早期先兆流产中医辨证分型与外周血中封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8低下的相关性研究*

邓志林，宋春花，韩立民

(1.江西中医药大学2014级在读硕士研究生，江西　南昌　330004；2.赣南医学院 a.第一附属医院，江西　赣州　341000)



早期先兆流产中医辨证分型与外周血中封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8低下的相关性研究*

邓志林1,2，宋春花2a，韩立民2

(1.江西中医药大学2014级在读硕士研究生，江西南昌330004；2.赣南医学院 a.第一附属医院，江西赣州341000)

目的：探讨早期先兆病中医辨证分型与外周血中封闭抗体(BA)CD4、CD8、CD4/CD8低下的相关性，为早期先兆流产的中医辨证分型提供客观化依据，从而指导临床早期先兆流产的中医辨证施治。方法：对124例早期先兆流产病患者进行血清封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8检测，依据《中药新药临床研究指导原则》为标准对每位患者进行中医辨证分型，。结果：①与对照组相比，早期先兆流产病各中医证型血清封闭抗体CD4/CD8均具有显著统计学意义(P<0.01)。②早期先兆流产病肾虚证的血清封闭抗体CD4/CD8与血热证、气血虚弱证、跌仆伤胎证进一步比较具有显著统计学意义(P<0.01)，均值比较为：肾虚证<气血虚弱证<血热证<跌仆伤胎证。③肾虚证患者CD4值(-2.15±2.43)明显小于血热证患者CD4值(-0.78±1.25)，有显著统计学意义(P<0.01)。④与对照组比较，肾虚证血清封闭抗体CD4有显著统计学意义(P<0.01),其余三证型无统计学意义(P>0.05)。结论：肾虚证对早期先兆流产病患者血清封闭抗体CD4、CD4/CD8低下的影响最大，可以将血清封闭抗体CD4、CD4/CD8作为早期先兆流产病肾虚证分型的客观指标。

早期先兆流产；中医证型；封闭抗体；CD4、CD8、CD4/CD8

早期先兆流产病以阴道少量流血，伴阵发性下腹痛或腰背痛为主要症状，属于中医“胎漏、胎动不安”等范畴。近年来，生殖免疫研究表明[1]，免疫因素导致的早期先兆流产比例日益增加，而在各类的免疫指标中认为封闭抗体(block antibody，BA)的价值最大。封闭抗体是在妊娠时，滋养细胞携带的父系抗原刺激母体免疫系统产生的一类IgG抗体，它作为一种体液免疫，是妊娠成功的一个重要因素。母体中的淋巴细胞及胚胎滋养细胞能与之相结合，从而阻断母体与胎儿间的抗原识别及其引起的继发排斥反应。若妊娠早期母体缺乏足够的BA，则会导致母体的同种免疫识别功能降低,母体无法识别胎儿而作异物排斥，进而引发流产。

本文选取早期先兆流产患者124例,进行中医辨证分型和血清封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8检测，以探讨早期先兆流产病中医各证型与外周血中封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8的相关性，现报道如下。

1　对象与方法

1.1研究对象临床病例均为江西中医药大学附属医院2015年9月至2016年1月住院的早期先兆流产患者，共计124例，最小年龄22岁，最大年龄45岁，平均32岁。正常对照组共40例，为2015年9月至12月江西中医药大学附属医院妇科门诊，年龄为20～40岁的就诊保胎者。

1.2诊断标准

1.2.1早期先兆流产的诊断标准参照第8版《妇产科学》[2]和第7版《中医妇科学》[3]早期先兆流产诊断标准如下：①病史：停经史、伴早孕反应；②症状：阴道少许出血，或伴小腹坠痛或腰酸痛；③妊娠试验：尿妊娠试验阳性；④B型超声波检查：子宫大小、孕囊或胚胎(胎儿)发育与孕周相符；⑤妇科检查：宫颈口未开，子宫体软，大小与孕周相符；⑥血清绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、孕酮(P)水平与孕周和B超结果基本相符;⑦基础体温测定：保持黄体期水平(维持高温曲线)。

1.2.2早期先兆流产的中医证型分型标准参考国家药品食品监督局2002年修订的《中药新药临床研究指导原则》[4]，将早期先兆流产分为肾虚型、血热型、气血虚弱型和跌仆伤胎(血瘀)型4型。具体分型如下：

1.2.2.1肾虚证主证：阴道少量出血，色淡暗，质薄；小腹坠痛，腰酸痛；两膝酸软。次证：头晕耳鸣，夜尿频多，或曾屡有堕胎。舌脉：舌质淡，苔白，脉沉细略滑。

1.2.2.2血热证主证：阴道少量出血，色鲜红或深红；小腹疼痛或腰胀痛；口干咽燥。次证：心烦少寐，手足心热，小便短黄，大便秘结。舌脉：舌质红，苔黄，脉滑数或弦滑。

