辽宁绒山羊胚胎移植受体母羊生殖内分泌调控规律研究

张晓鹰,郭丹,王洗清

(1.辽宁省畜牧科学研究院,辽宁 辽阳 111000; 2.辽宁省凤城市畜牧技术推广中心,辽宁 凤城 118100)

辽宁绒山羊胚胎移植受体母羊生殖内分泌调控规律研究

张晓鹰1,郭丹1,王洗清2

(1.辽宁省畜牧科学研究院,辽宁 辽阳 111000; 2.辽宁省凤城市畜牧技术推广中心,辽宁 凤城 118100)

本研究以30只母羊为试验样本,研究在胚胎移植后,经过同期发情处理和超排处理的妊娠母羊、未妊娠母羊和自然发情妊娠母羊的生殖内分泌调控规律。用放射免疫法测定血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)和促乳素(PRL)5种激素动态变化,同时测定血清中生化指标和白介素-1 (IL-1 )、白介素-6 (IL-6)、转化生长因子- (TGF- )、胰岛素样生长因子-II(IGF-II)、表皮生长因子(EGF)等五种细胞因子水平和血清胆固醇、葡萄糖、总蛋白、钙、钾等的变化规律。结果表明:血清FSH、LH、E2、P4、PRL、表皮生长因子EGF和血清胆固醇、钙等物质在妊娠受体和早期妊娠失败受体血清中含量存在的差异,为预测胚胎移植后受体羊经过2个情期后能否继续妊娠提供了重要参考信息。

辽宁绒山羊;胚胎移植受体母羊;生殖内分泌

辽宁绒山羊是世界上最优秀的绒山羊品种,具有产绒量高、绒纤维长、细度良好、体形大、适应性强、遗传性能稳定、改良低产山羊效果显著等特点,其产绒量居全国之首,被誉为“中华国宝”,是我国农业领域拥有自主知识产权的特殊品种资源。主要分布在盖州及其相邻的岫岩、辽阳、本溪、凤城、宽甸、庄河、瓦房店等地区。辽宁绒山羊种用价值极高,改良低产羊效果显著,被称为“中国绒山羊之父”［1]。

本研究建立在规模化绒山羊胚胎移植生产的基础上,研究绒山羊经过同期发情和超排处理后,进行胚胎移植操作,妊娠母羊的主要激素、细胞因子和生化物质的变化规律。一方面为羊妊娠生理学、妊娠病理学研究及阐明细胞因子对哺乳动物胚胎发育免疫调控作用机理提供理论基础;另一方面,为进一步进行绒山羊体外胚胎生产、胚胎移植产业化及相关科学研究提供重要理论依据,在生产实践中具有指导意义。

1 试验材料

1.1 试验动物本试验的试验羊均由辽宁省辽宁绒山羊原种场有限公司提供,选择体质健壮、无疾病、发情状态一致且有过分娩记录的母羊共30只,分为3组。处理组:胚胎移植妊娠母羊10只,经过同期发情处理和超数排卵处理;对照组Ⅰ:自然发情,正常配种妊娠母羊10只,发情一致,未经过药物处理;受体组Ⅱ:胚胎移植未妊娠的受体母羊10只,经同期发情处理。

1.2 主要试剂

1.2.1 测试试剂胆固醇、蛋白质、葡萄糖、钙和钾五种试剂盒和促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)、促乳素(PRL)五种放射免疫测定试剂盒均购于天津协和医药科技有限公司;白介素-1β(I L-1β)、白介素-6(I L-6)、转化生长因子-a(TG F-a)、胰岛素样生长因子-II(IG F-II)放射免疫测定试剂盒均购于中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所;表皮生长因子(E G F)放射免疫测定试剂盒购于北京原子能研究所;孕酮CID R购自新西兰。

1.2.2 超数排卵药物促卵泡素FSH(100 IU/支,宁波第二激素厂产),促卵泡素FSH(400 mg/瓶,加拿大产),孕马血清促性腺激素P M S G(1 000 IU/支,宁波市三生药业有限公司产),促黄体素LH(40 mg/瓶,加拿大产)。

2 试验方法

2.1 同期发情、超数排卵方案供体母羊放栓15 d后,开始激素超排,采取后腿内侧肌肉注射,分8针注射,前7针为加拿大FSH(40 mg),每针间隔12 h。第8针为国产的PMSG(300 IU),各超排药物需统一用稀释液溶解后,用移液器按计量分装到EPPENDOF管内,冷冻保存,避免药物因反复冻融而导致药物成份的变化。

