新疆乌鲁木齐市新市区妇女生殖道人乳头瘤状病毒感染基因分型研究

杨　丽　陈志芳　杜　蓉新疆医科大学第一附属医院妇科，新疆乌鲁木齐　830054

新疆乌鲁木齐市新市区妇女生殖道人乳头瘤状病毒感染基因分型研究

杨丽陈志芳杜蓉▲
新疆医科大学第一附属医院妇科，新疆乌鲁木齐830054

目的 探讨新疆乌鲁木齐市新市区HPV感染情况、型别分布、与宫颈病变的相关性。方法 采用机会抽样方法对新疆乌鲁木齐市新市区1989名女性行高危型人乳头瘤状病毒（HPV）分型检测、液基细胞涂片，分析HPV感染情况、型别分布、与宫颈病变的相关性。结果 新疆乌鲁木齐市新市区女性HPV阳性率为27.95%，高危型HPV感染率为19.36%，以HPV-16、18、58和56型HPV阳性者最多。新疆乌鲁木齐市新市区女性HPV检出率在≤30岁、＞30～40岁、＞40～50岁、＞50岁4个年龄段差异有高度统计学意义 （P＜0.01），其中，＞30～40岁年龄组HPV感染率最高，多重感染在各年龄阶段差异无统计学意义 （P＞0.05）。HSIL/宫颈癌患者HPV-16感染高于ASCUS/LSIL患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论HPV分型检测对宫颈病变的早期诊断与预后有重要意义。HPV-16、18、58和56相关的感染与宫颈癌前病变关系密切，这在新疆地区疫苗的制备上有特殊及重大意义。

人乳头瘤病毒；分型；宫颈病变；维吾尔族

［Abstract］Objective To investigate the cervical human papillomavirus（HPV）infection，type distribution and the correlation with cervical lesions in the Xinshi areas of Urumqi City，Xinjiang.Methods Opportunity sampling method was used to investigate a total of 1989 women received liquid-based cytology test and HPV types test in Xinshi area of U-rumqi City，Xinjiang.HPV infection，type distribution and the correlation with cervical lesions were analyzed.Results The positive rate of HPV was 27.95%in women of Xinshi areas in Urumqi City，Xinjiang.The detection rate of highrisk genotypes of HPV was 19.36%，genotypes of HPV-16，18，58，56 were common in high-risk of HPV.The HPV positive rates of the different age groups（aged≤30，＞30-40，＞40-50 and＞50）was statistically significant（P＜0.01）；the HPV infection rate was the highest in＞30-40 years old age group.There was no difference in multiple infections among different age groups（P＞0.05）.The HPV-16 infection rate in patients with HSIL/cervical cancer was significantly higher than that in patients with ASCUS/LSIL（P＜0.05）.Conclusion HPV typing detection has important significance in the early diagnosis and prognosis of cervical lesions.HPV-16，18，58 and 56 related infections are closely related with precancerous lesions of uterine cervix.This has a special and significant meaning in the generation of the vaccine in Xinjiang.

［Key words］Human papillomavirus；Genotype；Cervical lesion；Uygurs

宫颈癌是全球女性病死率第2位的恶性肿瘤，全球每年新发病例超过50万例，其中超过80%发生在发展中国家［1］。20世纪70年代，Zur Hausen［2］首次提出人乳头瘤状病毒（HPV）和宫颈癌之间的联系。研究已证实，HPV DNA是99.7%宫颈癌的致病原因［3］，高危型HPV持续感染是宫颈癌发生的必要条件［4］。

随着HPV与宫颈癌关系的明确，全球宫颈癌的防治研究出现了重要的两大突破：一方面，高危型HPV检测成为宫颈癌初筛的最佳手段［5］；另一方面，HPV预防性疫苗的诞生使得宫颈癌的预防成为可能［6］。新疆部分地区文化水平落后，生活条件差，早婚早孕多产，故宫颈癌发病率明显高于全国［7］。但目前以较大城市为人群基础的HPV感染状况调查资料仍然较少。本研究采用HPV基因分型检测试剂盒，利用导流杂交技术检测新疆乌鲁木齐新市区人群HPV感染情况、型别分布，包括与年龄相关的HPV型别、与宫颈病变的相关性分析。为确定适合新疆地区的宫颈癌筛查方案及积极推进HPV疫苗的开发奠定基础。

1　资料与方法

1.1一般资料

2013年1月～2014年1月采用机会抽样方法选择新疆乌鲁木齐市新市区19～69岁有性生活史的智力正常的女性作为研究对象，纳入研究对象共1989名，平均年龄为（35.4±7.3）岁。汉族1044名，维吾尔族945名。所有对象均为智力正常的非月经期妇女，检查前3 d内没有阴道用药及24 h内无性生活。所有研究对象均为自愿接受宫颈癌筛查。合格对象签署知情同意书。

