3675份痰标本中病原菌的分布及药敏结果分析

2016-11-15周秀萍杨长顺

实验与检验医学 2016年5期

关键词：金黄色葡萄球菌耐药性

周秀萍，杨长顺

（湖南医药学院，湖南怀化418000）

3675份痰标本中病原菌的分布及药敏结果分析

周秀萍1，杨长顺2

（湖南医药学院，湖南怀化418000）

目的分析痰标本中病原菌的分布及其药敏结果，为临床合理抗菌治疗提供科学依据。方法按照《全国临床检验操作规程》进行病原菌分离培养，采用珠海迪尔全自动细菌鉴定系统进行菌株的鉴定及药物敏感实验。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测采用头孢西丁纸片法。结果3675份痰标本中共检出1397株常见病原菌，检出率为38.0%。革兰阴性杆菌检出率为63.1%，其中肺炎克雷伯菌20.4%、鲍曼不动杆菌18.2%，大肠埃希菌14.3%，铜绿假单胞菌10.2%。革兰阳性球菌检出率为28.8%，其中肺炎链球菌检出率为18.8%，金黄色葡萄球菌检出率为10.0%。真菌检出率为8.2%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为33.1%，产超广谱β－内酰胺酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的检出率分别为57.5%和33.3%，检出细菌大多具有高耐药及多重耐药性。结论下呼吸道感染病原菌中革兰阴性杆菌感染率较高，分离细菌大多具有高耐药性和多重耐药性。

痰标本；病原菌；分布；耐药性

呼吸道感染为临床最常见的感染性疾病之一，可由细菌、病毒、真菌、支原体等多种病原体引起，据统计在发达国家以病毒感染为主，而在发展中国家则以细菌感染为主［1］。痰标本的细菌学检查对于呼吸道疾病的诊断及治疗具有重要指导意义。近年来由于抗菌药物的大量使用，使得临床痰标本检出菌谱发生改变，检出菌耐药率不断增加，有些菌株表现为多重耐药，这已成为临床抗感染治疗最关注的问题。为指导临床合理用药，笔者对怀化市第一人民医院2015年1月－2015年12月送检3675份痰标本中分离的1397株主要病原菌及其药敏结果进行统计分析，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源及采集方法所有痰标本均来自我院2015年1月-2015年12月的住院和门诊患者。标本采集方法：患者清晨清水漱口三次后用力咳痰或用吸痰管吸痰至无菌痰盒内，及时送检。微生物室用胰酶对痰标本进行消化并进行细胞学检查，：白细胞数＞25/HP，鳞状上皮细胞数＜10/LP为合格标本。

1.2 仪器及试剂血琼脂平板、中国兰平板及含万古霉素的巧克力平板来自广州迪景生物有限公司，细菌鉴定及药敏系统来自珠海迪尔生物有限公司，头孢西丁纸片购于英国Oxoid公司。

1.3 质控菌株大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC25923购自中国菌种保存中心。

1.4 方法细菌培养：按《全国临床检验操作规程》［2］进行标本分离培养。送检合格的痰标本分别接种于血琼脂平板、中国兰平板及含万古霉素的巧克力平板。细菌鉴定：挑选可疑菌落进行革兰染色，氧化酶和触酶等实验对分离细菌进行初步鉴定，然后选择相应的鉴定和药敏卡进行菌种的鉴定及药物敏感试验。按照CLSI［3］提供的ESBLs表型筛选及确认方法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测采用头孢西丁纸片法。同一病人连续送检，如检出同一株细菌，按一株计。

2 结果

2.1 分离常见病原菌构成比3675份痰标本中共分离出常见病原菌1397株，分离率达38.0%。见表1。

表1 痰标本分离常见病原菌的构成比

2.2 大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌耐药率见表2。

2.3 鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌耐药率见表3。

2.4 肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌耐药率见表4。金黄色葡萄球菌经头孢西丁纸片法确定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为33.1%（46/139）。

3 讨论

本院送检痰标本中检出的病原菌以革兰阴性杆菌为主，检出率高达63.1%，其中肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌，大肠埃希菌及铜绿假单胞菌为4种最主要的革兰阴性检出菌，与以往的报道基本一致［4-6］。分离到的革兰阴性杆菌大多都具有高耐药性和多重耐药性，大肠埃希菌产ESBLs率为57.5%，肺炎克雷伯菌产ESBLs率33.3%，低于有关报道［7］，由于ESBLs能破坏β-内酰胺酶抗菌药物，可明显降低头孢菌素的活性，导致产ESBLs菌株对青霉素类、第一代头孢、第二代头孢、第三代头孢菌素和氨曲南均耐药。表2结果显示大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨苄西林、复方新诺明、头孢呋辛、头孢曲酸和头孢唑啉的耐药率均超过50%。本结果显示亚胺培南和美洛培南的抗菌活性好，耐药率非常低。阿米卡星和派拉西林/他唑巴坦对本院分离的这两种细菌也具有较好的抗菌活性。表3结果显示鲍曼不动杆菌呈现多重耐药趋势，仅表现出对多粘菌素和复方新诺明有较好的敏感性，对其他抗菌药物均显示高耐药性。铜绿假单胞菌对常见抗菌药物敏感性较好，尚未出现对多种抗生素耐药的趋势。

表2 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药率（%）

表3 鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌耐药率（%）

表4 肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌耐药率（%）

检出的革兰阳性球菌以肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌为主。表4结果显示98.5%肺炎链球菌都耐青霉素G，但对利福平和左氧氟沙星敏感性较好，尚未发现耐利奈唑胺及万古霉素的菌株。金黄色葡萄球菌对利福平和氯霉素敏感性较好，尚未发现耐利奈唑胺和万古霉素的菌株。经头孢西丁纸片法确定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率为33.1%，万古霉素对MRSA有较好的抗菌活性，但国外已报道检出耐万古霉素的金黄色葡萄球菌，故临床科室应引起重视。

由于各地用药习惯的不同，细菌在不同抗菌药物选择性压力下生存状况不一致，从而导致引起呼吸道感染的病原菌存在明显的地区差异［8-10］，并在不断变化。由于临床上不规范及不合理的滥用抗菌药物，造成细菌的耐药现象越来越严重，多重耐药菌株不断增加，给临床治疗带来了极大的困难。因此需要对本地区呼吸道感染的病原学进行监测，了解本地区病原菌分布及耐药情况，为临床医生合理选用抗菌药物，减少细菌耐药性提供科学依据。

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R446.5，Q939.92

1674-1129（2016）05-0623-03