2.2 血样的采集和处理处理组和对照组均在胚胎移植后的0、30、45、60、75、90、105、120、137 d,对20只胚胎移植受体母羊和10只自然发情、配种的妊娠母羊进行颈静脉采血,现场离心后,分离血清,分装在1.5 m L离心管中,于-20℃条件下保存。用以测定FSH、LH、PRL、P4、E2五种激素及IL-1、IL-6、EGF、IGF-II、TGF-a五种细胞因子的变化规律和血清胆固醇、蛋白质、葡萄糖、钙、钾含量。

2.3 生化物质的测定方法样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧化物酶的作用下,将还原性的4-氨基安替双林与酚偶联合成可被子分光光度计测定的醌类化合物。样本中游离胆固醇,经过系列反应产生醌亚胺,可用分光光度法在500 n m处设定其吸光度(A)值,然后推算出胆固醇的含量。

血清中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MT B)结合,生成蓝色络合物,通过比色与同样处理的钙标准进行比较而得出最后结果。

血清蛋白质的测定方法用双缩脲法。凡分子中含有两个氨基甲酰基的化合物都能与碱性酮溶液作用,形成紫色复合物,而测得。

血清中钾的测定原理为:在碱性介质中,经蛋白沉淀剂处理后的血清样本中的钾离子与N A-T P B反应产生混浊并有稳定悬浮液,混浊度与样本中钾离子浓度成正比。

以上五种物质测定的操作程序按试剂盒说明并加以修改进行测定。

2.4 激素含量的测定方法血清促卵泡素试剂盒的测定灵敏度为0.6 mIU/m L,最佳曲线方程为为4P. LOGISTIC,拟合度为0.999 8;黄体促生成素试剂盒的测定灵敏度为0.4 mIU/mL,最佳曲线方程为Y=F(LN(X)∧3)拟合度为0.999 8;血清雌二醇放免试剂盒的测定灵敏度为1.4 pg/mL,最佳曲线方程为Y=F(LN (X)∧3)拟合度为0.999 88;血清孕酮放免试剂盒的测定灵敏度为0.5 mIU/mL,最佳曲线方程为4P.LOGISTIC,拟合度为0.999 7;血清促乳素放免试剂盒的测定灵敏度为1.0 ng/mL,最佳曲线方程为Y=F(LN(X)∧3),拟合度为0.999 88。

2.5 血清细胞因子的测定方法

2.5.1 白细胞介素1 测定白细胞介素1β测定试剂盒的测定范围为0.1～24.3 ng/mL,灵敏度小于0.08 ng/mL。试验采用平衡法,标准品在使用前溶解和配制。最佳曲线方程为Y=F(LN(X)∧3),拟合度为0.999 88。

2.5.2 白细胞介素-6的测定白细胞介素-6放免试剂盒的测定范围为50～4 000 pg/mL,灵敏度小于50 pg/mL。最佳曲线方程为Y=F(LN(X)∧3),拟合度为0.999 9,采用平衡法。

2.5.3 转化生长因子 的测定转化生长因子a的测定试剂盒的测定范围为3.3～270 pg/mL,灵敏度小于5 pg/mL。最佳曲线方程为Y=F(LN(X)∧3),拟合度为0.999 99,试验采用平衡法,加样程序:向每管加入分离剂500μL,充分混匀后放室温15～20 min, 4℃条件下离心3 500 r/min,20 min。弃去上清,在自动γ计数仪上测定放免性,依据放免仪上的程序,读出有关指标及样品浓度。

2.5.4 胰岛素样生长因子 的测定胰岛素样生长因子Ⅱ的测定试剂盒的测定范围为0.1～8.1 pg/mL,灵敏度小于0.1 pg/mL。最佳曲线方程为Y=F(LN(X)∧3),拟合度为0.999 85,试验采用平衡法。

2.5.5 表皮生长因子的测定表皮生长因子放免试剂盒采用竞争性放免分析法,125I-E GF和待测样品或标准品中的E GF与有限量的E GF抗体竞争反应,加入分离剂,使复合物部分与游离抗原部分分离,弃去上清液,测沉的放射性计数,放射性强度与抗原浓度成正比。最佳曲线方程为LOGIT(Y)=A+B*(LN(X)∧3),拟合度为0.999 48。

表1 妊娠期辽宁绒山羊五种激素的变化(0～45 d)Table1 Changes o f five hormones in Liaoning cashmere goats during gestation period