排除标准：①急性生殖道炎症及妊娠的妇女；②既往宫颈上皮内瘤变病史、接受过治疗；③近期阴道用药及用过激素类药物。

1.2方法

1.2.1取样步骤与要求先用棉拭子将阴道或子宫颈口过多的分泌物擦拭干净，再用宫颈刷紧贴子宫颈口稍用力顺时针旋转5圈，然后放入专用细胞保存液的试管中。以上标本于4℃保存，1周内测定。

1.2.2宫颈液基细胞学检查方法 （TCT）TCT诊断标准采用2001年TBS（the 2001 Bethesda system）分级系统进行细胞学诊断［8］。

1.2.3HPV分型检测使用凯普HPV 21分型检测试剂盒，以组织病理学诊断结果为最终确诊结果。

1.3统计学方法

所有原始数据均需反复核对，录入后复查。所有数据经SPSS 17.0统计软件进行处理，计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1新疆乌鲁木齐市新市区妇女生殖道感染HPV基因型分布情况

1989名妇女 HPV总阳性率为 27.95%（556/ 1989），单一感染435例，多重感染121例。高危型HPV感染率为19.36%（385/1989），低危型HPV感染率为2.51%（50/1989），高危型HPV阳性人群中以16、18、58和56亚型HPV阳性者最多，占高危型HPV阳性者总数的百分比依次为 45.71%（172/385）、17.14%（66/385）、11.69%（45/385）和6.23%（24/385），4种型别占高危型阳性人数的百分比为79.74%。见表1。

表1　新疆乌鲁木齐市新市区妇女宫颈感染HPV基因型分布

2.2新疆乌鲁木齐市新市区妇女不同年龄段HPV亚型感染情况

将1989名妇女按年龄分组，分为≤30岁、＞30～40岁、＞40～50岁、＞50岁4个年龄段。各年龄段患者HPV、高危型HPV（HR-HPV）感染情况及多重HPV感染情况见表2。各年龄段HPV检出率分别是21.98%、38.47%、24.27%、12.44%。经检验≤30岁、＞30～40岁、＞40～50岁及＞50岁以上四组的HPV阳性率差异有高度统计学意义（χ2=77.57，P＜0.01），＞30～40岁年龄组 HPV感染率明显高于≤30岁、＞40～50岁及＞50岁组，统计学比较差异有统计学意义（χ2=30.21，P＜0.01；χ2=34.73，P＜0.01；χ2=48.70，P＜0.01）。而≤30岁、＞40～50岁的患者HPV感染率比较差异无统计学意义（χ2=0.49，P＞0.05），这两组HPV感染率均高于＞50岁以上人群，差异均有统计学意义（χ2=7.79，P＜0.05，χ2=12.14，P＜0.05）。＞40～50岁年龄段患者感染HR-HPV的构成比最高，差异有高度统计学意义（χ2=16.65，P＜0.01）。4个年龄段患者感染HPV多重感染率差异无统计学意义 （χ2=3.46，P＞0.05）。

表2　新疆乌鲁木齐市新市区妇女各年龄组HPV感染情况［n（%）］

2.3新疆乌鲁木齐市新市区妇女不同程度宫颈病变HPV亚型感染情况

556例HPV阳性患者中，宫颈正常/炎症组313例，ASCUS/LSIL组 217例，HSIL/宫颈癌组 26例。ASCUS/LSIL组高危HPV感染率为49.77%，HSIL/宫颈癌组的高危HPV感染率为100%，两组比较，差异有高度统计学意义（χ2=23.68，P＜0.01）。正常或宫颈炎前3位 HPV基因型依次为 HPV-16、18、58；ASCUS/LSIL前 3位HPV基因型依次为 HPV-16、31、58；HSIL/宫颈癌组前3位HPV基因型依次为HPV-16、18、58。HSIL/宫颈癌组的 HPV-16感染率高于ASCUS/LSIL组，差异有统计学意义 （χ2=5.00，P＜0.05）。其他各型的检出率与宫颈病变严重程度均不相关（P＞0.05）。ASCUS/LSIL组多重HPV感染率为30.87%，HSIL/宫颈癌组的多重 HPV感染率为3.84%，两组比较差异无统计学意义 （χ2=0.557，P＞0.05）。见表3。

