慢性荨麻疹患者血清25羟基维生素D水平检测及意义

李兆凤 史同新 王君 路金明 徐敬星 黄勇 王晓羽

266071 青岛大学医学院（李兆凤、王晓羽）；青岛大学附属医院皮肤科（史同新、王君、路金铭）；青岛市立医院皮肤科（徐敬星、黄勇）

慢性荨麻疹患者血清25羟基维生素D水平检测及意义

李兆凤 史同新 王君 路金明 徐敬星 黄勇 王晓羽

266071 青岛大学医学院（李兆凤、王晓羽）；青岛大学附属医院皮肤科（史同新、王君、路金铭）；青岛市立医院皮肤科（徐敬星、黄勇）

目的检测慢性荨麻疹患者血清25羟基维生素D水平，探讨25羟基维生素D（25HVD）在慢性荨麻疹（CU）发病中的作用。方法收集50例CU患者及40例健康对照血清，同时应用CU症状评分标准（UAS）对疾病进行评分；用 ELISA测定血清25HVD、干扰素γ（IFN⁃γ）、白细胞介素4（IL⁃4）、免疫球蛋白E（IgE）水平。所得数据采用t检验、秩和检验、直线相关回归分析进行统计学分析。结果CU组血清25HVD水平［（15.20±7.72）μg/L］明显低于对照组［（21.54± 8.31）μg/L，t=3.75，P＜ 0.05］，且两组25HVD水平分布比较，差异有统计学意义（H=17.9，P＜0.05）。UAS评分重度组25HVD水平［（15.57±7.38）μg/L］与轻度组［（14.86±6.28）μg/L］差异无统计学意义（t=0.37，P＞0.05）。CU组血清IFN⁃γ水平明显低于对照组（t=15.34，P＜0.05），但血清IL⁃4和IgE水平明显高于对照组（t值分别为6.54，4.88，均P＜0.05）。CU组血清25HVD水平与IFN⁃γ水平呈正相关（r=0.738，P＜0.05），与IL⁃4水平呈负相关（r=-0.689，P＜0.05），与IgE水平无相关性（r=-0.271，P＞0.05）。结论 CU患者血清25HVD水平明显降低，可能通过介导Th1细胞/Th2细胞失衡参与CU的发生。

荨麻疹；维生素D；干扰素γ；白细胞介素4；免疫球蛋白E；疾病严重程度指数

慢性荨麻疹（CU）发病原因及机制仍不明确。近年国外有报道维生素D与CU发病密切相关［1⁃2］，其机制不明。我们通过测定分析CU患者血清25羟基维生素D（25⁃hydroxy vitamin D，25HVD）、干扰素γ（IFN⁃γ）、白细胞介素4（IL⁃4）、免疫球蛋白E（IgE）的水平，以探讨25HVD在CU发病中的作用。

一、对象

收集2014年12月至2015年4月于青岛大学附属医院皮肤科门诊就诊的CU患者50例。其中男21例，女29例，年龄21～50岁（36.5±11.2）岁，病程4个月至5年。病例入选标准：①每天或几乎每天皮肤发生风团；②病程＞6周；③无糖皮质激素、免疫抑制剂、维生素D类药物以及钙剂服用史，停用抗组胺药≥3 d。排除标准：①病因明确的荨麻疹；②孕妇；③肥胖者（BMI＞ 25 kg/m2）；④湿疹、接触性皮炎、过敏性鼻炎等过敏性疾病患者；⑤有全身严重疾病史或自身免疫性疾病史。对照组40例来自同期在体检中心体检的健康人，其中男16例、女24例，年龄（36.8±10.9）岁。CU患者组与健康对照组性别（χ2=0.04，P＞0.05）和年龄（t=0.43，P＞0.05）比较，差异均无统计学意义。本研究经青岛大学附属医院医学伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

二、方法

1.CU患者病情评分及血清25HVD水平分级：用欧洲学会慢性荨麻疹活动度评分（urticaria activity score，UAS）标准对CU患者进行评分及分组［3］，分值≤4为轻度组，＞4者为重度组。参考文献［4⁃5］及试剂盒说明，本实验以25HVD＜20 μg/L为缺乏，20～30 μg/L为不足，＞ 30 μg/L为正常。

2.血清收集及检测：入选者3 d以上未服抗组胺药物直接采集外周血，服用抗组胺药物者嘱其停药后再采集，不能耐受瘙痒患者不纳入实验组。实验组与健康对照组均在早晨空腹抽血，分离血清，在-20℃低温冰箱保存待测。用酶联免疫法（ELISA）测定血清中的25HVD、IFN⁃γ、IL⁃4及总IgE水平。按试剂盒说明书操作。试剂盒由北京诺亚杰公司提供，为进口分装产品。

