珠母贝稚贝温度适应性初步研究

周银环，黄海立

（广东海洋大学水产学院，广东 湛江 524088）

珠母贝稚贝温度适应性初步研究

周银环，黄海立

（广东海洋大学水产学院，广东 湛江 524088）

在室内条件下，以珠母贝（Pinctada margaritifera）稚贝作为实验对象，设置10、12、14、16、18、20、23、26、29、31、33、35、37℃组和常温组（27.3～30.6℃，CK），研究珠母贝稚贝温度适应性。结果表明：10、12及37℃条件下，珠母贝稚贝存活12d、15d及48h；稚贝适宜存活温度为15.3～33.4℃，最适宜存活温度为23～31℃，低温和高温敏感起始点分别为26和31℃；稚贝适宜生长温度为17.8～33.1℃，最适生长温度为29～3 1℃；温度对稚贝水层分布和生理产生影响，35℃时稚贝在水面以上的分布显著高于其他组，10～14及35～37℃组稚贝活动、摄食能力差，16～33℃稚贝运动、摄食能力好。

珠母贝稚贝；温度；存活；生长；水层分布；生理

珠母贝（Pinctada margaritifera）俗称黑蝶贝，主要分布于南太平洋和印度洋海区，我国南海亦有分布［1］，是目前唯一能批量生产海水黑珍珠的贝类。目前，对珠母贝的研究主要有种苗培育［2-8］、稚成贝养殖和育珠技术等［9-14］。我国珠母贝全人工养殖及育珠已取得成功，但未能形成产业，主要原因是稚贝养殖成活率低，难以获取批量成贝进行植核育珠，因此，提高稚贝养殖成活率是促进我国海水黑珍珠养殖产业化的核心问题。养殖海区、方式、水层和光度等因素直接影响稚贝养殖成活率［7，10-11］，温度也是影响贝类生长和存活的关键环境因子之一，但稚贝对温度的适应性研究尚未见有报道。本实验进行珠母贝稚贝温度适应性的研究，以期为珠母贝养殖提供理论依据。

1　材料与方法

1.1材料

珠母贝稚贝取自雷州市海威水产养殖有限公司珍珠贝良种场，在实验室暂养5 d以适应实验环境。挑选活力好、贝壳完整、大小均匀个体作实验稚贝，稚贝壳长为（2.87±0.54）mm，壳高为（2.44±0.46）mm 。

实验海水取自广东海洋大学东海岛海洋生物研究基地，为砂滤水，盐度为25。

饵料取自广东海洋大学水产学院微藻教研室，为亚心形扁藻和等鞭金藻OA-3011。

1.2实验方法

1.2.1实验方法水温设置10、12、14、16、18、20、23、26、29、31、33、35、37℃组和一个常温对照组（CK）（27.3～30.6℃），实验在1 000 mL烧杯中进行，烧杯中加入海水800 mL，每个杯中放稚贝 30只，烧杯置于可控温的培养箱中，每个温度组设3个平行组，按照±1℃/4h变温速率达到实验温度后再开始计时，实验时间为18 d。

1.2.2日常管理 每天投饵2次，饵料量为 1 × 104cell·mL-1，实验期间不换水，以蒸馏水调整盐度稳定为25，每天观察和记录稚贝的摄食、运动、分布水层及存活情况。

1.3数据统计及处理

实验结束时测量稚贝的壳长和壳高，计算成活率和生长情况：

式中L1为实验结束时稚贝平均壳长，L0为实验开始时平均壳长；H1为实验结束时稚贝平均壳高，H0为实验开始时平均壳高； T为实验天数；S1和S0分别为实验结束和开始的存活个体数量。稚贝死亡以贝壳张开、肉体腐烂为标准。

珠母贝稚贝低温或高温敏感起始点的确定参照刘志刚等［15］方法，适宜存活温度及最适宜存活温度：存活率 Rs = 50 %作为珠母贝稚贝生存临界温度，高低两端生存临界温度之间的温度范围则为该稚贝生存适宜温度范围。临界温度采用两点法［16］计算，公式为：

其中T1、T2分别为存活率接近50 %的低、高端温度，RS1、RS2为对应的存活率。经过多重比较无明显差异（P＞0.05）的存活率最高的几个实验组对应的温度作为生存最适温度。

采用Duncan法进行多重比较，结果显示存活率与常温对照组有显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）差异的低温端最高温度作为低温敏感起点，高温端最低温度作为高温敏感起始点［16］。

采用栗志民等［16］的方法来界定稚贝生长适宜温度与生长最适温度：即确定实验期间壳长和壳高日均生长率最高的组，按照其日均生长率30 %所对应的温度作为壳长和壳高增长临界温度，高低两端生存临界温度之间的温度范围则为该贝类的生长适宜温度范围。临界温度的计算采用二点法，经过统计学分析结果表明无明显差异（P＞0.05）的日均生长率最高的实验组对应的温度作为生长最适温度，适宜和最适生长温度范围是以上两个指标的温度重合部分。

