北京市北苑地区女性HPV感染现状及基因型分布研究

张立娟，武佳蕾，孙树荣

（航空总医院检验科，北京 100012）

北京市北苑地区女性HPV感染现状及基因型分布研究

张立娟，武佳蕾，孙树荣

（航空总医院检验科，北京 100012）

目的 调查我院辖区范围内即北京市北苑地区成年女性人乳头状瘤病毒（HPV）感染现状及亚型分布情况。方法采用核酸分子快速导流杂交基因芯片分型技术对本院辖区范围内（北苑地区）来我院妇科门诊就诊的14582例女性患者采集宫颈脱落细胞标本进行HPV及 21种亚型检测。结果 ①HPV感染阳性检出2419例，感染阳性率 16.59%（2419／14582），在HPV感染阳性人群中，以单一高危型HPV感染为主，单一感染HPV阳性 1951例，占HPV阳性感染人群80.65%（1951／2419）；多重感染以二重感染为主，多重感染HPV阳性468例，二重感染 HPV阳性 361例，占 HPV阳性感染人群14.92%（361／2419），以高危型感染以为主。②各HPV基因亚型检出总和为 3035项 次，高危型HPV感染占91.73%（2784／3035），排在前五位由高到低依次是 HPV16（17.36%，527／3035）、HPV52（11.89%，361／3035）、HPV58（11.80%，358／3035）、HPV53（8.27%，251／3035）、CP8304（7.05%，214／3035），以HPV16型 为主；低危型HPV感染占8.27%（251／3035），由高到低依次是HPV11（3.95%，120／3035）、HPV6（3.57%，108／3035）、HPV44（0.43%，13／3035）、HPV42（0.16%，5／3035）、HPV43（0.16%，5／3035），以HPV11为主。③按年龄段划分，≤20岁年龄组阳性率最高，阳性率31.30%（36／115）；其次是≥61岁年龄组，阳性率21.05%（64／304）。结论 本院辖区范围内（北苑地区）成年女性HPV感染阳性率16.59%（2419／14582），以单一高危型HPV感染为主，高危型 HPV16、HPV52、HPV58、HPV53、CP8304是本院辖区范围内成年女性HPV感染的主要亚型。

人乳头状瘤病毒（HPV）； 感染； 基因型

材料与方法

1 研究对象

选取2013年8月至 2014年8月间我院辖区范围内（北京市北苑地区）到我院妇科门诊就诊的女性患者14582例，年龄分布范围18～82岁，取宫颈脱落上皮细胞检测21种HPV基因型。

2 标本采集

采用窥阴器或阴道扩张器充分暴露子宫颈，将宫颈刷置于宫颈口，顺时针旋转宫颈刷 4～5圈，取出后沿刷柄折痕处折断刷头，将刷头放入洗脱管中，贴上标识，放入2～8℃冰箱内待测。

3 试剂与仪器

人乳头状瘤病毒（HPV）分型检测试剂盒（PCR＋膜杂交法）及细胞裂解液（分离法）由潮州凯普生物化学有限公司提供，仪器使用医用核酸分子快速杂交仪。

4 方法

采用基因扩增技术及导流杂交原理，通过反向点杂交检测扩增产物与包被有型特异性探针膜杂交结果，采用碱性磷酸酶系统定性检测，从而对 21种HPV基因型（6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68和 CP8304）进行分型检测。

5 统计学方法

数据采用SPSS 20.0软件进行统计分析，采用卡方检验，检验水准α＝0.05。

人乳头状瘤病毒（HPV）是一种能引起人类皮肤黏膜病变的双链DNA病毒，流行病学与基础研究已经证明，HPV是引起宫颈癌及其癌前病变的主要因素［1-2］，在宫颈癌患者中HPV DNA的检出率为99.7%［3-4］。而且，HPV感染具有较强的地域性［5］，不同国家和地区HPV感染率及亚型分布具有较大的差异。因此，了解本辖区内女性HPV感染现状及亚型分布特征，对HPV感染分子流行病学的调查研究具有重要意义，为有效防治子宫颈癌提供科学依据。

结 果

1 HPV感染率及基因亚型检测结果

在14582例患者中共检出HPV阳性2419例，感染阳性率为16.59%（2419／14582）；各亚型检出总和为3035项次，其中高危亚型共检出 2784项次，占91.73%（2784／3035），以HPV16、52、58、53及CP8304为主；低危亚型共检出251项次，占8.27%（251／3035），以HPV11、6为主。各亚型分布情况见表1。