3 结果与分析

3.1 妊娠期辽宁绒山羊五种激素水平的变化由表1和表2可知,胚胎移植受体母羊与非胚胎移植母羊血清中FS H在整个妊娠期间的变化趋势基本一致,但非胚胎移植妊娠母羊的FSH于妊娠期的105 d左右达到最大含量,为2.04士1.06 mIU/mL,与胚胎移植妊娠母羊的1.18士0.58 mIU/mL相比,差异显著(P＜0.05)。高峰值之后下降,于分娩前恢复到正常水平。但对照组Ⅱ(1个月以后妊娠失败的母羊)第45天时的FSH显著高于试验处理组和对照I组,并且差异显著(P＜0.05)。

胚胎移植妊娠受体与非胚胎移植受体羊的LH的变化在妊娠90 d以前的变化趋势一致,含量差异不显著(P＞0.05)。第105天,非移植妊娠受体LH显著升高,达3.04士1.24 mIU/mL,并与其各组差异显著(P＜0.05)。妊娠137 d时,非移植妊娠受体LH含量下降,移植妊娠受体LH升高,但与其他各组差异不显著(P＞0.05)。1个月左右中止妊娠组LH于30～45 d时都显著高于妊娠羊的含量,差异显著(P＜0.05)。

妊娠期母羊雌二醇血清含量的变化趋势在移植妊娠受体羊和非移植妊娠试验组基本一致,移植妊娠受体于妊娠105 d左右达高峰值,为4.57士1.47 pg/ mL,于妊娠137 d左右恢复正常水平。非移植妊娠受体羊的雌二醇在血清中的含量在整个妊娠期基本恒定。中止妊娠试验组于第45天雌二醇在血清中的含量(4.06士1.03 pg/mL)显著高于妊娠辽宁绒山羊(P＜0.05)。

母羊妊娠期不论是移植妊娠受体母羊还是非移植妊娠母羊的血清孕酮含量变化趋势一致。在妊娠的60 d左右达到一个高峰,分别为13.42士1.70 ng/mL和11.94士4.61 ng/mL,二者差异不显著(P＞0.05);于妊娠的105 d左右达第二个高峰,分别为17.31士0.99 ng/mL和18.57士0.82 ng/mL,二者差异不显著(P＞0.05),但与第一次峰值差异显著(P＜0.05)。对照组孕酮含量于妊娠的30 d开始下降,45 d时为4.53士1.09 g/mL,低于胚胎移植妊娠受体和非胚胎移植妊娠受体,且差异显著(P＜0.05)。

母羊血清中的P R L在移植妊娠受体与非移植妊娠受体在整个妊娠期的变化趋势不同,非移植妊娠母羊于妊娠105 d时P R L为最高,为5.89士2.39 ng/mL,与移植妊娠受体差异显著(P＜0.05)。中止妊娠组的P R L从妊娠30 d开始就高于成功妊娠的试验组,于45 d时达6.01士1.70 ng/mL,高于成功妊娠试验组的1.20士0.47 ng/mL和3.44士1.28 ng/mL,且差异显著(P＜0.05)。

3.2 辽宁绒山羊妊娠期主要几种细胞因子水平的变化由表3和表4可知,妊娠期白介素-1β在移植妊娠受体与非移植妊娠受体组变化规律不完全一致,妊娠前期90 d以前各组差异不显著(P＞0.05),妊娠105 d和120 d时差异显著(P＜0.05),以105 d时移植妊娠受体为最高,含量值为0.04士0.009 ng/mL,非移植妊娠受体羊为0.02士0.004 ng/mL。中止妊娠组羊的血清IL-1的含量在妊娠35至45天之间由0.03士0.02 ng/mL下降至0.017士0.009 ng/mL。但与胚胎移植妊娠受体羊和非胚胎移植妊娠母羊相比差异不显著(P＞0.05)。

表2 妊娠期辽宁绒山羊五种激素的变化(60～137 d)Table2 Changes o f five hormones in Liaoning cashmere goats during gestation period

表3 辽宁绒山羊妊娠期几种细胞因子的变化(0～45 d)Table3 Changes of several cytokines in Liaoning cashmere goats during pregnancy

表4 辽宁绒山羊妊娠期几种细胞因子的变化(60～137 d)Table4 Changes of several cytokines in Liaoning cashmere goats during pregnancy

