新疆塔城地区羊棘球蚴病个体流行率测量
2016-11-24睿闫昊张继红
张 睿闫 昊张继红*
(1.新疆农业大学，新疆乌鲁木齐 830001；2.新疆维吾尔自治区动物卫生监督所，新疆乌鲁木齐 830011)
新疆塔城地区羊棘球蚴病个体流行率测量
张 睿1闫 昊2张继红2*
(1.新疆农业大学，新疆乌鲁木齐 830001；2.新疆维吾尔自治区动物卫生监督所，新疆乌鲁木齐 830011)
目的：为了了解新疆塔城地区羊棘球蚴病真实流行率。方法：采用横断面研究，采样分为两阶段抽样策略，第一阶段为县(市)抽样采用随机抽样策略，预定流行率=85%、CI=90%、可接受误差=15%；第二阶段为个体抽样采用按养殖大小成比例抽样(PPS)策略，预期流行率=30%，CI=90%，可接受误差=5%，采集血清1839份，血清样品进行ELISA抗体检测，根据检测结果、敏感性和特异性计算真实流行率。结果：塔城地区羊棘球蚴病个体表观流行率(AP)为52.7%，统计分析得出个体真实流行率(TP)为55.2%，95%置信区间为52.9～57.4%。结论：1.本次研究首次通过两阶段抽样策略对羊棘球蚴病在个体流行率进行了测量，从方法上相对以往的监测方法更加科学，包括不同年龄、性别的羊只，更接近研究时段内该地区的真实情况。2.相比之下，血清学检测简便、快速、检测通量大，我地区可在今后的羊棘球蚴病流行病学调查、监测和检测工作逐步推广ELISA诊断方法，进而更客观、更准确地掌握棘球蚴病流行情况，做好防控工作。
新疆；羊棘球蚴病；真实流行率；酶联免疫吸附试验1 背景
1 前言
棘球蚴病（Echinococcosis），又称为包虫病（Hydatid disease，Hd），是由细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus，Eg）的中绦期——棘球蚴（Echinococcus）寄生在哺乳动物脏器内形成机械性压迫，造成不同程度的组织损伤和功能障碍，同时可引起过敏反应，甚至突然死亡，是一种严重的人畜共患寄生虫病[1]。绵羊是最主要的中间宿主，犬是终末宿主。据兽医部门流行病调查数据推算，每年患病家畜在5 000万头以上，因家畜死亡和脏器废弃造成的直接经济损失逾30亿元[2]。
羊棘球蚴病感染调查可以直接反映当地棘球蚴病流行程度，同时是执行预防措施和评价控制效果的重要指标。目前羊棘球蚴病感染调查仍以OIE推荐的屠宰场现场检查为主，家畜屠宰后对肝脏、肺脏进行棘球蚴病包囊检查，该方法存在问题有：内脏棘球蚴包囊检查只能在家畜屠宰时进行，存在很大局限性，同时家畜年龄大多年龄偏大，部分家畜可能是感染其它动物疫病的病畜，增加了流行病学调查的偏差。棘球蚴病感染初期或家畜年龄较小感染时，可能棘球蚴幼虫在内脏表面未能形成包囊或包囊不明显，导致检查出现假阴性。检查人员可能将棘球蚴包囊与其它寄生虫病或传染病形成的结节状病变混淆，导致检查出现假阳性。
近年来，多种新的免疫学方法应用于羊棘球蚴病检测，其原理是利用抗原、抗体特异性结合的原理制备特异性抗原检测血清中的抗体。血清抗体检测方法的应用，其检测敏感性、特异性、实用性要优于传统的检测方法，为了解羊感染棘球蚴病真实感染情况提供了检测与监测手段，为流行病学调查与疫情监测、疾病诊断提供了新的技术手段和途径。
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 样品
采自塔城地区5个县（市）的羊血清1839份。
2.1.2 主要试剂盒
绵羊棘球蚴病（包虫病）ELISA检测试剂，兰州兽医研究所产品，检测方法的敏感性和特异性分别为91.8%、95.4%。
2.2 方法
2.2.1 检测方法
绵羊棘球蚴病（包虫病）ELISA检测试剂，参照《NY/T 1466-2007动物棘球蚴病诊断技术》进行操作。
2.2.2 抽样策略
为了测量羊棘球蚴病的真实流行率，本研究选择采用横断面研究。塔城地区辖区内所有羊只为此次调查的总体样本，采样分为两阶段抽样策略[3]。
第一阶段县（市）选取采用随机抽样策略。辖区内5县2市编号后作为抽样框，根据专家意见，县市预定流行率=85%（县市估计流行率基于个体流行率＞20%，即确定为流行县市），置信水平=90%，可接受绝对误差=15%，采用WinEpi软件按照估计流行率抽样方法计算抽取县（市）数，用EXCEL软件的随机数发生器抽取县（市）。
第二阶段个体抽样策略采用按养殖大小成比例抽样（PPS）策略。根据专家意见以及当地历年监测数据，个体预期流行率设定为30%，置信水平=90%，可接受误差=5%，采用WinEpi软件按照估计流行率抽样方法计算每个县个体样本数，将每个县（市）2015年秋季重大动物疫病免疫档案信息整理编号后作为抽样框，用EXCEL软件的随机数发生器抽取个体。
2.2.3 数据分析