1.2.2.3气血虚弱证主证：阴道少量出血，色淡红，质清稀；小腹坠痛伴腰酸痛；神疲肢倦。次证：心悸气短，面色无华或萎黄。舌脉：舌质淡，苔薄白，脉细缓略滑。

1.2.2.4跌仆伤胎证(血瘀)主证：阴道少量出血，色红，小腹疼痛或腰胀痛；有外伤史。次证：精神倦怠。舌脉：舌质红，苔薄白，脉滑无力。

各证型中主证阴道少量出血必备，另应具备1～2项，同时次证应具备3项方可诊断。运用中医理论进行辨证分型，124例中肾虚证型40例，气血虚弱证型38例，血热证型32例，跌仆伤胎(血瘀)证型14例。

1.3病例纳入标准参考国家药品食品监督局2002 年修订的《中药新药临床研究指导原则》[4](1)符合西医诊断及中医辨证标准，并且患者所抽外周血用流式细胞仪检测封闭抗体至少有一项低下者。(2)自愿接受本研究者。(3)年龄20～45岁。

1.4病例排除标准参考国家药品食品监督局2002 年修订的《中药新药临床研究指导原则》[4](1)年龄>45岁或<20岁。(2)中医四诊资料不全，难以进行中医辨证分型者。(3)不符合本病西医诊断标准及中医症候诊断标准。(4)合并有心、肝、肾或神经系统、造血系统等严重疾患者。(5)排除染色体、生殖器解剖、内分泌因素、生殖器感染、免疫五项及优生四项异常、外界不良因素等导致早期先兆流产的患者。

1.5研究方法于入院次日清晨空腹采取患者及其配偶的静脉血，将二者混合，检测其血清封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8。采用江西中医药大学附属医院检验科血生化标准：CD4>0、CD8>0，CD4/CD8:0.7～2.87。其中任何一项出现负值即代表封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8低下。

2　结　果

2.1各证型组封闭抗体情况4种早期先兆流产病中医证型与血清封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8的关系比较见表1。

表1　124 例早期先兆流产患者各证型组封闭抗体情况±s

注：四证型与对照组比较※P<0.01，与肾虚证比较△P<0.01；四证型与对照组比较★P<0.01，&P>0.05，与肾虚证比较#P<0.01，$P>0.05。

3　讨　论

现代医学认为，早期先兆流产是妊娠病的一种常见并发症，属现代医学免疫流产范围[5]。正常妊娠时，胎儿在母体中能正常生长发育是由于母体的免疫系统能通过识别父源性MHC分子，从而诱导机体产生保护性的封闭抗体。BA通过与母体在妊娠早期产生的一种免疫细胞(致敏T淋巴细胞)表面的CD4和CD8分子特异性结合，从而使CD4+、CD8+T淋巴细胞向细胞内传递的第一信号系统受到干扰。因此，胎儿可继续生长发育。近年来研究发现[6]，BA缺乏是导致早期先兆流产的一个重要原因，其发病机制为：由于这些患者体内存在未被抑制的致敏T淋巴细胞，其可直接作用于胚胎，或通过释放炎性介质间接损害胎儿或胎盘，最终导致流产。

中医古籍中并无血清封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8的记载，我们可将其认为是人体之正气，如《素问·刺法论》[7]中有“正气存内，邪不可干”、《素问·评热病论》[7]有“邪之所凑，其气必虚”等论述，这里的正气指的是维持人体正常生理活动的免疫功能。中医理论认为，正气指人体内具有抗病、驱邪、调节、修复等作用的一类细微物质。这与现代免疫学认为的免疫三大功能：防御、自稳、监视是一致的。若人体正气不足，则抗邪无力，病邪入侵，即损害人体免疫功能，故致血清封闭抗体CD4、CD8、CD4/CD8低下。

本研究外周血中封闭抗体以CD4、CD4/CD8分布低下为主，CD8分布以正常为主，均为正值。由于CD8 是抑制性因素，则呈负相关性作用。而现代免疫学研究表明，免疫功能的正常发挥关键在于CD4/CD8所形成的T细胞免疫网络的调控作用。

由表1中我们可以看出，早期先兆流产病肾虚证、气血虚弱证、血热证和跌仆伤胎证血清封闭抗体CD4/CD8与对照组相比较均具有显著统计学意义(P<0.01)。此结果与朱蕴璞等[8]研究结果相似。结合中医理论思考可认为：肾虚可致胎元不固，气血虚弱可致胎元失养，血热可热扰胞宫，跌仆伤胎可致淤血内阻胞宫，胎元失养不固，从而导致血清封闭抗体CD4/CD8低下。故可解释此四型血清封闭抗体CD4/CD8与对照组的比较皆具有统计学意义。从表1中我们可以进一步看出，早期先兆流产病肾虚证的血清封闭抗体CD4/CD8与血热证、跌仆伤胎证、气血虚弱证进一步比较具有显著统计学意义(P<0.01)，均值比较为：肾虚证<气血虚弱证<血热证<跌仆伤胎证。所得结果与贾科萍等[5]研究结果一致。