表1 2419例HPV（＋）各亚型感染的分布情况（总项次3035）

2 不同年龄段HPV感染分布情况及构成比

2419 例HPV感染者年龄分布见表2。以10岁为一组进行统计，≤20岁年龄组HPV感染阳性率最高，阳性率为31.30%（36／115），其次是≥61年龄组，阳性率为21.05%（64／304）。各年龄组均以单一高危型HPV亚型感染为主。HPV阳性感染者在感染人群中分布，以21～30岁年龄组为主，其次是31～40岁年龄组。

表2 不同年龄段HPV感染分布情况及构成比

3 HPV基因型多重感染情况

HPV各亚型多重感染分布情况见表3。在2419例HPV感染者中以高危型单一感染为主，在多重感染者中，以高危型二重感染为主。

表3 HPV基因型多重感染情况（n＝2419例）

讨 论

子宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，其病死率位居全球第二位，其发病率仅次于乳腺癌，高危型人乳头状瘤病毒（HPV）持续感染是宫颈癌及癌前病变发生发展的必要条件。目前，可检测的人乳头状瘤病毒（HPV）基因型有100多种，HPV感染基因型和宫颈病变的级别存在一定的关系，根据病毒的致癌性的大小可分为两大类：①低危型HPV，包括HPV6、11、42、43、44等，常引起生殖器湿疣，及低度宫颈鳞状上皮内瘤变（LSL）等良性病变；高危型HPV，包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、 56、58、59、66、68及CP8304等，与宫颈癌及高度宫颈鳞状上皮内瘤变（HSL）的发生有关［6］。由于不同国家和地区HPV感染率及亚型分布具有较大的差异，HPV感染具有较强的地域性［5］，因此，了解本地区HPV流行的主要亚型，有效监测HPV感染的现状及基因型的分布情况，可有针对性地对本地区HPV流行的主要亚型进行预防接种，同时对高发人群给与积极有效的监测与干预，可大大减少本地区成年女性患子宫颈癌的风险，这种有针对性的监测和预防成为有效预防宫颈癌发生发展的有效手段。

本研究采用核酸分子快速导流杂交基因芯片分型技术对我院妇科门诊14582例患者进行HPV基因亚型检测，HPV感染2419例，总阳性率16.59%，这与何桂荣［7］等报道深圳地区的阳性率 17.5%接近，即使同在北京地区，由于我院所处的地理位置以外来流动人口为主，而且所筛选的人群是普通门诊患者，HPV感染阳性率与杨英捷［8］等报道高危人群的57.1%也有较大差别，这也充分体现了HPV感染对宫颈病变的高致病性。本研究结果显示，在HPV感染阳性人群中，高危型HPV感染排在前5位的依次是HPV16（17.36%，527／3035）、HPV52（11.89%，361／3035）、HPV58（11.80%，358／3035）、HPV53（8.27%，251／3035）、CP8304（7.05%，214／3035），以HPV16型为主，HPV16在总体及各年龄组均占首位，这与世界范围的研究结果一致［9］，HPV52、58仅次于HPV16，符合亚洲人群研究结果［10-12］；低危型HPV感染占 8.27%（251／3035），由高到低依次是HPV11（3.95%，120／3035）、HPV6（3.56%，108／3035）、HPV44（0.43%，13／3035）、HPV42（0.16%，5／3035）、HPV43（0.16%，5／3035），以HPV11为主。在所检出的HPV各亚型阳性总体项次中，高危型HPV共检出 2784项次，占总体亚型阳性项次的91.73%（2784／3035），这表明高危型HPV是本地区人乳头状瘤病毒感染的主要亚型，在治疗中应给与足够的重视。由于HPV感染亚型分布具有较强的地域性，本研究中HPV亚型与其他地区报道的亚型不尽相同，Chan［13］等报道香港地区高危型HPV居前五位的是：HPV16、58、CP8304、33、18；靳琼［14］等报道西藏地区HPV感染前五位的是HPV16、33、58、52、31；研究结果表明，尽管HPV16亚型在各个地区占主要地位，但其他亚型存在明显的地域性，因此，明确一个地区HPV流行的主要亚型，对本地区宫颈癌及其他HPV相关性女性生殖道疾病的预防和治疗具有重要意义。

