抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体检测对类风湿关节炎的辅助诊断作用

魏　萍，王艳侠，王　敏，石书梅

抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体检测对类风湿关节炎的辅助诊断作用

魏萍，王艳侠＊，王敏，石书梅

目的通过与抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、类风湿因子（RF）比较，评估抗突变型瓜氨酸波形蛋白（MCV）抗体检测在类风湿关节炎（RA）中的临床应用价值。方法对222例研究对象，包括132例RA患者，42例非RA的风湿性疾病患者及48名健康对照组，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中的抗MCV抗体水平，并同时检测血清中抗CCP抗体、RF水平。统计学分析采用t检验和χ2检验。结果132例RA中抗MCV抗体阳性97例，对RA诊断的敏感性为73.5%，特异性为94.4%，阳性预测值和阴性预测值分别为95.1%和70.8%。结论抗MCV抗体在RA中具有较高的敏感性和特异性，可作为RA诊断的辅助指标，建议抗MCV抗体和抗CCP抗体联合检测，可提高对RA诊断的特异性，提高早期诊断率。

关节炎，类风湿；抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体；抗环瓜氨酸肽抗体；类风湿因子

DOI:10.14172/j.issn1671-4008.2016.10.005

［Key words］Arthritis，rheumatoid；Anti-mutated citrullinated vimentin antibody（anti-MCV）；Anti-cyclic citrullinated peptide antibody；Rheumatoid factor

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种致关节畸形的自身免疫性疾病，以慢性滑膜炎为特征，最终导致骨吸收，骨破坏和骨纤维化。只有早期治疗才能有效阻止病情发展，防止骨关节侵蚀，避免残疾，而早期诊断是早期治疗的关键，类风湿因子（RF）是目前RA诊断标准中唯一的实验室指标，但RF对RA早期的诊断特异性较低［1］，近年来相继发现的具有相同抗原决定簇的抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体 （AKA）、抗纤聚蛋白抗体（AFA）和抗环瓜氨酸酞（CCP）抗体对RA都有较高的特异性，并可在疾病的早期出现［2］，但因敏感性不高限制了临床普遍应用。目前，临床最常用的是抗CCP抗体的检测。在最近的相关研究［3］中发现，较多的RA患者，其血清中抗CCP抗体阴性但抗突变型瓜氨酸波形蛋白（MCV）抗体却阳性。MCV来自人类的天然蛋白，具有多个潜在的抗原决定簇，其相对分子质量比抗CCP抗体小，与抗CCP抗体相比，抗MCV抗体具有较高的敏感性和特异性［4］。该文通过分析222例患者血清中抗MCV抗体、抗CCP抗体和RF水平，评价联合检测在早期RA诊断中的应用价值，为临床提供有价值的辅助检查。

1　资料与方法

1.1对象笔者所在院2013年3月—2016年1月收集该院风湿免疫科、骨科等门诊及住院患者血清标本222例。其中132例确诊为RA，其中男34例，女98例；年龄15～70岁，平均33岁。非RA组包括系统性红斑狼疮 （SLE）18例，原发性干燥综合征（Pss）13例，未分化结缔组织病（UCTD）3例，强直性脊柱炎（AS）8例。其余48例为健康对照组，来自笔者所在院体检中心进行健康查体的健康人群。

1.2仪器与试剂检测用酶标仪为DNM-9606，选用的抗MCV抗体试剂盒由德国ORGENTEC提供，抗CCP抗体试剂盒由上海科新生物技术公司提供。

1.3方法用普通真空采血管采集受试者空腹静脉血3 ml，置于-80℃冰箱保存至化验分析，采用酶联免疫吸附法，同时检测222例血清中抗MCV抗体和抗CCP抗体水平，其中抗MCV抗体＞20 U/ml为阳性，抗CCP抗体＞25 U/ml为阳性，操作按说明书。RF采用散射比浊法测定，，RF＞20 U/ml为阳性。

1.4统计学分析应用SPSS 13.0统计学软件，采用χ2检验比较RA组、非RA疾病对照组、健康对照组中抗MCV抗体、抗CCP抗体和RF的阳性率。组间比较采用t检验，计数资料采用χ2检验。采用四格表计算敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1222例病例组抗MCV抗体、抗CCP抗体和RF的检测结果抗MCV抗体、抗CCP抗体和RF三种检测指标分别在RA组、非RA疾病对照组、健康对照组3组间比较，差异均有统计学意义（P均＜0.001），见表1。

表 1　222例病例组抗MCV抗体、抗CCP抗体和RF的检测结果

2.2联合检测的比较三种检测项目分别交叉联合检测，见表2。结果显示，抗MCV抗体/抗CCP抗体联合检测，能得到较高的敏感性（77.3%）和特异度（93.3%），因此为RA诊断的有效方法。

表2 抗MCV抗体、抗CCP抗体和RF单独及联合检测的敏感度和特异度（%）

3　讨论

波形蛋白（vimentin）是一种非常重要的细胞骨架蛋白，属中间纤维的波形纤维蛋白类，由10个氨基酸残基组成，相对分子量为58000，主要在起源于中胚层的细胞中表达，如成纤维细胞、内皮细胞和白细胞等［5］。在细胞内，波形蛋白纤维与微管、微丝等形成了一个完整的细胞支撑网络体系。抗MCV是一种自身抗体，于1994年由Despres［6］发现，经鉴定主要针对Sa抗原，当时被认作抗Sa抗体。Sa抗原是一种存在于人脾、胎盘和RA患者血管滑膜翳的非核抗原，波形蛋白在凋亡的巨噬细胞内经过肽酰精氨酸亚氨酶（PAD）的瓜氨酸化后，其蛋白结构会产生变化，会增加其潜在的抗原决定簇 （瓜氨酸），波形蛋白因不能得到及时的清除而持续存在，从而促进了抗MCV抗体的生成［4］。

