玄龙止咳方中药物配伍对麻黄有效成分影响的研究

曹蕾，王协和，杨红梅，张婧，宋英

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玄龙止咳方中药物配伍对麻黄有效成分影响的研究

曹蕾1，王协和1，杨红梅1，张婧1，宋英2

目的：考察玄龙止咳方中其它药物对麻黄中麻黄碱和伪麻黄碱含量的影响。方法：色谱条件为Wondasil-C18色谱柱（250 mm x 4.6 mm，5 µm）；流动相：以0.1％的磷酸（含0.1％的三乙胺）为流动相A，甲醇为流动相B；柱温30 ℃；流速：1.0 mL·min-1；进样体积：10μL，检测波长210 nm。结果：与麻黄单煎液的滤液相比，五味子能促使麻黄碱的含量升高，升高率达39.98％；僵蚕和百部都能使麻黄碱和伪麻黄碱含量降低，约降低10％。结论：麻黄与其他药物配伍时，麻黄碱和伪麻黄碱容易受到影响，含量或升高或降低。故而在麻黄提取时，配伍应当得到重视，同时为玄龙止咳方的制备方法提供依据。

玄龙止咳方；麻黄碱；伪麻黄碱；配伍实验

玄龙止咳方是成都中医药大学附属医院的一个临床常用方剂，由玄参、麻黄、地龙、僵蚕、百部、紫菀等药味组成，具有滋阴宣肺，祛风止咳之功效，治疗中最具特色之处是内外风兼治，滋阴祛风兼顾，疗效显著。为了适应临床需要，拟将其开发为院内制剂。其中麻黄为方中臣药，味辛性温，为“肺经主药”，“发表出汗，去邪热气，止咳逆上气”，蜜制则增润肺之功，尤适于肺燥失宣所致喘咳之症。其止咳平喘主要有效成分为麻黄碱、伪麻黄碱［1］。有报道麻黄与其他药物配伍发生配伍反应使其有效成分含量降低［2］，为了保障制剂的质量，故而考察处方配伍对其臣药麻黄中有效成分的影响。

1 实验材料

Agilent 1100 高效液相色谱仪（美国惠普公司） 、BP211D型电子分析天平（德国塞多利公司）、水浴锅DK-98-Ⅱ（天津市泰斯特仪器有限公司；盐酸麻黄碱（批号：171241-201007）、盐酸伪麻黄碱（批号：171237-201208）均购于中国食品药品检定研究院；甲醇、乙腈为色谱纯；其他试剂为分析纯； 玄参、麻黄等9味药材均购于新荷花饮片有限公司，经成都中医药大学附属医院药剂科副主任药师盛蓉鉴定，均符合2010版《中华人民共和国药典》一部及地方标准的规定。

2 方法与结果

2.1麻黄与其他药味的配伍试验

2.1.1麻黄单煎液制备 取麻黄20 g，加10倍量水，煎煮两次，每次1 h，合并两次滤液浓缩至200 mL。

2.1.2配伍试验 麻黄-玄参配伍 按处方比例称取二倍处方量麻黄和玄参（麻黄20 g），加10倍量水煎煮2次，每次1 h，合并两次滤液，浓缩到200 mL，即得麻黄玄参配伍样品溶液。

麻黄与其它药材的配伍 按处方比例称取二倍处方量的麻黄和地龙、麻黄和僵蚕、麻黄和百部、麻黄和紫菀、麻黄和麦冬、麻黄和五味子、麻黄和防风（麻黄均为20 g），各自加10倍量水，其余步骤同麻黄-玄参配伍。

2.2麻黄中有效成分的测定

2.2.1色谱条件［3-5］Wondasil-C18色谱柱（250 mm ×4.6 mm，5 um）；流动相：以0.1％的磷酸（含0.1％的三乙胺）为流动相A，甲醇为流动相B（A∶B=96∶4）；柱温30 ℃；流速：1.0 mL·min-1；进样体积：10 μL，检测波长210 nm。