3.统计学处理：用SPSS17.0统计学软件进行分析。计量资料数据结果以±s表示，组间计量资料比较采用独立样本t检验，两组样本水平分布比较采用秩和检验，组内计量资料相关性分析采用直线相关回归分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

三、结果

1.CU组与对照组血清25HVD、IFN⁃γ、IL⁃4、IgE水平：CU组患者血清25HVD、IFN⁃γ水平均明显低于对照组（均P＜0.05），IL⁃4、IgE水平明显高于对照组（均P＜ 0.05）。见表1。

表1 慢性荨麻疹（CU）患者和健康对照25HVD、IFN⁃γ、IL⁃4及IgE水平（±s）

表1 慢性荨麻疹（CU）患者和健康对照25HVD、IFN⁃γ、IL⁃4及IgE水平（±s）

注：25HVD：25羟基维生素D；IFN⁃γ：干扰素γ；IL⁃4：白细胞介素4

分组CU组对照组t值P值例数50 40 25HVD（μg/L）15.20±7.72 21.54±8.31 3.75＜0.05 IFN⁃γ（ng/L）41.47±10.07 83.50±15.21 15.34＜0.05 IL⁃4（μg/L）5.22±2.17 2.70±1.21 6.54＜0.05 IgE（μg/L）43.26±15.27 30.22±12.95 4.88＜0.05

2.CU组UAS评分与血清25HVD水平：UAS评分重度组24例，轻度组26例。重度组25HVD水平为（15.57±7.38）μg/L，轻度组为（14.86±6.28）μg/L，差异无统计学意义（t=0.37，P＞0.05）。

3.CU组与对照组血清25HVD水平分布：CU组25HVD缺乏29例，不足17例，正常4例，对照组25HVD缺乏9例，不足24例，正常7例。CU组与对照组25HVD水平分布比较，差异有统计学意义（H=17.9，P＜0.05）。

4.CU组血清25HVD水平与IFN⁃γ、IL⁃4、IgE水平相关性：血清25HVD水平与IFN⁃γ水平呈正相关（r=0.738，P＜0.05），与IL⁃4水平呈负相关（r= ⁃0.689，P＜ 0.05），与IgE水平无相关性（r=⁃0.271，P＞0.05）。

四、讨论

25HVD是维生素D的中间代谢产物，在循环系统中水平稳定，被认为是评估维生素D状态最可靠的指标。

我们发现CU患者外周血中25HVD水平明显低于健康人，同时发现缺乏（25HVD ＜20 μg/L）的比例高达54%，显著高于健康人，与既往研究一致［2］。提示维生素D缺乏可能参与CU发病。我们发现25HVD缺乏和不足的比例在CU患者均较高，且CU患者与健康人的25HVD分布差异有统计学意义。另外，不足的比例在健康人高达60%，推测原因可能是本研究在冬季和初春时开展，人们普遍接受日光照射量减少，维生素D合成减少。我们还发现CU患者外周血中25HVD水平与CU病情严重程度无关，考虑可能是25HVD水平对疾病严重程度无直接影响。

目前研究发现，CU的发生发展还与T辅助细胞亚群（Th1细胞和Th2细胞）的功能失调有关。本研究显示，CU患者血清IFN⁃γ水平较健康人群明显降低，而IL⁃4水平明显高于健康人群，提示CU患者Th1/Th2失衡，与刘利君等［6］研究结果一致。我们同时发现，CU患者血清25HVD水平与IFN⁃γ水平呈正相关，与IL⁃4水平呈负相关。有研究显示25HVD可介导其配体VDR复合体与IFN⁃γ启动子区25HVD反应成分结合，直接抑制IFN⁃γ表达［7］。这一结果提示，维生素D缺乏可能通过Th1/Th2失衡参与CU发生。

本研究结果显示，尽管CU患者血清IgE水平明显高于健康人群，但25HVD水平与IgE水平无明显相关关系，这与Hyppönen等［8］在过敏性疾病中的研究结果一致。但是，有关于儿童哮喘的研究显示补充25HVD可降低血清中IgE水平和嗜酸性粒细胞计数，并推测维生素D3可通过调节IgE来增强免疫、提高疗效［9］。因此，25HVD在IgE分泌合成中的作用机制及该机制在CU发病中的作用尚待研究。

［1］Saini SS.Chronic spontaneous urticaria:etiology and pathogenesis［J］.Immunol Allergy Clin North Am,2014,34（1）:33⁃52.DOI:10.1016/j.iac.2013.09.012.

［2］Chandrashekar L,Rajappa M,Munisamy M,et al.25⁃Hydroxy vitamin D levels in chronic urticaria and its correlation with disease severity from a tertiary care centre in South India［J］.Clin Chem Lab Med,2014,52（6）:e115⁃118.DOI:10.1515/cclm⁃2013⁃1014.