母羊妊娠期血清中IL-6的含量在移植妊娠受体组和非移植妊娠组于妊娠105 d以前的变化趋势基本一致,移植妊娠受体羊于120 d时含量最低,为57.23士2.38 p g/mL,妊娠137 d时稍有回升,而非移植妊娠母羊高达174.7士26.49 p g/mL,至妊娠137 d时基本恒定,两试验组差异显著(P＜0.05)。中止妊娠组羊的血清IL-6含量于30～45 d与成功妊娠两组羊的变化趋势一致(30 d时为110.83士20.37 p g/ mL,45 d时为101.4士26.40 p g/mL),含量值差异不显著(P＞0.05)。

母羊妊娠期血清中TGF-a的含量在移植妊娠受体组和非移植妊娠组于妊娠120 d以前的变化趋势基本一致,30、45、60、90、105、120 d的含量值差异不显著(P＞0.05),妊娠137 d时以非移植妊娠组含量最高,为21.40 p g/mL,移植妊娠受体为11.46 p g/ mL,二者差异显著(P＜0.05)。45 d以后,未能继续妊娠组血清中TGF-a的变化与妊娠试验组的变化规律相同,含量值妊娠45 d为13.9士4.33 p g/mL,与处理组差异不显著(P＞0.05)。

母羊妊娠期,移植妊娠受体和非移植妊娠羊的血清IGF-II含量的变化趋势不完全一致,且非移植妊娠羊的的含量在整个妊娠期都高于移植妊娠受体羊,差异显著(P＜0.05)。未能继续妊娠羊于45 d时的含量值最低为0.027士0.002 ng/mL,但与移植妊娠受体羊的含量(0.033士0.016 ng/mL)相比差异不显著(P＞0.05)

表5 辽宁绒山羊妊娠期五种生化物质的变化(0～45 d)Table5 Changes o f biochemical substances in Liaoning cashmere goats during gestation period

母羊妊娠期EGF血清的含量在移植妊娠受体组和非移植妊娠母羊组的变化趋势在0～45 d期间基本一致,且各时期的含量值差异不显著(P＞0.05)。妊娠失败组在妊娠30 d时与两妊娠组值接近,妊娠45 d时,显著升高,含量值为3.38士0.62μg/L,与两妊娠组(2.083士0.099μg/L、2.15士0.67μg/L)相比差异显著(P＜0.05)。

3.3 辽宁绒山羊妊娠期几种主要生化物质的变化由表5和表6可知,辽宁绒山羊妊娠期血清胆固醇的变化:处理组和两个对照组在整个妊娠期和变化趋势基本一致,处理组羊妊娠120 d时血清胆固醇含量最高值为111.89士10.19 mg/d L,显著高于对照Ⅱ组。胚胎移植妊娠受体母羊的血清胆回醇含量显著高于非移植妊娠母羊,也高于移植妊娠失败母羊的血清胆固醇含量。

羊妊娠期血清葡萄糖的变化:胚胎移植受体母羊妊娠期血清葡萄糖的含量显著低于非胚胎移植母羊妊娠期的血清含量,但二者的变化规律基本相似,随着妊娠期的延长,血清葡萄糖含量降低,于妊娠105 d左右血清葡萄糖含量最低(分别为33.01士3.70 mmol/ L和57.61士9.93 mmol/L)、120 d左右稍有升高。移植妊娠但于45 d以后妊娠失败母羊的血清葡萄糖含量界于二者之间。

辽宁绒山羊妊娠期血清蛋白质水平变化:胚胎移植妊娠母羊与非胚胎移植母羊血清蛋白水平均于妊娠137 d左右降至最低,分别为66.68士2.42 mg/m L和 59.92士8.01 mg/m L。胚胎移植妊娠受体于45 d左右妊娠失败时,血清蛋白质水平的变化与对照组没有显著差异。

辽宁绒山羊妊娠期血清中钙的变化:胚胎移植妊娠受体母羊血清钙于妊娠前90 d基本处于恒定水平,以后随妊娠期延长而有所下降。45 d以后不能继续妊娠的胚胎移植受体母羊血清钙水平显著低于继续妊娠的母羊(1.7 mmol/L vs 2.32～2.59 mmol/L)。

羊妊娠期血清钾的变化:胚胎移植妊娠受体母羊血清钾的浓度高于非胚胎移植妊娠母羊,二者的变化趋势于妊娠75 d以前基本一致,即妊娠后,血清中钾浓度有所升高,于分娩前下降至正常水平(分别为4.64士0.64 mmol/L和2.49士1.04 mmol/L),移植妊娠于45 d左右妊娠失败组与另两组差异不显著,不具有妊娠诊断意义。