羊棘球蚴病个体表观流行率（AP）即检测的血清学阳性数占所有检测数的比值。个体真实流行率（TP）根据公式TP=（AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）计算得到，真实流行病的95%置信区间根据公式CI=P±Z×[p×（1-p）/n]-1，其中，P是真实流行率，Z为标准正态分布概率p=0.05所对应的值，n为抽样数量。
3 结果
3.1 抽样结果
第一阶段随机选取出5个县（市），其中3个县（市）以牧区畜牧业为主，2个县（市）以半农半牧区畜牧业为主。第二阶段计算每个县（市）需要抽取226份样品，具体样品来源见表1。
表1 样品来源
3.2 各县（市）真实流行率的描述性统计
根据上表2中列出的结果，对各县（市）羊棘球蚴病的真实流行率进行描述性统计分析，详见表3。
表3 各县（市）真实流行率的描述性统计
3.3 个体流行率
总共对1839份血清进行检测，抗体阳性969份，根据个体流行率计算公式可得到塔城地区羊棘球蚴病个体表观流行率（AP）为52.7%，根据2.1.2中该检测方法敏感性Se=91.8%、特异性Sp=95.4%，计算所得个体真实流行率（TP）为55.2%，95%置信区间为52.9～57.4%。
4 讨论
4.1 抽样策略
在第二阶段抽样过程中，将每个县（市）镇2015年秋季重大动物疫病免疫档案进行整理，将养殖户、饲养量信息录入成采样框，采用按养殖大小成比例抽样，使得辖区内的羊被抽中的概率是一致的，由于当地饲养模式、饲养情况特殊，每户养殖量在300-1200之间，当养殖户与采样量确定后，进入养殖户采样时，随机抽取相应数量，相对于将该县（市）全部羊编号后简单随机抽样而言，该方法具有较好的可操作性和实用性，可在今后大范围监测抽样时逐步推广，可减少因便利采样带来的误差。
4.2 流行率测量
该地区历年监测数据来源屠宰场现场检查，数量为每年200羊，监测结果显示该地区羊棘球蚴病流行率为42.39%，本次研究通过两阶段抽样策略对羊棘球蚴病在个体流行率进行了测量，从方法上相对以往的监测方法更加科学，样本量1839份，包括不同年龄、性别的羊只，试验结果显示该地区羊棘球蚴病个体真实流行率为55.2%，95%置信区间为52.9～57.4%，更接近研究时段内该地区的真实情况。
由于寄生虫病相对于家畜病毒病、细菌病而言，有其独特的生活史、发育史，具有单向性、循环性的特性，致使羊棘球蚴病主要传染源为感染棘球蚴病的犬科动物的排泄物以及所污染的其它物质。在牧区，养殖户公用同一片草场，所有羊只在同一片草场活动、采食，转场时，经过同一条牧道，所以本文认为，在牧区羊棘球蚴病感染情况同质化水平很高，具体情况有待进一步研究。
4.3 建议
在本次研究调查中发现，该地区整体羊只调运情况为调出量远远大于调入量，羊只饲养模式属于牧区自繁自养、传统游牧。在牧区，牧羊犬随羊只活动，而半农半牧区的犬只以拴养为主，从犬与羊只接触频次来说，牧区要远远大于半农半牧区。根据此次研究数据和棘球蚴病特性，建议如下：
（1）加快建立家/牧犬的登记管理制度，并集中收容、处理流浪犬只。
（2）加大以“犬犬投药、月月驱虫”为中心的预防控制措施的实施力度，尤其是加大牧区牧羊犬的驱虫力度。
（3）对辖区内新生羔羊实施羊棘球蚴病疫苗免疫，尤其是牧区新生羔羊，提高对棘球蚴病的抵抗力。
（4）加强屠宰检疫管理，杜绝“私屠乱宰”行为，严禁将感染有包囊的家畜脏器乱弃或投喂犬只。
（5）加大棘球蚴病科普知识的宣传力度，翻译为多语言使农牧民了解棘球蚴病的危害及防控知识。
4.4 局限性
本次研究中，由于经费、人员以及实际情况的局限，所以在第二阶段一个县的个体抽样数未达到计划采样数，这可能造成该县结果精确度下降。但其他县（市）实际获得样品量均大于计划采样数，提高了结果精度。
5 结论
屠宰场现场对家畜内脏进行棘球蚴病包囊检查简单易行、成本低廉，一直被用于羊棘球蚴病检疫、监测及流行病学调查，但是由于该方法的敏感性、特异性依赖于检查者的专业技能、羊感染时间的长短、棘球蚴发育情况等因素的限制，而出现假阳性和假阴性，增加了流行病学调查的偏差。相比之下，血清抗体检测方法的应用，其检测敏感性、特异性、实用性要优于传统的检测方法，可为流行病学调查与疫情监测、疾病诊断提供了新的技术手段和途径。
本次研究首次利用兽医流行病学相关原理对羊棘球蚴病个体流行率进行测量，相对以往宰后检查的监测方法，通过两阶段抽样策略对个体进行抽样，降低了便利采样对结果的影响，从方法上相对以往的监测方法更加科学，同时，监测对象包括不同年龄、性别的羊只，研究结果更接近研究时段内该地区的真实情况。
[1] 李炳军.包虫病流行病学调查现状[J].医学综述，2009，15（8）：1195-1198.
[2] 张壮志，张文宝.我国包虫病防控及其面临的困难[J].兽医导刊，2011，06：27-29.
[3] 黄保续.兽医流行病学[M].北京：中国农业出版社，2011：189.
张睿（1986—），女，新疆乌鲁木齐市人，大学学历，助理兽医师，从事动物疫病综合防控工作。