实验数据采用SPSS13.0软件进行统计学分析，若有显著差异，再作Duncan多重比较，显著性水平α = 0.05。

2　结果与分析

2.1珠母贝稚贝适宜生存温度及最适生存温度

珠母贝稚贝在不同温度下的15 d成活率情况见图1。经过7 d的培养，10℃稚贝死亡率为32 %，12℃死亡率为27 %，10 d时稚贝的死亡率10℃为73 %，12℃死亡率为69 %，12 d和15 d后两个温度的稚贝全部死亡。在37℃高温下，24h的死亡率为90 %，48h全部死亡。其他各温度组以平均存活率为依据，采用两点法计算得到平均存活率为50 %的低端存活临界温度为15.3℃，高端为33.4℃，从而得出珠母贝稚贝适宜生存温度范围为15.3～33.4℃。对平均存活率进行单因素方差分析，结果表明23℃、26℃、29℃、31℃四个温度稚贝的存活率都在70 %以上，多重比较表明，这4个温度组稚贝存活率没有显著差异，因而珠母贝稚贝最适宜存活的温度范围为 23～31℃。与对照组相比，低温和高温敏感起始点分别为 26℃和31℃。

图1　不同温度下珠母贝稚贝的成活率Fig.1　Survival rate of juveniles of Pinctada margaritifera at different temperatures

2.2珠母贝稚贝适宜生长温度及最适生长温度

2.2.1珠母贝稚贝壳长适宜生长温度和最适温度实验温度下珠母贝壳长的生长随着温度的升高而加快，29℃达到最高，之后随温度的升高长速下降，如图2和表1。稚贝壳长生长临界温度的低端温度范围为16～18℃，高端为33～35℃，采用两点法计算，壳长增长的低端临界温度为 17.8℃，高端为33.2℃，从而得出珠母贝稚贝壳长适宜生长温度范围为17.8～33.2℃，对壳长日均生长率及净增长进行单因素方差分析，结果显示温度对壳长生长有显著的影响，多重比较表明，29℃和31℃两组比其他组及对照组生长显著快，因而29～31℃为稚贝壳长生长的最适温度范围。

2.2.2珠母贝稚贝壳高适宜生长温度和最适温度

温度对稚贝壳高生长影响与壳长相似，壳高生长的情况见图3和表1。随着温度的升高，壳高的增长和日均生长率增大，到29℃达到最大，壳高增长为1240.98µm，日均增长率为82.73 µm·d-1，之后随着温度的升高稚贝的长速下降。稚贝壳高生长临界低端温度范围为16～18℃，高端为33～35℃，采用两点法计算，稚贝的壳高生长的临界温度低端为17.4℃，高端为33.1℃，因而稚贝壳高适宜增长的温度范围为17.4～33.1℃。在临界温度范围内，对壳高的生长进行单因素方差，结果表明温度对壳高的生长存在显著的影响，29℃和31℃显著比其他组高，并且彼此间差异不显著，因而29～31℃为稚贝壳高生长的最适温度范围。

图2　不同温度下珠母贝壳长日均生长率Fig.2　Daily growth rate of shell length of juveniles of Pinctada margaritifera at different temperatures

图3　不同温度下珠母贝稚贝壳高日均生长率Fig.3　Daily growth rate of shell heigth of juveniles of Pinctada margaritifera at different temperatures

2.2.3珠母贝稚贝适宜生长的温度和最适温度稚贝壳长适宜生长温度为17.8～33.2℃，壳高适宜生长温度为17.4～33.1℃，两者重叠的温度范围为17.8～33.1℃，即稚贝适宜生长温度范围为17.8～33.1℃；壳长最适生长的范围29～31℃，壳高为同样的范围，两者的温度相同，即稚贝最适生长的温度范围为29～31℃。

表1　不同温度珠母贝稚贝壳长、壳高增长Table 1　Growth of shell height and shell length of juveniles of Pinctada margaritifera at different temperatures

2.3不同温度下稚贝的行为和生理情况

实验过程中对不同温度组稚贝进行观察及镜检，10～14℃的稚贝多数附着在烧杯的底部，显微镜下观察稚贝腹足在壳内外不伸缩，胃内没有或有极少的饵料，心脏微弱的跳动；16～33℃的稚贝一部分在杯底附着，一部分在杯壁附着，镜检发现稚贝的胃内充满饵料，通过腹足在壳内外的伸缩，稚贝可以移动，并且外套膜不停收缩，心脏跳动有力；但温度达到35～37℃时，稚贝多数移动到水面以上的杯壁，镜检发现稚贝不摄食，心跳微弱，腹足在壳内不伸缩，活力很差，37℃条件下经48h稚贝全部死亡（表2）。

35℃时，稚贝在水面以上杯壁的分布高达83.97 %，远远高于10～33℃杯壁分布率。多重比较显示，35℃时在水面以上的分布与其他组存在显著差异；16～33℃组在水面之下杯壁分布率最高，其次是10～14℃组，35～37℃组最低，多重比较显示，35～37℃、10～14℃和16～33℃组间存在显著差异；杯底稚贝分布率也存在显著差异，10～14℃显著高于16～33℃之间的组，16～33℃之间的组显著高于35℃组（表2）。