表6 辽宁绒山羊妊娠期五种生化物质的变化(60～137 d)Table6 Changes of biochem ical substances in Liaoning cashmere goats during gestation period

4 讨论

4.1 辽宁绒山羊妊娠期主要激素的变化研究表明,胚胎移植后的受体母羊怀孕前期,约有1/3的胚胎流失［2],随着妊娠期的延长,胚胎死亡现象继续发生［3]。怀孕期胚胎死亡可能是孕酮不足,因为母羊整个怀孕期都需要孕酮来维持妊娠［4]。辽宁绒山羊血浆孕酮含量于妊娠的最后7～10 d下降,分娩时极低,这主要由于胎盘的孕酮产生率低和代谢清除率增加的缘故。血浆雌激素含量在整个妊娠期都很低,而分娩前48 h急剧升高。很明显,孕酮产生率的下降和雌激素产生率的增加,两者都可能是由胎儿皮质醇的增加所引起的［5]。

Karagiannidis等［6]研究绵羊妊娠后0、4、8、12、16 d时血清雌二醇含量时指出,妊娠绵羊高于非妊娠绵羊,与本试验中妊娠后0和30 d测定结果一致。另有研究表明,怀孕120 d时,自体移植母羊雌激素的基础分泌水平为0.3士0.1 ng［7]。这与本试验的研究结果一致。至妊娠结束时达高峰,但本试验胚胎移植受体妊娠组在105 d有一个峰值,说时此时胎盘分泌雌激素能力强,到末期趋于稳定,说明妊娠结束,对黄体的溶解结束,这种雌激素峰值提前出现的现象是否与移植纯种肉羊胚胎后生长发育特别快而对母体产生效应有关,尚需进一步研究。

王应安等研究也指出,孕酮含量随怀孕时间的增长而升高,分娩前下降,与本试验结果一致,本试验研究非妊娠辽宁绒山羊组孕酮水平较低,支持A r o r等的观点,即妊娠阶段,孕酮的突然下降与胚胎死亡存在密切关系。

另外各试验组中的PRL变化规律与LH高度一致,体现二者的协同作用,进行辽宁绒山羊胚胎移植生产时,胚胎移植以后,上述相关激素从不同程度、不同角度以及从不同机理调节、维持着受体羊妊娠过程,并且可以在生产上有重要意义的时期(移植后45 d左右),通过检测它们的水平来预测胚胎发育状况或进行“45 d受体妊娠简易识别”。

4.2 辽宁绒山羊妊娠期几种主要细胞因子的变化白介素在许多方面与生殖有密切关系,直接或间接地影响着动物的生殖活动。早期研究表明,IL-1β存在于子宫内膜,着床期高表达,因此可能参与胚胎的着床过程［8]。IL-6是由许多免疫和非免疫细胞产生的多功能蛋白,循环中的IL-6水平较高,常伴随着组织的损伤和病理情况。研究指出,IL-6能够影响哺乳动物的早期胚胎发育,能引起早期流产［9]。本试验中,未能继续妊娠组IL-6水平高于妊娠组,但差异不显著,妊娠后期,胚胎移植组和非胚胎移植组间存在差异,这与IL-6的理论相符。

Kanai-Azuma等进行地各种生长因子对小鼠外胎盘锥体细胞(Ectoplacetal cone cells,EPCC)增殖、迁移、转化的影响研究,发现IGF-Ⅱ能使EPPP转化成滋养层巨细胞(trophoblastic giant cells, TGCS),表明其在胎盘形成及发育过程中起着重要的作用。另外,IGF-Ⅱ也能促进乳腺上皮细胞的增殖,刺激乳腺上皮组织DNA的合成和乳汁生成,促进乳腺的发育成熟。试验中未能继续妊娠的辽宁绒山羊血清IGF-Ⅱ水平于45 d时低于妊娠辽宁绒山羊,可能与它在胎盘形成及发育方面的功能有关。

大量的研究证实,在不同的哺乳动物中TGF-a在胎儿发育的不同方面起作用［10]。母羊怀孕55 d以前,如果切除卵巢会导致流产,因为缺少C L,而胎盘分泌的孕酮又不足以维持妊娠。母羊怀孕90 d时,血循环中有一半的孕酮来源于C L,另一半来源于胎盘［11]。但胚胎又不能通过子宫分泌的TGF-a来维持C L分泌孕酮,而是通过胚胎与子宫内膜的相互作用破坏TGF-a的抵抗能力和抑制黄体溶解［12],本试验中,母羊妊娠137 d时非移植妊娠组含显著高于妊娠组,与此理论相吻合。