从表1中还可看出，肾虚证患者CD4值(-2.15±2.43)明显小于血热证患者CD4值(-0.78±1.25)，有显著统计学意义(P<0.01)。与对照组比较，肾虚证血清封闭抗体CD4有显著统计学意义(P<0.01)，其他三组无统计学意义(P>0.05)。由此可认为肾虚证对早期先兆流产病患者血清封闭抗体CD4低下的影响最大，可以将血清封闭抗体CD4、CD4/CD8作为早期先兆流产病肾虚证分型的客观指标。因此，在实际临床中，对于早期先兆流产病肾虚证的患者，要更加密切关注其血清封闭抗体CD4、CD4/CD8的水平，其可作为早期先兆流产中医辨证分型的一项参考依据，从而指导中医辨证施治。

[1]应翩,姜彦,任辉,等.张萍青治疗封闭抗体不足性复发性流产经验[J].浙江中西医结合杂志,2010,20(1):1-3.

[2]谢幸,苟文丽,林仲秋,等.妇产科学[M].第8版.北京:人民卫生出版社,2013:48.

[3]张玉珍.中医妇科学[M].第7版.北京:中国中医药出版社,2002:210-211.

[4]中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则(试行)[S].北京:中国医药科技出版社,2002:73-77.

[5]贾科萍,傅萍.封闭抗体低下性复发性流产患者外周血中CD3、CD4、CD8相关性探讨及中医证型分布研究[J].中华中医药学刊,2014,32(10):2407-2411.

[6]许红,雷灵梅.反复流产与封闭抗体缺乏的关联研究[J].河北医药,2011,33(5):690-691.

[7]田代华整理.黄帝内经素问[M].北京:人民卫生出版社,2005.

[8]朱蕴璞.早期先兆流产中医证型分布规律探讨及中医药干预效应评价[D].南京：南京中医药大学,2011.

The Relationship Between TCM Syndrome Differentiation of the Early Threatened Abortion and Insufficiency in Blocking Antibodies CD4, CD8 and CD4/CD8 in Peripheral Blood

DENGZhi-lin1,2,SONGChun-hua2,HANLi-min3

(1. 2014-gradegraduatestudent,JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicine,NanchangJiangxi330004;2.TheFirstAffiliatedHospitalofGannanMedicalUniversity;3.GannanMedicalUniversity,GanzhouJiangxi341000)

Objective: To study the relationship between traditional Chinese medicine (TCM) syndrome differentiation of the early threatened abortion and the level of blocking antibodies (BA) CD4, CD8 and CD4/CD8 in peripheral blood, so as to provide an objective basis for TCM syndrome types which can be used to guide the clinical treatment of the early threatened abortion. Methods: Serum levels of blocking antibodies CD4,CD8 and CD4/CD8 were measured in 124 cases of early threatened abortion patients. Using the Guidance and Principle of Clinical Study on New Drugs as the standard, TCM syndrome differentiation was performed on each patient. All data were analyzed by SPSS 17.0 software. Results:①In Comparison with the control group, all the TCM syndrome types in the early threatened abortion group exhibited significant difference in the level of serum blocking antibody CD4/CD8 (P<0.01).②The levels of serum blocking antibodies CD4/CD8 in patients with kidney deficiency syndrome were significantly different from those with blood heat syndrome, deficiency of Qi and blood syndrome, or blood stasis syndrome due to injury (P<0.01). The average level of the blocking antibodies ranks as follows: kidney deficiency syndrome < deficiency of Qi and blood syndrome< blood heat syndrome < blood stasis syndrome due to injury.③The CD4 level in patients with kidney deficiency (-2.15±2.43) was significantly less than that of patients with blood heat syndrome (-0.78±1.25) (P<0.01).④Compared to the control group, the patient with kidney deficiency syndrome serum exhibited significantly different level of blocking CD4 antibody (P<0.01), while the CD4 level in the other three TCM types were not different from that of the control group (P>0.05). Conclusion:Kidney deficiency syndrome has a great impact on the serum levels of blocking antibodies CD4, CD8 and CD4/CD8 in early threatened abortion patients, therefore, CD4, CD8 and CD4/CD8 can be used as an objective index for early threatened abortion with kidney deficiency syndrome type.

Early threatened abortion; TCM syndrome types; Blocking antibodies; CD4, CD8, CD4/CD8

韩立民，男，教授，博士，博士生导师。E-mail：jxhlm@163.com

R285.5

A

1001-5779(2016)03-0370-04

10.3969/j.issn.1001-5779.2016.03.011

2016-03-15)(责任编辑：敖慧斌)