表2　不同温度下珠母贝稚贝在水中分布比率Table 2　Distribution of juveniles of pinctada margaritifera at different temperatures in water-layer　%

3　讨论

3.1温度对珠母贝稚贝生长、存活的影响

温度是影响贝类存活、生长和繁殖的最重要的因素之一，许多学者［17-19］认为贝类的生理代谢受环境和生物因素的影响，从而影响其生长和存活。适宜的环境温度是保证海洋生物机体各种代谢顺利进行的必不可少的条件。从本实验过程来看，温度对珠母贝稚贝影响是多方面的，包括运动、摄食、生理等。低于14℃或高于35℃的环境中，稚贝基本不活动、摄食能力差，心跳微弱，随后批量死亡。16～33℃稚贝在生活的水环境中分布均匀，可以在水体上下移动，摄食积极，生理活动良好，这与其他贝类是相似的［20-23］。

温度对贝类幼虫和稚贝生长发育及存活影响是通过两方面进行：一是通过影响幼虫或稚贝代谢过程中的能量收支，从而影响其生长和存活，另一方面通过改变贝类生命活动过程中酶的活性，影响其代谢率，从而影响幼虫或稚贝生长发育［24］，在适宜的温度范围内，随着水温升高，生物体内各种生化反应加快，耗氧、排泄活动相应的能力加强，生物存活率高，生长良好，而当温度超过生理极限时又会相应减弱，从而影响生物的存活和生长，这是变温动物的普遍特点［21-23］。本实验结果与其一致。

3.2珠母贝适宜生长和存活的温度

珠母贝稚贝适宜生存温度范围为15.3～33.4℃，最适宜存活的温度范围为23～31℃，低温和高温敏感起始点分别为26℃和31℃；稚贝适宜生长温度范围为17.8～33.1℃，最适生长的温度范围为29～31℃。从实验结果可知，珠母贝稚贝温度适应范围比较广，但最适温度向高温区间偏移，即在适宜温度区间高温区更适宜珠母贝稚贝存活和生长，这和泥蚶［25］、文蛤［26］等耐受高温性的贝类生理特点相似，也和珠母贝在热带海区分布特点相一致，同属于热带海区的珍珠贝类如大珠母贝和合浦珠母贝，其最适生长温度分别为25～30℃［17］和23～25℃［27］，与两者相比珠母贝稚贝最适温区还要高，表明不同种类存在适应性差异。广东和广西海区冬季的水温多在16～17℃左右，遇到寒潮天气甚至更低，根据珠母贝稚贝更适应高温的特性，稚贝养成中遇到低温天气，应采取相应防御措施，减少因低温致使稚贝大量死亡的发生。

谢仁政等［8］认为，珠母贝稚贝适宜存活和最适存活盐度分别为 20.64～39.10和 27.19～35.02，壳长增长的适宜盐度和最适盐度为 19.38～41.30和27.19～31.10，本实验盐度 25实验条件虽不在谢仁政等［8］报道的珠母贝稚贝最适盐度范围内，但仍在适宜盐度范围内。

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（责任编辑：陈庄）

Study on Adaptability of Juveniles of Pinctada margaritifera to Different Temperatures

ZHOU Yin-huan，HUANG Hai-li
（Fisheries College of Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524088，China）

The juvenile Pinctada margaritifera（shell length（2.88 ± 0.54）mm，shell height （2.44 ± 0.46）mm）were selected indoor to examine their temperature adaption.All animals were equally divided into 14 groups under different culture temperatures：10、12、14、16、18、20、23、26、29、31、33、35、37℃ and room temperature as a control group（ CK）.Results showed that juveniles could survive at 10℃ for 12 d，12℃ for 15 d and 37℃ for 48h ，respectively；and the appropriate survival seawater temperature was among 15.3～33.4℃，the optimal survival seawater temperatures was 23～31℃，upper limit and lower limit of sensitive temperatures threshold was 26℃ and 37℃，respectively.And juvenile shellfish's appropriate growth temperature was 17.8～33.1℃，the optimal growth temperatures was 29～31℃.Temperature had an effect on thewater- layer distribution and physiology of juvenile Pinctada margaritifera，the number of shellfish juveniles dwelling in the water surface at 35℃were much more than that of other groups.Numbers of juveniles dwelling on the cup wall increased significantly in sequence：16～33℃groups，10～14℃groups and 35℃group.Numbers of juveniles dwelling on the cup bottom increased significantly in sequence：10～14℃groups ，16～33℃ groups and 35℃ group.At 10～14℃and 35～37℃the shellfish juveniles didn't feed and move ，whereas they moved and fed actively at 16～33℃.

Juveniles of Pinctada margaritifera；temperature；survival；growth；water-layer distribution；physiology

S968.3

A

1673-9159（2016）04-0096-05

10.3969/j.issn.1673-9159.2016.04.016

2016-04-11

广东省海洋渔业科技与产业发展专项（Z2014013）

周银环（1969—），女，高级实验师，研究方向为水产养殖。

黄海立（1970—）男，教授级高工。Tel：13702885446，Email：huanghaili90@163.com