该研究中，抗MCV抗体诊断RA的敏感性为73.5%，相比于抗CCP抗体，其具有更高的敏感性。而三种指标的特异性依次为抗CCP抗体＞抗MCV抗体＞RF。如果抗MCV抗体与抗CCP抗体联合检测，能得到较高的敏感度（77.3%）、特异度（93.3%）和阳性预测值（94.4%），抗MCV抗体和抗CCP抗体联合检测是早期诊断RA的有效方法，其对RA诊断的特异性也大大提高。

研究显示，38例RF阴性的RA组中，有7例抗MCV抗体阳性。52例抗CCP抗体阴性的RA组中，有22例抗MCV抗体阳性。在很大程度上补充了RA诊断的不足，大大减少了漏诊率。说明抗MCV抗体与抗CCP抗体联合检测，可以相互弥补之不足。特别是在临床高度怀疑RA，而RF抗CCP抗体均阴性时，更能体现检测抗MCV抗体的重要性。

笔者不仅评估了抗MCV抗体在早期RA中的临床应用价值，同时还研究了每种项目联合检测的效果，联合检测是有助于提高疾病早期诊断率的方法。结果表明，最具临床价值的组合为抗MCV阳性/抗CCP抗体阳性，不仅可以得到较高的敏感性（77.3%），还能达到较高的特异性（93.3%）。建议抗MCV抗体和抗CCP抗体联合检测，可提高对RA诊断的特异性和提高早期诊断率，有助于减少漏诊，促进患者的早期诊断和治疗。

有研究表明，抗MCV抗体水平与RA患者的疾病严重程度和发展有关，而抗CCP抗体水平与RF无此相关性［7］，提示抗MCV抗体对RA早期诊断及预后评价都有重要意义。由于本研究样本例数有限，此相关性有待扩大样本进一步研究。

综上所述，该研究评估了检测这两种抗体的临床应用价值，探讨如何选择正确的检测项目，提高检测的敏感度和特异度。抗MCV抗体检测对早期RA的诊断有较好的临床应用和研究价值，其检测采用ELISA法，操作简便快捷，具有广泛的临床应用前景，建议有条件的实验室，抗MCV抗体和抗CCP抗体联合检测有助于提高早期RA的诊断率。

［1］Goldbach-Mansky R，LeeJ，McCoy A，et al.Rheumatoid arthritis associated autoantibodies in patients with synovitis of recent onset［J］.Arthritis Res，2000，2（3）：236-243.

［2］李茹，栗占国.类风湿关节炎抗原的研究进展［J］.中华风湿病学杂志，2004，8（2）：108-110.

［3］Nicaise Roland P，Mignot GS，Bruns A，et al.Antibodies to mutated citrullinated vimentin for diagnosing rheumatoid arthritis in anti-CCP-negative patients and for monitoring infliximab therapy［J］.Arthritis Res Ther，2008，10（2）：142.

［4］Bang H，Egerer K，Gauliard A，et al.Mutation and citrullination modifies vimentin to a novel autoantigen for rheumatoid arthritis［J］.Arthritis Rheum，2007，56（12）：2503-2511.

［5］Clarke EJ，Allan V.Intermediate filaments：vimentin moves in［J］. Curr Biol，2002，12（6）：596-598.

［6］Vossenaar ER，Despres N，Lapointe E，et al.Rheumatoid arthritis specific anti-Sa antibodies target citrullinated vimentin［J］.Arthritis Res Ther，2004，6（2）：142-150.

［7］Boire G，Cossette P，de Brum-Fernandes AJ，et al.Anti-Sa sntibodies and antibodies against cyclic citrullinated peptide are not equivalent as predictors of severe outcomes in patients with recent-onset polyarthritis［J］.Arthritis Res Ther，2005，7（6）：592-603.

［2016-04-10收稿，2016-05-11修回］［本文编辑：董冰媛］

The clinical application of detecting the anti-mutated citrullinated vimentin antibody in the diagnosis of rheumatoid arthritis

WEI Ping①，WANG Yan-xia，WANG Min，et al.①Nephrosis Laboratory Center，the General Hospital of Jinan Military Region，Jinan，Shandong 250031，China

ObjectiveTo investigate the prevalence and clinical significance of anti-mutated citrullinated vimentin antibodies（anti-MCV）in rheumatoid arthritis through comparing it with anti-cyclic citrullinated peptide antibodies and rheumatoid factors.MethodsAnti-MCV antibody was tested by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）in 220 serum samples including 132 patients with RA，42 sujects with out non-RA rheumatic diseases and 48 healthy controls.ResultsAnti-MCV was found 97 in RA.The sensitivity and specificity of anti-MCV in RA were 73.5%and 94.4%.The positive and negative predictive value were 95.1%and 70.8%. ConclusionAnti-MCV antibody may be an valuable parameter for the diagnosis of RA.The anti-MCV and anti-CCP antibody are advised to co-test to improve specificity and the early diagnosis rate of RA.

R392.3:R593.22

A

250031山东济南，济南军区总医院肾内科肾病实验中心（魏萍，王艳侠，石书梅）；250100山东济南，济南市历城区计划生育服务站（王敏）

王艳侠，Email：wyx200100@sohu.com