不同方法检测深部真菌感染的结果分析

汪芝满

不同方法检测深部真菌感染的结果分析

汪芝满

目的：比较直接涂片法、真菌培养法及血浆（1-3）-β-D-葡聚糖（G实验）三种检测侵袭性真菌感染（IFI）的效果。方法：选择住院被怀疑IFI的病人。在高热当天留取病人痰液、血液及其他体液同时做实验并记录相应结果。结果：在103例病人中，确诊9例，G实验阳性率89%临床诊断G实验阳性率为77.3%，非IFIG实验阳性率为10.7%。而真菌培养在确诊中实验阳性率为67%，临床诊断实验阳性率50%，非IFI实验阳性率为3.6%。直接涂片法在确诊中实验阳性率为56%，临床诊断实验阳性率44%，非IFI实验阳性率为0%。结论：三种方法各有优缺点，直接涂片法特异性强，能减少假阴性，G实验的灵敏度高且快捷方便，G实验阳性时间早于真菌培养2～6天，对于IFI的早期诊断及其病情变化动态监测及临床疗效的评价具有重要意义。

真菌涂片法 真菌培养法 G实验 IFI

由于人口老年化，慢性病逐渐增多，抗生素的滥用，激素和免疫抑制剂长期使用以及骨髓和器官移植广泛开展，侵入性治疗增多，导致临床深部真菌（invasive fungal infection IFI）感染机会愈来愈多。由于临床早期对IFI诊断困难，真菌感染易被原发病掩盖，容易误诊和漏诊。尤其危重病人发生真菌感染病死率逐年上升［1～2］。原先靠真菌培养和病理组织方法诊断，前者时间长阳性率低，后者活检有创伤。为此早期诊断为降低IFI死亡率有非常重要意义。目前，深部真菌感染实验室诊断方法有直接涂片法、真菌培养法、G实验、分子生物学方法等。而前三者方法临床实验室能较好直接地使用，为此我们将三种方法进行比较，结果如下：

1　资料与方法

1.1一般资料 选择2014年7月-2015年12月住院病人怀疑IFI男50例，女40例，年龄16～91岁，平均年龄约53岁。

1.2研究方法 血培养基、沙包培养基、念珠菌培养基等为科玛嘉提供，Bact/ALERT 4D全自动血培养仪，SIMENZI全自动细菌鉴定仪器，G实验用美国BIO-TEK生产真菌试剂盒测定。仪器，智能恒温仪器及水浴槽及试剂均由厦门科技公司提供，按说明书严格操作。

1.3标本采集 凡诊为IFI住院患者G实验采集发热当天的静脉血测定，同时采集血，痰液及其他体液做真菌培养及涂片检查，收集标本过程无菌操作，避免交叉污染。

1.4结果判断 G实验＞20ng/mL为阳性，10～20ng/ mL为临界值，为观察期。＜10ng/mL为阴性。真菌培养24～48小时后以培养出真菌为阳性，培养无真菌生长为阴性。直接涂片法以检出真菌菌丝、孢子为阳性，未检出真菌菌丝、孢子为阴性［3］。

1.5统计学分析 计算方式如灵敏度、特异度以百分比表示。阳性率比较采用卡方检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结 果

依照血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌感染的诊断与治疗原则（草案）［4］，在103例患者中确诊9例，临床初步诊断真菌感染66例，非IFI28例，见表1。

表1　不同IFI诊断结果与G实验、真菌培养法、直接涂片法检测阳性率比较 例（%）

3　讨 论

本文通过对G实验，真菌培养法和直接涂片法，三种方法的在真菌感染检测中的比较，从以上数据中可以发现其优缺点，G实验是一种能提示有无IFI的检测方法，G实验特异度、灵敏度、阳性及阴性预测值较好，采集血液方便快捷，2个小时出报告，为早期诊断治疗提供方便。但G实验无法区别毛霉菌和根霉菌及隐球菌真菌感染患者，另外，还有导致G实验假阳性结果因素要注意鉴别，如输入白蛋白或球蛋白、血液透析、输入抗肿瘤的多糖类药物、使用磺胺类药物、外科手术后的早期、标本接触纱布等。真菌培养法灵敏度、特异度、阴性和阳性预测值度很好，但真菌培养时间过长，一般需要2～3天，不宜做早期诊断治疗指标。直接涂片法，操作简便，快速，但灵敏度低，标本取材直接影响结果，重复性差。

综上所述，三种方法各有优缺点。G实验检测可能为IFI的早期治疗和诊断提供有力依据，动态检测G实验结果变化对于IFI患者的疗效及预后判断有一定临床价值。

［1］ 冀明，于沧海，于中麟，等.围产组织粘合剂注射加套扎治疗食管胃底静脉曲张［J］.中华消化内科杂志，2006（23）：361～362.

［2］ Luecke T,Pelosi P.Clinical review：positive end-expiratory pressure and cardiac output,cri care,2005,19：607～621.

［3］ 单笑梅，刘德梦.肺部真菌感染的诊断和治疗［J］.中国抗感染化疗杂志，2004,4（5）：317～320.

［4］ 李光迪，王应芳，施鑫鹏，等.血浆（1,3）-β-D-葡聚糖在深部真菌感染诊断的应用［J］.中华医学感染学杂志，2010,20（20）：3244～3246.

Study of the different methods in diagnosis of invasive fungal infections

Anhui No.2 People's Hospital,Hefei 230041,Anhui
WANG Zhi-man

Objective:Study of the different methods in diagnosis of invasive fungal infections. Methods:hospitalized patients suspected of IFI admitted chosen，and sputum，blood and other body fluids when they had fever were sampled，detected and recorded.Result:in 103 patients，9 cases of confirmed and G experimental clinical diagnosis were 89%，positive rate was 77.3% G experiment，the IFI G test positive rate was 10.7%.And fungal culture experiment positive rate was 67% in the diagnosis，clinical diagnosis was 50%，the IFI experiment positive rate was 3.6%.Finally，direct smear method results in experiment positive rate was 56% in diagnosis，clinical diagnosis was 44%，and IFI experiment positive rate was 0%.Conclusion:three methods have their advantages and disadvantages，direct smear method has strong specificity，G experiment hashigh sensitivity and great convenience and G positive time is 2～6 days earlier than the fungi culture，which can be used for early diagnosis of IFI，dynamic monitoring and clinical curative effect evaluation.

Fungal smear；Fungal culture；G-test；Invasive fungal infections（IFI）

R519

A

1671-8054（2016）04-0126-02

/（编审：徐元宏）

安徽省第二人民医院检验科 合肥 230041

2016-05-27收稿，2016-07-01修回