表3　新疆乌鲁木齐市新市区妇女不同程度宫颈病变HPV亚型感染情况［n（%）］

3　讨论

宫颈癌是可以预防及治愈的癌症，宫颈癌前病变的早期筛查及早期干预是有效降低宫颈癌发病率的重要措施［9］。1943年Papanicoaou提出的宫颈巴氏涂片五级分类法不足之处是假阴性率及误诊率过高［10］。1988年50位病理学家在美国马里兰州Bethesda城召开会议提出采用描述性诊断报告，1991年修改，2001年再次讨论并推出2001 TBS诊断法。目前我国广泛采用薄层液基细胞涂片进行宫颈癌的筛查［11］。

2005年，HPV检测被推荐作为子宫颈癌筛查手段［12］。研究HPV区域流行情况、感染特点及其与子宫颈病变的关系，对于HPV临床数据长期监控、疫苗研发及子宫颈癌防治相关政策制订有重大意义。

3.1乌鲁木齐市新市区女性HPV感染率及亚型分布特征

HPV感染因地理位置及种族的不同，型别感染有明显的差异［13］。本次调查结果显示，新疆城市新市区HPV感染率为27.95%。周艳秋等［14］研究报道筛查人群中HPV感染率为14%～28%。新疆是我国宫颈癌高发地区，可能与新疆女性人群HPV感染逐年升高有关。HPV的感染可能受多因素的影响，除了种族因素，地域因素、经济、社会、收入等因素也可能产生重要的作用。

HPV感染亚型通常呈现地域性差异，比如中国人群感染率较高的HPV-52和HPV-58，在欧洲、美国和非洲国家则属于低感染亚型［15-16］。在我国HPV-16、18占据了所有亚型的69.9%［17-18］。本次研究发现HPV-16及HPV-18仍然是新疆乌鲁木齐市女性感染的常见类型，与上述文献结论一致。但同时发现HPV-58及56亚型阳性率较高，可能与新疆独特的生活背景及地域存在一定的关系。仅仅针对HPV-16及18的疫苗能否预防新疆大部分人群的感染，仍待考察，对于HPV-58及56的感染仍然不能忽视，这在新疆疫苗的制备上仍然有特殊及重大的意义。

3.2新疆乌鲁木齐市女性HPV感染的年龄特征

HPV感染在年龄的分布上有一定的规律及差异。有研究发现，通常在青春期有较大比例的感染，在中年时期出现高峰，不同的地区随年龄的变化感染率不同［19］。本研究结果中，不同年龄段的HPV阳性率差异显著，＞30～50岁年龄组HPV感染率明显高于其余各年龄组，各组的多重感染率相比无显著区别。可能由于该年龄段妇女处于性生活活跃期，且此阶段的女性容易出现再婚及多个性伴侣等情况，极易导致HPV感染率上升。新疆乌鲁木齐市女性HPV感染的年龄出现的单峰分布具体原因，还需扩大研究人群进一步进行论证。

3.3HPV与新疆乌鲁木齐市新市区女性宫颈病变的关系

本研究结果显示，HSIL/宫颈癌组高危HPV感染率较ASCUS/LSIL组高。高危HPV基因亚型感染与宫颈病变的关系即随着宫颈病变级别的升高，高危型HPV亚型感染阳性率增加；在乌鲁木齐市新市区女性宫颈病变中常见的高危HPV基因亚型依次是HPV-16、18、58。目前临床上对于多个基因型的HPV同时感染可使宫颈病变程度增加仍存在着较大争议。HSIL/宫颈癌组患者两种以上HPV亚型感染率低于其他两组，多重感染率随着宫颈病变的级别增高并未出现上升趋势，此结果与Munoz等［20］的研究结果相同，与Smith等［19］的研究结果不同。这与不同地域及不同种族的多重感染率不同有关，所以HPV多重感染促进宫颈癌的发展及病变进展的机制可能较为复杂，尚需多地区、大样本的调查才能得出一定的结论。

综上所述，新疆乌鲁木齐市女性HPV的感染率较高，HPV常见亚型依次为HPV-16、18、58、56亚型；新市区＞30～40岁的女性较易感染HPV，多重感染在各年龄阶段无差异；随着宫颈病变程度升高，高危型HPV阳性率增加。建议在新疆女性中密切随访及监测HPV，尤其是中青年女性HPV-16、18、58、56亚型出现阳性［21］，应该缩短筛查时间，同时充分意识危险因素对宫颈癌的协同作用。本文HPV亚型的研究为新疆制备针对维吾尔族女性的疫苗提供了科学证据。

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Study on genotyping of genital tract HPV infection in women from Xinshi areas of Urumqi City，Xinjiang

YANG LiCHEN ZhifangDU Rong▲
Department of Gynaecology，the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University，Xinjiang Uygur Autonomous Region，Urumqi830054，China

R737.33

A

1674-4721（2016）08（b）-0012-04

2016-05-13本文编辑：程铭）

新疆维吾尔自治区自然科学基金项目（2014211C055）。