利用ELISA检测方法检验规模化猪场伪狂犬病野毒感染情况

王雪东

（1.东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150030；2.黑龙江职业学院，黑龙江 哈尔滨 150111）

利用ELISA检测方法检验规模化猪场伪狂犬病野毒感染情况

王雪东1，2

（1.东北农业大学，黑龙江 哈尔滨 150030；2.黑龙江职业学院，黑龙江 哈尔滨 150111）

为了了解黑龙江省双城区猪场猪伪狂犬病野毒感染情况，利用ELISA方法，对双城周边7个不同规模猪场的52份血样进行猪伪狂犬病野毒感染情况的检验，总体结果有17头份显示阳性，占总数32.7%

猪场伪狂犬病；ELISA检测

猪伪狂犬病（porcine pseudorabies）是由伪狂犬病病毒引起的一种急性传染病。猪是该病毒的天然宿主，感染种猪和所生仔猪可长期带毒。自然状况下，鼠类也可常年携带该病毒，这都为本病的流行提供了便利条件。不同年龄猪感染该病常呈现出不同的临床表现。成年猪常为隐性感染。公猪感染后常因引起睾丸肿胀、萎缩等原因使种用性能降低。生产母猪感染后可发生返情、屡配不孕等，妊娠母猪感染后可引起流产、死胎及呼吸系统症状。感染仔猪的临诊特征为体温升高，新生仔猪主要表现神经症状，还可侵害消化系统。这都为养猪业带来严重的经济损失。

为了解双城周边规模化猪场猪伪狂犬病野毒感染病况，并为后续净化工作做好前期工作，作者利用ELISA检测方法，对双城周边7个猪场的52份血样进行猪伪狂犬病野毒感染情况的检验，检验方法及结果如下：

1　材料与方法

1.1待检血清样本每个待检猪场按10%比例进行现场采血，将收集到猪血液样本经促凝处理，分离血清，-20℃冷冻保存，待检。

1.2器材美国宝特酶标仪、上海福玛恒温箱、8道微量移液器及吸头、量筒、加样槽、计时器等。

1.3试剂盒猪伪狂犬病病毒gpI抗体检测试剂盒（购于IDEXX北京爱德士元亨生物科技有限公司）、蒸馏水。

1.4检测方法猪伪狂犬病病毒gpI抗体检测方法及判定标准均参照试剂盒内说明书进行。

2　结果

表1　各猪场PRV-gpI-Ab（猪伪狂犬病野毒抗体）检测结果

3　结果分析

本次实验在双城周边随机抽取7个规模化猪场进行采样，样本包含所有猪群，按10%采样。从结果中看，不同猪场具有不同的感染率，最低为22.2%，最高可达57.1%。由于本次采样数量并不多，并未按照公猪、经产母猪等进行分类，但仍发现公猪的阳性相对较高，处于不同时期的猪的感染情况还有待于进一步检查、计算。公猪呈现阳性，对整个猪场的威胁比较大。成年猪可呈阴性感染，通过与其直接接触可引起本病的发生，配种也可造成本病的传播。

猪可通过鼻道或口腔而自然感染，感染后病毒在扁桃体、咽黏膜增殖，再经嗅神经等神经的鞘淋巴到达脑、脊髓；或由口、咽黏膜经呼吸道进入肺泡。病毒可随血液到达全身各处。另外，鼠可因食入病猪肉而常年带毒，因此，预防本病也需做好灭鼠工作。

猪伪狂犬病目前尚无有效药物治疗，在紧急情况下，可选用高免血清进行治疗，有望降低本病死亡率。疫苗免疫接种仍是预防及控制本病的根本有效措施。目前，弱毒灭活苗、野毒灭活苗、基因缺失苗等已研制成功，在多处流行地区使用，大大降低了本病的发生，减少经济损失。建议在猪场建立、完善免疫程序，实施切实可行的免疫措施，以减少猪伪狂犬病野毒感染的比例，最好能净化猪场伪狂犬病。值得注意的是，当一个猪场同时接种两种基因缺失疫苗时，病毒可能会出现基因重组，因此同一猪场，尤其同一头猪，严禁同时接种两种基因缺失疫苗。

在猪场可以进行猪伪狂犬病野毒感染的诊断方法有很多，例如可做接种动物试验，分离病毒进行中和试验；或通过病理切片做直接免疫荧光检查；本实验中利用ELISA技术检验猪血清中的伪狂犬病野毒抗体，操作简单易行，结果准确可靠，效果良好。

［1］贺纪云.我国部分规模化伪狂犬病野毒感染状况调查及净化方案的初步研究［D］.河南：河南农业大学，2009.13-29.

［2］金和平.规模猪场猪伪狂犬病的净化研究［J］.河北畜牧兽医，（35）：21-22.

10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.09.016

王雪东（1978～），黑龙江人，讲师，本科