白灵菇菌株Pl.n0006的生物学特性研究

王丽星，谢宝贵，黄志伟

（1．福建农林大学食品科学学院，福建 福州 350002；2．福建农林大学菌物研究中心，福建 福州 350002）

白灵菇菌株Pl.n0006的生物学特性研究

王丽星1，谢宝贵2，黄志伟1

（1．福建农林大学食品科学学院，福建 福州 350002；2．福建农林大学菌物研究中心，福建 福州 350002）

研究白灵菇菌株Pl.n0006的生物学特性，探索其在固体发酵条件下的最佳生长条件，为其栽培技术研究奠定基础。采用不同的固体培养基，研究培养基的组成、含水量、酸碱度及光照对菌丝生长的影响。结果表明：白灵菇菌丝在添加麦皮或稻草粉的木屑培养基中都能较好地生长；在培养基中添加1%～5%的石灰可促进菌丝生长，而添加1%～5%的过磷酸钙反而会抑制菌丝生长，菌丝在PDA培养基上生长的最佳pH值为8～11；在黑暗条件下培养，菌丝的生长速度显著比光照条件下快。

白灵菇；生物学特性；菌丝体；固体培养；生长条件

白灵菇（Pleurotus nebrodensis）属于担子菌亚纲，层菌纲，伞菌目，侧耳科，侧耳属，又名白阿魏蘑，可称之为刺芹侧耳的另一个变种。白灵菇是一种药、食两用的大型真菌，盖厚柄粗，菇体肥大，颜色洁白，肉嫩鲜美，并有丰富的营养价值[1]。白灵菇含有丰富的蛋白质、碳水化合物、粗纤维、维生素C、多糖和矿物元素，具有清热解毒、治疗胃病、伤寒、降血压防止动脉硬化、防治骨质疏松、增强人体免疫力等功效[2]。盛伟等[3]研究发现，白灵菇有很强的清除羟基自由基和超氧自由基的能力，并且有较强的还原力和清除NO的能力，可以开发成为抗衰老保健食品辅料或功能因子。

对于白灵菇的生长培育，优质的菌种是白灵菇栽培能否成功的关键，而培育优质白灵菇菌种的关键之一是培养基，培养基虽然有很多种类，但是可以被白灵菇利用的却不多[4]。王桂芹等[5]研究发现，以豆秸粉为主料培养白灵菇，其生物学效率高，因为白灵菇对碳源的要求高一些，而豆秸粉里含有一定量的稻草粉，说明白灵菇的培养基中要求有一定量的木质素。张浩洋等[6]研究表明，白灵菇菌丝可在pH值为4～11的培养基上生长，最适pH为6～8。张瑞颖等[7]研究发现，白灵菇的培养过程给予一定的散射光（400～600Lux），可使白灵菇的子实体更加洁白。培养料的最适含水量为60～62%，若含水量过低，不能满足菌丝生长和子实体的生长发育；若含水量过高，则发菌中后期吃料慢。

为了深入研究白灵菇菌株Pl.n0006的人工栽培技术，文章对该菌株的生物学特性进行研究，现将研究结果总结如下。

表1 12个配方培养基的组成

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌株

白灵菇菌株Pl.n0006为福建农林大学菌物研究中心提供。

1.1.2 供试培养基配方

1.1.2.1 不同固体培养基配方对白灵菇菌丝生长的影响

采用不同的主料和辅料，按表1分别配制出12种固体培养基配方。在配制培养基之前，先将麦皮、玉米粉、木屑和稻草粉置于105℃下烘干2～3h，并防止返潮（下同）；然后将各种配方培养基的含水量均控制为60%。

1.1.2.2 培养基含水量对白灵菇菌丝生长的影响

配方I：木屑76%、麦皮20%、过磷酸钙2%、葡萄糖1%、石膏1%；

配方II：木屑76%、稻草粉20%、过磷酸钙2%、葡萄糖1%、石膏1%。

2种培养基分别设置6个含水量水平，即50%、55%、60%、65%、70%、75%。

1.1.2.3 培养基酸碱度对白灵菇菌丝生长的影响

PDA斜面培养基配方：马铃薯200g、葡萄糖20 g、琼脂20g、水1000mL，PDA培养基配制好后用1mol·L-1HCl或1mol·L-1NaOH调整pH至4、5、6、7、8、9、10、11。