2.2.2对照品溶液的制备 分别精密称定盐酸麻黄碱4.11 mg、盐酸伪麻黄碱4.59 mg于25 mL的容量瓶中，加甲醇定容到刻度制成质量浓度为0.1644 mg·mL-1、0.1836 mg·mL-1的混合溶液，作为对照品，备用。

2.2.3线性关系考察 精密吸取“2.2.2”项下对照品溶液，1，2，3，4，10 mL分别于10mL容量瓶中，分别标号1，2，3，4，5号对照品溶液，用甲醇稀释至刻度，超声后过滤，按“2.1.2”色谱条件进样。以进样量浓度为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，进行线性回归，得回归方程。盐酸麻黄碱回归方程为：Y =28078X +12.796 （r =1.0）、盐酸伪麻黄碱的回归方程为：Y =28295X -5.6160（r =0.9999） 。结果表明：盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱分别在0.1644 μg～1.644 μg，0.1836 μg～1.8136 μg范围内线性关系良好。

2.2.4供试品溶液的制备 取“2.1”项下样品溶液5 mL定容至10”ml容量瓶中，加1％盐酸甲醇定容至刻度 ，摇匀，滤过，即得。按“2.2.1”项下色谱条件测定，结果见表1（含量变化以麻黄单煎液为参考）。

编号配伍组合盐酸麻黄碱/mg含量变化/％含量变化/％盐酸伪麻黄碱/mg 1麻黄—玄参0.71666.552.02133.04 2麻黄—地龙0.68692.141.9530-0.44

3麻黄—僵蚕0.6075-9.671.7642-10.07 4麻黄—五味子0.941439.981.97580.72 5麻黄—防风0.67570.481.96910.38 6麻黄—百部0.6045-10.111.7195-12.34 7麻黄—紫菀0.67810.831.9596-0.10 8麻黄—麦冬0.6621-1.551.96940.40 9麻黄单煎液0.67250.001.96160.00

由表1可知，玄龙止咳方中僵蚕和百部对盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的影响比较显著，其中僵蚕和百部都能使盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱降低10％左右。而方中五味子，能显著增加盐酸麻黄碱的含量，玄参对其也有增强作用，但是效果不显著。

2.3配伍验证试验

按处方比例称取麻黄和僵蚕、麻黄和百部、麻黄和五味子（分别含麻黄20 g）三种配伍各三份分别煎煮2次，每次加10倍量水煎煮1 h，滤液合并，浓缩至200 mL。取5 mL按供试品溶液制备方法制备，“2.2.1”项下色谱条件测定，结果麻黄僵蚕合煎液中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量均值分别为0.6059 mg，1.7653 mg，RSD值分别为1.94％，1.77％，麻黄百部合煎液中二者含量均值分别为0.6057 mg，1.7177mg，RSD值分别为2.13％，1，79％，麻黄五味子合煎液中为0.9397，1.9745 mg，RSD值分别为1.31％，1.58％。

3 讨论

麻黄碱和伪麻黄碱均为苯丙胺类生物碱［6］，二者的碱性比较强，故而能使溶液pH变化比较大的药物或许对其提取影响比较大。测得麻黄-五味子合煎液的pH为2.78，故而能促使其溶出，但是五味子仅能显著增加盐酸麻黄碱的含量，而对盐酸伪麻黄碱的含量无明显影响，有可能是五味子与麻黄中其它成分反应转化为麻黄碱，也有可能是因为麻黄碱和伪麻黄碱构型不同，五味子中的有机酸［7］更容易与麻黄碱结合生成可溶性的盐。麻黄和其他药材合煎液的pH多在5.0左右，而和地龙的合煎液碱性稍强一些，为6.54，但是实验结果表明其对盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄的含量影响基本不大。而且在麻黄地龙煎煮的过程中出现大量灰色絮状沉淀，但是随着进一步加热之后，絮状沉淀消失，转为黑色小固体，推断有可能一开始的絮状沉淀是地龙中的蛋白质［8］类成分与麻黄混合时产生的包裹作用，随着水浴加热，蛋白质被破坏包裹物也被释放出来。