单一高危型HPV感染是本地区成年女性患者HPV感染的主要类型，本研究中，单一亚型HPV感染1951例，HPV感染阳性率 13.38% （1951／14582），在HPV阳性感染人群中占80.65%（1951／2419），其中单一高危型感染 1840例，在感染人群中占76.06%（1840／2419）；多重感染468例，感染阳性率3.21%（468／14582），在HPV感染人群中占19.35%（468／2419），二重感染HPV阳性 361例，占HPV阳性感染人群14.92%（361／2419）；多重感染中以高危型二重感染为主。因此，在本地区HPV感染中应加强单一高危亚型的治疗、随访，而多重感染则以二重感染的监控为主。

年龄是HPV感染和宫颈癌发生的相关因素，在本研究中，≤20岁年龄组 HPV感染阳性率最高，阳性率31.30%（36／115），与其他年龄组相比有显著差异（P＜0.05），而其他年龄组间 HPV感染阳性率无统计学差异；在HPV阳性感染人群分布中，21～30岁年龄组HPV检出率最高，占感染人群的39.85%（964／2419），其次是31-40岁年龄组，占感染人群的31.29%（757／2419），这与21～40岁人群的生理特性相关。虽然 30岁以前HPV感染多为一过性，一般在8-10个月清除，但随着年龄的增长子宫颈癌的发病率明显上升［15-16］，因此应高度重视21～40岁人群中HPV感染者的处理，给与积极的干预，减少这部分人群发展为子宫颈癌的几率。

随着HPV基因分型检测技术的普及，HPV作为一种常规筛查项目可以提高本地区高危型HPV感染的检出率，通过我院妇科门诊患者HPV感染分型及分布的研究，我院辖区范围内成年女性HPV感染以单一高危型为主，高危型 HPV在感染人群中排在前5位的依次是HPV16（17.36%）、HPV52（11.89%）、HPV58（11.80%）、HPV53（8.27%）、CP8304（7.05%），人群分布以 21～40岁人群为主，因此有针对性地对本地区HPV流行的主要亚型进行预防接种，同时对21～40岁高发人群给与积极有效的监测与干预，可大大减少本地区成年女性患子宫颈癌的风险。

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（李 凌编辑）

The Prevalence and Genotype Distribution of Human Papillomavirus Infection in Women in Beiyuan Area of Beijing

ZHANG Li-juan，WU Jia-lei，SUN Shu-rong
（Department of Clinical Laboratory，Aviation General Hospital，Beijing 100012，China）

Objective To survey the prevalence and genotype distribution of human papillomavirus HPV）infection in the women of Beijing Beiyuan area.Methods A total of 14582 outpatient women who accepted cervical cancer screening were selected and carried out 21 genotypes HPV detection by DNA flow-through hybridization genotyping technique.Results For 14582 cases of cervical cell specimens，the number of HPV positive specimens was 2419，and the total HPV infection rate was 16.59%.Among the HPV positive women，the most common type of HPV infection was single type and high-risk HPV.The number of single type HPV infection was 1951，with the infection rate 80.65%.The total multiple HPV infection was 468 and double type infection was the most common infection with the infection rate of 14.92%（361／2419）.In the genotypes detected by 3035，the high-risk genotype HPV was the most common infection with the infection rate of 91.73%（2784／3035），of which HPV16（17.36）was the most common type，followed by HPV52（11.89%），HPV58（11.80%），HPV53（8.27%），CP8304（7.05%）.The low-risk HPV infection rate was 8.27%（251／3035），of which HPV11（3.95%）was the most common type，followed by HPV6（3.57%），HPV44（0.43%），HPV42（0.16%）and HPV43（0.16%）.The objects were divided into six groups according to age，a peak of HPVprevalence detected among the women was less than 20 years.In this group，the infection rate was 31.30%（36／115 and was significantly higher than that in the other age groups.The second peak was in the older females aged more than 60 years，with the infection rate 21.05%（64／304）.The HPV infection rate of females in Beijing Beiyuan area was 16.59%.Conclusion The most common types of HPV infection in Beijing Beiyuan area were high-risk and single type HPV infection，and the leading high-risk HPV genotypes were HPV16，HPV52，HPV58，HPV53 and CP8304.

Human papillomavirus； Infection； Genotype

10.11748／bjmy.issn.1006－1703.2016.01.005

2015-09-25；

2015-10-14

张立娟，女，硕士研究生，副主任检验师，从事免疫学检验工作近20年。Tel：13521838358；E-mail：immunitylab361＠163.com

孙树荣。E-mail：immunitylab361＠163.com