木屑培养基配方：以木屑78%、麦皮（或稻草粉）20%、葡萄糖1%、石膏1%为基础，分别在木屑麦皮培养基（I）和木屑稻草粉培养基（II）中添加过磷酸钙或石灰，各设5个剂量，即1%、2%、3%、4%、5%，相应减少配方中木屑的用量，使培养料总和为100%，以不添加过磷酸钙和石灰的基础培养基为对照。

培养基的含水量均为65%。

1.1.2.4 光照对白灵菇菌丝生长的影响

马铃薯200g，葡萄糖20g，KH2PO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，琼脂20g，水1000 mL。

1.2 方法

1.2.1 不同固体培养基配方对白灵菇菌丝生长的影响

按15g培养料（干重）/试管计算，每个配方约需250g/4培养料（干重）。依表1所述配方计算，并称取培养基各组分，按配方分别先将除过磷酸钙、葡萄糖和石膏以外的各组分混合。再分别取自来水375mL/4/配方，加到过磷酸钙、葡萄糖和石膏的混合物中，溶解后，倒入木屑等的混合物中，并充分混合均匀。然后分装于25×200mm试管中，并用口径较小的试管压实培养料，塞上棉花塞，在126℃下灭菌45min。用接种针挑取白灵菇菌块，接种到各试管的培养基上，并使有菌丝的一面朝上，然后置于温度为28℃的培养箱中培养。待菌丝长入料中约1cm时，画起始线，并注明画线日期。然后继续培养，待菌丝长至接近试管底时画终止线，计算菌丝生长速度（mm·d-1）并评估菌丝长势，然后用软件SAS System For Windows Release 6.12 对实验数据进行方差分析与显著性测验（下同）。

1.2.2 培养基含水量对白灵菇菌丝生长的影响

参照1.2.1所示方法准备好不同含水量的培养基，每个处理4个重复，高压灭菌，接种，培养，记录菌丝的生长情况。

1.2.3 培养基酸碱度对白灵菇菌丝生长的影响

不同pH值的PDA培养基分装于18×180mm试管中，每个处理4个重复，在121℃下高压灭菌30min后，制作斜面培养基。配制木屑培养基时，先将过磷酸钙或石灰、葡萄糖和石膏加入水中制成混悬液，再与其它干料混合物充分混合均匀，配制成不同酸碱度的培养基，然后参照1.2.1所示方法对培养基进行高压灭菌，接种，培养，记录菌丝的生长情况。

1.2.4 光照对白灵菇菌丝生长的影响

先配制平板的固体培养基，将白灵菇菌种接种于培养皿的中间位置，然后分成2组，每组4个重复，一组置于光照培养箱中培养（光照强度为2780 Lux），一组置于暗培养箱中培养，温度均为25℃。当菌落直径为2 cm以上时，参照1.2.1所示方法记录菌丝的生长情况。

2 结果与分析

2.1 培养基配方对白灵菇菌丝生长的影响

从图1可以看出：在不同配方培养基中，白灵菇菌丝生长速度的差异达极显著水平，其中：以木屑、棉子壳和麦皮为主料的培养基（9号配方）中，白灵菇菌丝的生长速度最快；以棉子壳、稻草粉和玉米粉为主料的培养基（7号配方）中，菌丝的生长速度最慢。

2.2 培养基含水量对白灵菇菌丝生长的影响

从图2可以看出：白灵菇菌丝在麦皮培养基中的生长速度均比稻草粉培养基中的生长速度快。白灵菇菌丝在2类培养基中的生长速度对于培养基含水量变化的响应基本一致，即随着培养基含水量的增加，菌丝的生长速度呈加快的趋势。

