一次染色清染色法与液基细胞巴氏染色在宫颈病变检测中的比较研究

杜洪　马桂　王晓银　叶娟珍　金明丽

一次染色清染色法与液基细胞巴氏染色在宫颈病变检测中的比较研究

杜洪马桂王晓银叶娟珍金明丽

目的：通过比较一次染色清染色法和液基细胞巴氏染色的特点，探讨一次染色清染色法在宫颈病变应用中的价值。方法：对从2013年1月至2014年1月白银市第二人民医院及甘肃省肿瘤医院门诊体检和宫颈癌筛查的3000例患者中随机抽取568例。每人取2张涂片，编号分别为A组和B组，A组进行一次染色清染色液染色，B组进行液基细胞巴氏染色，比较两种方法在宫颈致病微生物学检测及宫颈鳞状上皮病变检测中的诊断结果。结果：568例标本进行统计学分析，两种染色方法对癌细胞，核异质细胞检出效果均较好（χ2=0.010，P＞0.05），而且一次染色清染色法对宫颈致病微生物的阳性检出率较高（χ2=47.072，P＜0.01）。结论：一次染色清染色液可一次染出核异质细胞、癌细胞，与液基巴氏染色结果基本一致；但一次染色清染色法对宫颈涂片的致病微生物阳性检出率较高，微生物形态清晰。一次染色清染色法操作简便，染色效果好，值得临床推广使用。

一次染色清染色液；液基细胞巴氏染色；宫颈病变；微生物；诊断

1　资料与方法

1.1一般资料从我院和白银市第二人民医院病理科2013年1月至2014年1月门诊体检和宫颈癌筛查的3000例患者中随机抽取568例。每人取2张涂片，编号分别为A组和B组，A组进入一次染色清染色液染色，B组进入液基细胞巴氏染色。

1.2试剂与仪器脱落细胞一次染色清染色液（专利号ZI200610104561，白银科微生物技术开发公司提供），传统的巴氏染色液，显微镜（日本奥林巴斯）。

1.3染色方法

1.3.1液基细胞巴氏染色检查。暴露宫颈，用无菌干棉球轻轻擦去宫颈表面和穹窿部的粘液及分泌物，将宫颈刷伸于宫颈管内达宫颈外口，将采样刷顺时针方向旋转4～5圈并稍停2～3s收集宫颈外口和宫颈管内的脱落细胞，将宫颈刷放于备有Thinprep保存液的洗脱管中送检，采用离心沉淀技术最终制成直径为2cm的均匀薄层细胞涂片［4］，然后用95%乙醇固定，经过固定、加水、染核、脱水、染浆、脱水透明、封片、镜检，约

1.5～2小时。

1.3.2一次染色清染色法。暴露宫颈，用无菌干棉球轻轻擦去宫颈表面和穹窿部的粘液及分泌物，将宫颈刮板插入子宫颈管内，以宫颈外口鳞柱状上皮交界处为圆心用刮板轻刮一圈，取后均匀涂于玻片上，待其自然干燥，轻滴染液4～5滴，3～5min后流水冲洗，湿片镜检。

1.4统计学处理采用SPSS17.0统计软件，率的比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两种方法在致病微生物检测中的结果比较568例标本进行分类统计，致病微生物检测宫颈液基细胞巴氏染色阳性细胞数363例，一次染色清染液阳性细胞数473例。一次染色清染色法检测宫颈致病微生物阳性数多于宫颈液基细胞巴氏染色法，两组数据经统计学处理差异有统计学意义（χ2=47.072，P=0.000）。见表1。

表1　两种检查方法在宫颈致病微生物检测中的阳性结果（例）

2.2两种方法在宫颈鳞状上皮病变检测中的结果比较一次染色清染色液检测568例，检出阳性涂片54例（19.0%），液基细胞巴氏染色检出阳性涂片55例（19.3%）；两种方法检阳性检出率比较（（χ2=0.010，P= 0.920））。见表2。

表2　两种检查方法在宫颈鳞状上皮病变检测中阳性例数（例）

3　讨论

3.1一次染色清染色法一次染色清染色法操作简便，染色只需3～5min，流水冲洗，湿片镜检，即刻发报告，克服了其他方法的不足。不仅适合大医院，更适合基层医院开展细胞学防癌筛查工作的应用［5］。

3.2一次染色清染色法与液基细胞巴氏染色法的比较液基细胞巴氏染色技术是目前宫颈病变，宫颈癌筛查的首选检查方法，其过程程序较复杂，耗时多（一个小标本的处理时间在15min左右），再通过传统的巴氏染色耗时1.5～2h。尤其在基层医院因为细胞学的工作量太小，花大价钱买设备去做这样工作是受一定限制的，除了引进机器外，还要培训病理细胞医生和临床妇科医生，还要投入大量的资金和人力，面临病例量的短缺和投入人力去组织工作量［6］。所以，此项技术在基层医院开展有一定的局限性。本研究用两种染色方法检测568例患者的结果显示，在细胞学方面，一次染色清染色液可一次染出核异质细胞，癌细胞。宫颈脱落细胞核呈天蓝色，胞浆呈鲜亮的粉红色，呈现红蓝分明，鲜艳亮丽核浆比明显，共检出54例阳性病例；对宫颈及宫颈上皮内病变的检查结果较好。在微生物方面，虽然宫颈细胞学检测感染性微生物并不是其主要目的，但也是其筛查中的重要内容；如霉菌性阴道炎是常见的妇科感染性疾病［7］，易反复发作，久治不愈，严重影响妇女身心健康。在传统巴氏染色中霉菌呈现隐约的嗜伊红色到灰棕色，较难辨别；一次染色清染色液可使霉菌孢子呈深蓝色［8］，霉菌菌丝染成深蓝色或紫红色；滴虫性阴道炎也是妇科的一种常见病，有很多见有滴虫的涂片中，背景脏乱，核周“晕”，这些改变具有提示和旁证作用；液基薄层细胞技术采用离心［6］、沉淀、分离技术，使涂片变的“干净”并不利于滴虫的检出。再者球杆菌覆盖细胞并伴有炎细胞，在液基涂片背景“干净”，一次染色液涂片中的球杆菌不但覆盖表层鳞状细胞而且在细胞外也可分布［6］。568例患者中有205例为细菌性阴道炎病原体感染，加德纳菌呈淡绿色，像撒落的“胡椒粉末”，双球菌呈深蓝或紫红色。