表皮生长因子(Epidermal Growth Factor, EGF)在动物体内具有广泛的生物学效应,参与多种生理、病理过程。魏志新等［13]在人上研究表明,EGF浓度的变化可以直接反映胎儿的生长发育状态。因此在妊娠过程中尤其是妊娠晚期检测母血和羊水中的EGF的浓度,可作为胎儿宫内发育情况的指标之一。本试验的45 d以后不能继续妊娠的对照组羊血清中EGF的含量值显著高于妊娠羊,这可能是与EGF水平过高而导致母羊不能继续妊娠的原因。王少为等在人上研究则表明,EGF在血清中低至一定水平也难以维持妊娠,而致流产,虽然存在时间和个体的差异,但说明,EGF水平的变化与妊娠关系密切。

4.3 妊娠受体生化物质含量的变化血液中胆固醇、蛋白质等物质在动物的繁殖生理中发挥重要作用,N a t h等(2004)研究过阿斯萨母山羊妊娠的90、120、140 d和分娩时、分娩后15 d时血液胆固醇和蛋白质含量,指出妊娠山羊妊娠90 d时,胆固醇含量达到高峰,随妊娠期延长逐渐下降,分娩时降到最低值,与本研究结果不完全一致,可能是品种不同所致。蛋白质含量从妊娠90 d后有所升高,于分娩时降到较低值,与本研究部分结果基本一致［14]。辽宁绒山羊妊娠期伴随着一系列的生理生化的变化。妊娠期胎儿由于生长发育的需要,大量吸收母体的钙,孕妇在孕期的血容量增加,血钙浓度相对降低,再由于肾小球滤过率的增加而使尿钙排泄增高,另外孕期雌激素的升高又在一定程度上抑制了母体对骨钙的重吸收,因此孕妇体内处于低钙状态［15]。本试验辽宁绒山羊妊娠期血清总钙水平低于正常非妊娠期测定的水平,与报道的一致。两妊娠组在不同采样时间血钙差异不显著,均在妊娠后期下降,但非妊娠组发现,在移植后45 d血钙含量却显著下降,这可能与母体当时的生理状态有关［16]。另外,胚胎移植妊娠受体和非胚胎移植妊娠受体血液中蛋白、胆固醇及钾等的含量在相同的妊娠时间处于不同的水平,说明胚胎移植入受体后影响其机体的代谢状态,但代谢状态的改变对所移植的胚胎的进一步发育不一定有显著影响,在这方面的研究未见相同报道。

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Study on the regulation of reproductive ewes receptor of embryo transfer Liaoning cashmere goats

Zhang Xiaoying1,Guo Dan1,Wang Xiqing2
(1.Animal Husbandry Institute of Liaoning Province,Liaoning Liaoyang 111000; 2.Livestock Technology Promotion Center,Liaoning Fengcheng 118100)

There are thirty ewes as the test sample to study on the reproductive endocrinology regular pattern of after embryo transfer,handling the same period after estrus and pregnancy ewes superovulation treatment,not ewes and reproductive endocrine regulation of the law of nature estrus pregnant ewes pregnancy.Determination of serum follicle stimulating hormone(FSH),luteinizing hormone(LH),progesterone(P4),estradiol(E2)and prolactin(PRL)5 Dynamic Change hormone by radioimmunoassay,and serum biochemical markers and interleukin-1β(IL-1β),interleukin-6 (IL-6),transforming growth factor-a(TGF-a),insulin-like growth factor-II(IGF-II),epidermal growth factor(EGF),etc.variation five cell factor and serum cholesterol,glucose,total protein,calcium,potassium and the like.The results showed:serum FSH,LH,E2,P4,PRL,cytokine EGF and serum cholesterol,serum calcium receptor material difference in the content of failure present in the receptor pregnancy and early pregnancy,as forecast after the embryo transplant recipients after sheep after two estrus pregnancy can continue to provide important reference information.

Liaoning Cashmere goats;Embryo transfer ewes receptor;Reproductive Endocrinology

S827.3

B

1672-9692(2016)10-0007-09

2016-08-15

张晓鹰(1970-),男,高级畜牧师,主要从事绒山羊饲养管理等工作。

辽宁省自然科学基金项目(2014020179);辽宁省科技攻关项目(2015202004);辽宁省农业领域青年科技创新人才培养计划项目(2014036)。