2.3 培养基酸碱度对白灵菇菌丝生长的影响

2.3.1 斜面培养基pH值对菌丝生长的影响

从图3可以看出：斜面培养基的pH值为4～8时，菌丝生长速度差异显著，随着pH值的上升，菌丝生长速度显著上升。当斜面培养基的pH值为9～11时，菌丝的生长速度没有显著性差异，且生长良好。

2.3.2 在麦皮草粉培养基中添加酸性或碱性辅料对白灵菇菌丝生长的影响

从图4可以看出：在木屑麦皮（或稻草粉）培养基中添加1%～5%的过磷酸钙均抑制了白灵菇菌丝的生长，而在木屑麦皮（或稻草粉）培养基中添加1%～5%的石灰均可促进白灵菇菌丝的生长。

2.4 光照对白灵菇菌丝生长的影响

从图5可以看出：在光照和黑暗条件下培养，白灵菇菌丝生长速度的差异达到极显著水平，在黑暗条件下培养可以显著促进白灵菇菌丝的生长。

3 结论与讨论

本研究结果表明：白灵菇菌株Pl.n0006在添加麦皮或稻草粉的木屑培养基中都能较好地生长；在培养基中添加1%～5%的石灰可促进菌丝的生长，而添加1%～5%的过磷酸钙反而会抑制菌丝生长，菌丝生长适宜的PDA培养基pH为8～11；在黑暗条件下培养，菌丝的生长速度显著比光照条件下快。

长期以来白灵菇栽培的主料为棉籽壳，其价格已经日益上涨[8]。马瑞霞[9]研究表明，用棉籽壳作为主要原料培养出的菌丝长势强，出菇快，且子实体大、菌肉厚，产量高，这是因为棉籽壳颗粒大、结构疏松、透气性好、营养丰富，营养物质易被白灵菇吸收利用。因此，本研究将麦皮或稻草粉与棉籽壳混合作为培养基主料，不影响白灵菇的菌丝生长，降低其栽培成本，并使稻草等废弃物得到有效利用。

从本研究结果可以看出，光照对白灵菇菌丝的生长有显著影响，这与王文治等[10]的研究结果一致。因此，为了更好地让白灵菇菌丝生长，应在暗处培养白灵菇，而到了菇蕾分化阶段则需要一定的散射光。

[1] 陈文良.白灵菇的营养价值和开发前景[J].食用菌，1999，(4)：40.

[2] 惠恩举.白灵菇发展前景看好[J].特种经济动植物，2002，(11)：38.

[3] 盛伟，方晓阳，吴萍.白灵菇、杏鲍菇、阿魏菇多糖体外抗氧化活性研究[J].食品工业科技，2008，(5)：29.

[4] 胡清秀，邓华平.白灵侧耳栽培技术研究[J].食用菌学报，2001，8(4)：38 -42.

[5] 王桂芹，穆宝汉.白灵菇培养基筛选试验[J].中国林副特产，2006，(6)：10-12.

[6] 张浩洋，李冬，葛芳，等.白灵菇人工试栽技术[J].防护林科技，2010，(4)：121-122.

[7] 张瑞颖，胡清秀，左雪梅，等.白灵菇栽培经验及问题分析[J].中国食用菌，2010，29(2)：63-65.

[8] 吴郑武，胡清秀，夏志兰，等.白灵菇新型栽培基质配方研究[J].中国农学通报，2012，28(04)：245-249.

[9] 马瑞霞.不同配方培养料对白灵菇生长发育和产量的影响[J].食用菌学报，2007，14(3)：73-76.

[10] 王文治，王永左，蔡玉侠.白灵菇生物学特性及高产栽培技术[J].天津农学院学报，2002，9(2)：61-62.

10.3969/j.issn.1007-550X.2016.12.001

S646.9

A

1007-550X（2016）12-0038-04

2016-8-25

王丽星（1992—），女，硕士研究生，研究方向：食品生物技术。

黄志伟（1978—），男，博士，讲师，研究方向：食品生物技术。Email：972842976@qq.com