3.3一次染色清染色法的临床意义在我国，文化程度低、保健意识不强、经济条件差的农村妇女是“两癌”的高发人群，也是重点干预对象［9］。有调查表明：宫颈浸润癌5年的生存率只有67%、宫颈早期浸润癌的生存率达90%，而宫颈原位癌的生存率几乎为100%；宫颈癌早期多无任何症状。但宫颈癌的发生也是一个循序渐进的过程，从CIN、原位癌、早期浸润癌、是一个较为漫长的过程，潜伏期长达10年左右［10］，所以早期筛查是防治宫颈癌的关键。近年来，液基薄层细胞技术，对宫颈癌的防治做出了重要的贡献，也是目前宫颈病变，宫颈癌筛查的首选检查方法；但是由于耗材贵、耗时多，在基层医院开展有很大的局限性。政府虽然已在开展宫颈癌筛查，但受经费和技术条件限制，每年受益人群有限，相对于育龄妇女的庞大基数而言可谓杯水车薪。针对中国农村育龄妇女人数多、知识不足的实际，亟待加大宫颈癌预防知识宣传力度。一次性染色清染液操作简单、成本低、易学、几滴染液、一台显微镜，便可做检查，大大提高了宫颈癌筛查在基层医院的可行性。

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［2］王永才.最新脱落细胞病理诊断学媒体图谱［M］.北京:人民军医出版社，2006:3-4，205-216，413-433.

［3］王晓银，朱峰，王金穗，等.一次染色清染色法与液基细胞学检测的比较研究［J］.国际检验医学杂志，2012，33（2）:212-213.

［4］周丽红.宫颈液基细胞学检查与巴氏涂片在宫颈癌早期筛查对比分析［J］.中外医疗，2013，（1）:97-99.

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［6］马博文.子宫颈细胞病理学诊断图谱［M］.北京:人民军医出版社，2008:66.

［7］曹跃华.细胞病理学诊断图谱及实验技术［M］.北京:科学技术出版社，2009:14-18.

［8］鲁萍，白直成.在宫颈液基细胞学中检测念珠菌的染色方法比较［J］.中国现代医生，2011，49（30）:64-65.

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Comparative study between disposable staining agent method and pap staining of liquid based cells in the diagnosing cervical lesion

Du Hong1，Ma Gui1，Wang Xiaoyin2，Ye Juanzhen3，Jin Mingli4.1.Department of Pathology，Cancer Hospital of Gansu Province，Lanzhou 730050，China；2.Department of Pathology，the Second People's Hospital of Baiyin City，Baiyin 730900，China；3.Department of Cardiology，the Baiyin Branch in Traditional Chinese Medicine Hospital of Gansu Province，Baiyin 730900，China；4.the Service Station of Population and Family Planning in Baiyin district of Baiyin City，Baiyin 730900，China

Ma Gui，E-mail:majia.jia123@163.com

Objective:Through comparation of a disposable staining agent method and pap staining of liquid based cells in the detecting cervical lesion，to explore the applied values of disposable staining agent method in the detecting cervical lesion.Methods:3000 cases from Jan 2013 to Jan 2014 in physical examination in outpatient clinic and cervical cancer screening of the second people's hospital of Baiyin city and cancer hospital of Gansu province，were randomly collected 568 cases.Of 568 cases，each got 2 piece smears respectively in group A and group B in which group A was given disposable staining agent method and group B was given pap staining of liquid based cells. Diagnostic results of pathogenic microbiology and cervical squamous intraepithelial lesions were compared in two methods.Results:Of 568 cases，two dyeing methods for cancer cells and nuclear quality effect were same good（χ2=0.010，P＞0.05），but the positive rate of microbial detection in the disposable staining agent method was high quality than that of pap staining of liquid based cells（χ2=47.072，P＜0.01）.Conclusions:The disposable staining agent method can dyed a nuclear heterogeneous cells，cancer cells which is good as pap staining of liquid based cells method.The disposable staining agent method is easy，good dyeing effect which has high positive rate of microbial detection，and clear microbial morphology.

disposable staining agent method；pap staining of liquid based cells；cervical lesion；microorganism；diagnosis液基薄层技术是目前宫颈病变、宫颈癌筛查首选的检查方法［1］，但是液基薄层技术巴氏染色需要20多个步骤，耗时1.5～2h［2］、耗材贵、同时对微生物的染色效果不及一次染色清染色法。一次染色清染色法染色时间仅用3～5min［3］，流水冲洗，湿片镜检，效果良好。本文就两种检测结果报告如下。

A

1004-2725（2016）02-0093-03

730050甘肃 兰州，甘肃省肿瘤医院病理科（杜洪、马桂）；730900甘肃 白银，白银市第二人民医院病理科（王晓银）；730900甘肃 白银，甘肃省中医院白银分院心内科（叶娟珍）；730900甘肃 白银，白银市白银区人口和计划生育服务站（金明丽）

马桂，E-mail：majia.jia123@163.com