猪瘟活疫苗、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗最佳免疫程序确定试验

魏　军，程万辉，孙容非，王建明，李红艳（甘肃省庄浪县畜牧兽医局，744699）

猪瘟活疫苗、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗最佳免疫程序确定试验

魏军，程万辉，孙容非，王建明，李红艳
（甘肃省庄浪县畜牧兽医局，744699）

猪瘟（CSF）、猪口蹄疫（FM D）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是目前危害养猪生产的主要传染病，属于国家强制免疫动物疫病。我县对以上三种疫病预防主要采用分期免疫法，除增加了防疫人员工作量，浪费人力、物力外，免疫效果也不确定，如何制定合理的免疫程序，提高免疫效果，减少工作量，节省人力、物力，成为目前畜牧技术部门急需解决的实际问题。2011年设立并完成的《猪瘟等四种政府采购动物常规防疫专用疫苗免疫抗体效价测定试验》表明猪瘟、猪O型口蹄疫两种疫苗双侧注射具有协同效应，2012——2014年设立并完成的《猪瘟、猪O型口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征三种疫苗同时免疫抗体效价测定试验》表明猪瘟、猪O型口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征三种疫苗同时免疫，猪繁殖与呼吸综合征疫苗不论采用灭活疫苗还是活疫苗，猪瘟疫苗不论采用肌注还是皮下注射，疫苗免疫合格率不能全部达到农业部规定免疫合格率标准（≥70%），三种疫苗不能同时免疫。设立本试验，旨在确定猪瘟活疫苗、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗最佳免疫程序，为提高免疫抗体水平，确保三种疫苗免疫均达农业部规定免疫合格率标准和无设防动物疫病发生提供科学依据。

1　试验材料

1.1疫苗 猪瘟活疫苗（细胞源）（批号：1507045A，规格：20头份/瓶，厂家：成都天邦生物制品有限公司），猪疫苗专用稀释液（批号：1503061，规格：20m l/瓶，厂家：普莱柯生物工程股份有限公司），猪O型口蹄疫灭活疫苗（批号：H 150417J，规格：100m l/瓶，厂家：中农威特生物科技股份有限公司），猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗（NVDC-JXAI株）（批号：1505002，规格：20m l/瓶，厂家：中牧实业有限公司成都药械厂），系政府采购动物防疫常用疫苗，由庄浪县疫控中心提供。

1.2试验动物选柳梁乡唐拴德猪场品种相同、出生日龄相差不超过5天、出生重基本均匀的健康仔猪10窝共92头，试验前（50日龄内）未使用CSF、FM D、PRRS疫苗免疫，隔离饲养。

1.3试剂 猪瘟正向间接血凝抗体检测试剂盒（批号：20150916201，有效期：20151213，厂家：中国农业科学院兰州兽医研究所），猪口蹄疫正向间接血凝抗体检测试剂盒（批号：20150916201，有效期：20151215，厂家：中国农业科学院兰州兽医研究所），猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒（批号：150302，有效期：160101，厂家：武汉科前动物生物有限公司），由庄浪县畜牧兽医局购买。

1.4试验器械及消毒用品75%酒精、碘酊、注射器、针头、脱脂棉、采血器、耳标、耳标钳、捕猪器等由柳梁乡畜牧工作站准备。

2　试验方法

2.1基础抗体效价测定饲养至50日龄，对试验猪按10%比例采血分离血清，测定基础抗体效价，CSF、FM D采用IH A法，PRRS采用ELISA法（基础抗体效价记录见附表1）。

附表1　基础抗体效价检测统计表

2.2免疫方法CSF、FM D基础抗体效价经测定均＜1l og2，PRRS检测均为阴性时，选试验猪84头，随机分为6组，每组14头，第1-3组为试验组，4-6组为对照组，试验1组第1d颈部双侧注射规定剂量的猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗，第7d颈部分点肌注规定剂量的猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗；试验2组第1d颈部双侧肌注规定剂量的猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗，第14d颈部分点注射规定剂量的猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗；试验3组第1d颈部双侧注射规定剂量的猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄灭活疫苗，第21d颈部分点注射规定剂量的猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗，4-6组第1d分别注射规定剂量的猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗，注射后临床观察3～5d，作好记录。

附表2　免疫抗体效价检测统计

2.3免疫抗体效价测定对试验猪分别于最后一次注射疫苗免疫28d采血测定免疫抗体效价，并做详细记录（免疫抗体效价记录见附表2），检测方法同2.1。

3　试验结果

3.1试验1组猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫合格率分别为100%、14.3%、42.9%，猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫合格率均未达农业部规定免疫合格率标准；

3.2试验2组猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫合格率分别为100%、57.1%、57.1%，猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫合格率均未达农业部规定免疫合格率标准；

3.3试验3组猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫合格率分别为100%、85.7%、85.7%，三种疫苗免疫合格率均达农业部规定免疫合格率标准；

3.4猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗对照组免疫合格率分别为92.9%、78.6%、85.7%，免疫合格率均达农业部规定免疫合格率标准。

4　分析讨论

4.1试验结果表明：第1d颈部双侧肌注规定剂量猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗，第21d颈部分点肌注规定剂量的猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗，三种疫苗免疫合格率均高于农业部要求免疫合格率标准，为此，上述程序为注射规定剂量的猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗、高致病性猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗达到农业部规定免疫合格率标准的最佳免疫程序。

4.2因不同疫苗免疫相互影响因素主要取决于疫苗相互组合和注射间隔时间的长短，本次最佳免疫程序确定试验只选用了育肥猪做试验样本。4.3猪繁殖与呼吸综合征活疫苗目前临床应用安全性较差，不宜用于无发病史的规模猪场和怀孕母猪，故本次未设试验。

4.4猪瘟活疫苗（脾淋源）与猪瘟活疫苗（细胞源）性能和免疫抗体效价一致，本次未做单项试验。

4.5通过试验数据分析，猪瘟活疫苗（细胞源）、猪O型口蹄疫灭活疫苗、猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫，猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫间隔时间越短，猪O型口蹄疫灭活疫苗与猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫合格率越低，而对猪瘟活疫苗（细胞源）免疫合格率影响不大，为此，猪瘟活疫苗（细胞源）和猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗能否同时免疫后再进行猪O型口蹄疫灭活疫苗免疫，有待今后进一步探讨。

S858.28文献标识码：B

1003-8655（2016）03-0008-02