僵蚕和百部都能明显降低麻黄碱和伪麻黄碱的含量。僵蚕与麻黄合煎时并没有产生沉淀，液体呈混浊状（药液不澄清，不透明，但是没有颗粒状沉淀），冰箱冷藏之后仍然为混浊状，没有产生沉淀。所以猜想有可能是僵蚕中一些小分子酸性氨基酸如谷氨酸［8］等，与麻黄碱和伪麻黄碱反应生成了不溶于水，而又能稳定分散的小分子物质。百部与麻黄配伍中产生了黑色沉淀，有可能是百部中某些酸类如草酸、柠檬酸［9］，与麻黄碱和伪麻黄碱生成了不溶于水的盐所致。

［1］ 李佳莲，方磊，张永清，等.麻黄的化学成分和药理活性的研究进展［J］.中国现代中药，2012，14（7）：21.

［2］ 戴国友，谢和兵，刘志辉，等.肺宁合剂提取工艺中甘草和麻黄的配伍规律研究［J］.中国药业，2008，17（22）：21.

［3］ 叶莎，李兴华，任欣欣.HPLC法测定复脉灵胶囊中盐酸麻黄碱及盐酸伪麻黄碱含量［J］.中国药师，2013，16（6）：841.

［4］ 吴曼.HPLC法测定咳喘平合剂中盐酸麻黄碱、伪麻黄碱的含量［J］.海峡药学，2012，24（4）：48.

［5］ 陆燕萍，刘佳丽，巩晓宇.麻黄药理作用及含量测定的研究进展［J］.中国医药导报，2013，10（24）：38.

［6］ 周玲，吴德康，唐于平，等.麻黄中化学成分研究进展［J］.南京中医药大学学报，2008，4（1）：71.

［7］ 罗家洪，庄艳.五味子化学成分及生理活性研究进展［J］.临床合理用药，2014，8（9）：174.

［8］ 赵建国，彭延古，彭新君，等.薄层色谱法分离僵蚕中蛋白质和氨基酸类成分的研究［J］.湖南中医学院学报，2005，25（2）：26.

［9］ 钟英.对叶百部化学成分及质量研究［D］.广州：广州中医药大学，2010.

（责任编辑：李芸霞）

Study on effects of compatibility of medicines on active ingredients of Mahuang in XuanLong Zhike Fang /

CAO Lei1，WANG Xie-he1，YANG Hong-mei1， ZHANG Jing1， SONG Yng2//（1.College of pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine ，Chengdu 611137， Sichuan； 2.Teaching Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Chengdu 610072， Sichuan）

Objective: To investigate the influence of other drugs in XuanLong Zhike Fang on the contents of ephedrine and pseudoephedrine in Mahuang. Method: HPLC conditions were as following： Wondasil-C18column （250 x 4.6 mm， 5 um）was used. Mobile phase was methanol - 0.1％ phosphate （including 0.1％ of triethylamine）. Flow rate was 1.0 mL·min-1. Column temperature was set at 30 ℃ with injection volume 10 μL and detection wavelength was 210 nm. Result: Compared with single Mahuang decoction， Wuweizi can increase ephedrine content with the rate of 39.98％. Jiangchan and Baibu can decrease the content of ephedrine and pseudoephedrine about 10％. Conclusion: The compatibility of Mahuang and other drugs will influence the contents of ephedrine and pseudoephedrine content. Therefore， the effect of compatibility should be paid attention to in the extraction of Mahuang. And The result can provide the basis for preparation of XuanLong Zhike Fang .

XuanLong Zhike Fang；ephedrine；pseudoephedrine；compatibility test

R 284.1

A

1674-926X（2016）03-007-03

四川省科技厅项目（CKY2014007）

1.成都中医药大学药学院，四川 成都 611137；2.成都中医药大学附属医院，四川 成都 610072

曹蕾（1989），女，硕士，从事中药制剂研究Tel：1340859995 Email：1206490185@qq.com

宋英（1959），男，学士，从事中药学研究Tel：028-87783735 Email：806380106@qq.com

2015-09-01