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［4］Durazo⁃Arvizu RA,Dawson⁃Hughes B,Sempos CT,et al.Three⁃phase model harmonizes estimates of the maximal suppression of parathyroid hormone by 25⁃hydroxyvitamin D in persons 65 years of age and older［J］.J Nutr,2010,140（3）:595 ⁃599.DOI:10.3945/jn.109.116681.

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［6］刘利君,陆洁,孙立新,等.卡介菌多糖核酸对慢性荨麻疹患者外周血淋巴细胞分泌干扰素γ和白介素4的影响［J］.中华皮肤科杂志,2013,46（10）:740⁃742.DOI:10.3760/cma.j.issn.0412⁃4030.2013.10.015.Liu L,Lu J,Sun X,et al.Influence of polysaccharide nucleic acid fraction of bacillus Calmette⁃Guerin on the secretion of interferon⁃γ and interleukin⁃4 by peripheral blood lymphocytes from patients with chronic urticaria［J］.Chin J Dermatol,2013,46（10）:740⁃742.DOI:10.3760/cma.j.issn.0412⁃4030.2013.10.015.

［7］Boonstra A,Barrat FJ,Crain C，et al.1alpha,25⁃Dihydroxyvitamin d3 has a direct effect on naive CD4+T cells to enhance the development of Th2 cells［J］.J Immunol,2001,167（9）:4974 ⁃4980.DOI:10.4049/jimmunol.167.9.4974.

［8］Hyppönen E,Berry DJ,W jst M,et al.Serum 25⁃hydroxyvitamin D and IgE ⁃a significant but nonlinear relationship［J］.Allergy,2009,64（4）:613⁃620.DOI:10.1111/j.1398⁃9995.2008.01865.x.

［9］Hatami G,Ghasemi K,Motamed N,et al.Relationship between vitamin D and childhood asthma:a case⁃control study［J］.Iran J Pediatr,2014,24（6）:710⁃714.

Detection of serum levels of 25⁃hydroxy vitamin D in patients with chronic urticaria and its clinical significance

Li Zhaofeng,Shi Tongxin,Wang Jun,Lu Jinming,Xu Jingxing,Huang Yong,Wang Xiaoyu
Medical College of Qingdao University,Qingdao 266071,China（Li ZF,Wang XY）;Department of Dermatology,The Affiliated Hospital of Qingdao University,Qingdao 266003,China（Shi TX,Wang J,Lu JM）;Department of Dermatology,Qindao Municipal Hospital,Qingdao 266011,China（Xu JX,Huang Y）

ObjectiveTo measure serum levels of 25⁃hydroxyvitamin D（25HVD）in patients with chronic urticaria（CU）,and to explore its role in the occurrence of CU.MethodsPeripheral blood samples were obtained from 50 patients with CU and 40 healthy controls.The urticaria activity score（UAS）was used to assess the severity of CU and to group the patients with CU.Enzyme⁃linked immunosorbent assay（ELISA）was performed to measure the serum levels of 25HVD,interferon⁃γ（IFN⁃γ）,interleukin⁃4（IL⁃4）and immunoglobulin E（IgE）.Statistical analysis was carried out byttest,rank sum test and linear correlation analysis.ResultsThe serum level of 25HVD was significantly lower in the patients with CU than in the healthy controls（15.20±7.72vs.21.54±8.31 μg/L,t=3.75,P＜ 0.05）.Moreover,there was a significant difference in the distribution of serum 25HVD levels between the patients and healthy controls（H=17.9,P＜ 0.05）.However,no significant difference was observed in the serum level of 25HVD between severe and mild CU groups（15.57±7.38vs.14.86±6.28 μg/L,t=0.37,P＞0.05）.Compared with the control group,the patient group showed significantly decreased serum levels of IFN⁃γ（t=15.34,P＜ 0.05）,but increased serum levels of IL⁃4 and IgE（t=6.54,4.88,respectively,bothP＜ 0.05）.Among the patients with CU,the serum level of 25HVD was positively correlated with that of IFN⁃γ（r=0.738,P＜ 0.05）,but negatively correlated with that of IL⁃4（r=-0.689,P＜ 0.05）,and uncorrelated with that of IgE（r=-0.271,P＞0.05）.ConclusionThe serum level of 25HVD evidently decreased in patients with CU,and it may participate in the occurrence of CU by mediating the Th1/Th2 imbalance.

Urticaria;Vitamin D;Interferon⁃gamma;Interleukin⁃4;Immunoglobullin E;Severity of illness index

Shi Tongxin,Email:Shitx2006@163.com

2015⁃11⁃04）

（本文编辑：尚淑贤）

史同新，Email：Shitx2006@163.com

10.3760/cma.j.issn.0412⁃4030.2016.09.012

青岛市民生科技计划项目（14⁃2⁃3⁃19⁃nsh）

Fund program:Qingdao Livelihood,Science and Technology Project（14⁃2⁃3⁃19⁃nsh）