015年1月-2015年12月住院和门诊患者31023例，年龄0-90岁。采集患者血液标本后立即以4000r/min离心10min，收集血清用于检测。

1.2检测方法使用北京科美生物技术有限公司生产的CHEMCLIN 600全自动化学发光仪，以及北京科美生物技术有限公司生产的梅毒抗体化学发光诊断试剂盒检测梅毒抗体，操作均按仪器和试剂盒说明书进行。每次检测以定值参比血清(科美)作为质控，质控品和定标液均购自科美公司。明胶颗粒凝集试验(TPPA)法试剂盒购自日本富士瑞必欧株式会社。

1.3评价方法梅毒特异性抗体检测的初筛、复检及确认程序：对初次用化学发光仪进行筛查试验呈阳性反应的标本使用TPPA试剂复检，各次筛查试验严格按照试剂盒说明书及标准操作规程(SOP)进行操作；CLIA初阴性标本，随机选择200例使用TPPA试剂复检，如有阳性，使用TPPA法复查。

1.4判断标准

1.4.1化学发光法：S/CO≥1.00为阳性，＜1.00为阴性。

1.4.2TPPA法：阴阳性结果按试剂盒使用说明书进行判定。

2　结果

2.1316例CLIA检测阳性标本TPPA复检结果 31023例患者中，使用化学发光法共筛检出梅毒特异性抗体阳性316例，阳性率为1.0%，经TPPA复检，其中255例为阳性，阳性符合率为80.7%，假阳性61例，假阳性率为19.3%。

2.2CLIA法S/CO值与TPPA结果以TPPA结果为标准，CLIA检测S/CO值＞10.0时， 梅毒抗体阳性率为100%，S/ CO值＜10.0时，出现61例假阳性，并且S/CO值越小，阳性率越低。见附表：

附表　CLIA法不同S/CO值与TPPA结果比较（例）

3　讨论

国内外大量的研究结果表明，CLIA检测梅毒抗体作为初筛试验，具有较高的灵敏度和特异性，但以TPPA法作为确诊试验，明显存在有假阳性，本研究结果与文献报告一致[4]。关于CLIA检测假阳性结果的原因，分析如下。

本研究使用CHEMCLIN 600全自动化学发光仪进行梅毒抗体初筛试验，以TPPA法为确诊试验发现，在S/ CO值为1.0-9.99时61例为假阳性。原因可能是：⑴人体内某些抗原或抗体干扰了检测结果。⑵多种疾病的影响，多种感染性疾病、怀孕、结缔组织疾病和肿瘤等均可导致CLIA法假阳性[5]。⑶标本的影响，严重溶血或纤维蛋白原较多，甚至会形成交叉反应影响检测结果。Kiely等为此指出[6]，化学发光法有时高S/CO值也可能为假阳性。⑷机器清洗样品杯有残余，加样器污染或底物受污染而造成本底升高。在工作中为降低化学发光法的假阳性率，加样器必须专用，加样吸头必须确保干净无污染，在加发光底物液的过程中需避免加样吸头与板孔或手指接触，以防污染。

本研究发现，CLIA法S/CO值越高与TPPA法的符合率越高，S/CO值为5.0-9.99时，只有1例假阳性，符合率为98%；S/CO值＞10.0时符合率为100%；当CLIA检测S/ CO值＜10.0时，可能出现假阳性。可见在S/CO值＞5.0时，可以排除大部分梅毒抗体假阳性结果。同时本研究发现，化学发光法初筛检测为阴性的200例标本，使用TPPA试剂复检也均为阴性，提示两种检测方法阴性符合率上没有区别。但与CLIA相比，TPPA法操作较繁琐，而CLIA的自动化操作可明显减少手工操作中的偶然因素。

综上所述，CHEMCLIN 600全自动化学发光仪检测梅毒,具有灵敏度高、特异度高、重复性好、线性范围宽等优点，尤其是可大批量检测，可减轻检测人员负担。CHEMCLIN 600全自动化学发光仪检测阴性标本与TPPA法基本没有区别，但明显存在假阳性。这就要求慎重对待每一例阳性疑似标本，必须结合TPPA法复检，才能有效降低假阳性率，必要时需要病人定期复检，减少窗口期造成的假阴性。

[1]邵勇.梅毒流行病学特点及防治研究[J].临床和实验医学杂志，2008，7(2):15-16.

[2]陈祥生．我国梅毒流行现状及防治策略[J].国际流行病传染病学杂志，2008，35(2)：73-77,91．

[3]孙俊，刘美华，闫忠，等.两种梅毒检测方法的比较［J］.检验医学与临床，2011，8(9):1039-1041．

[4]金国江，邹大伟，杜毅鑫，等．CMIA法测定梅毒螺旋体抗体在临床筛查梅毒的应用［J］．中国卫生检验杂志，2012，2（28），1890-1891．

[5]尹建奇，李晓娥，刘平英，等.2592份血清中梅毒血清学生物学假阳性结果的临床分析[J].中国皮肤病学杂志,2001, 15(5):317-318.

[6]Kiely P, Walker K, Parker S, et al.Analysis of sample-to-cutoff ratios on chemiluminescent immunoassays used for blood donor screening highlights the need for serologic confirmatory testing[J]. Transfusion, 2010,50(6)∶1344-1351.

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1004-6879（2016）06-0504-02

（2016-04-14）