ELISA方法检测 MP-IgM与冷凝集试验对小儿肺炎支原体感染诊断价值的比较

韩红星

（深圳市第三人民医院，广东　深圳　518112）

ELISA方法检测MP-IgM与冷凝集试验对小儿肺炎支原体感染诊断价值的比较

韩红星

（深圳市第三人民医院，广东深圳518112）

目的 通过ELISA法与冷凝集试验两种方法检测小儿肺炎支原体肺炎（MPP）患者的血清，分析两种检验方法在小儿肺炎支原体感染的诊断的价值。方法 选择本院儿科收治确诊的157例肺炎支原体感染患儿，分别采用血清ELISA和冷凝集两种检测方法，分析探讨两组阳性率。结果 ELISA法检测MP-IgM阳性有142例，阳性检出率为90.4%；冷凝集试验方法检测阳性为126例，阳性检出率为80.3%，各年龄段阳性检出率差异具有统计学意义，两种检测方法学差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 ELISA法与冷凝集试验相比，敏感性更高，具有良好的实验室诊断价值。

ELISA法； 冷凝集法； 肺炎支原体

肺炎支原体（mycoplasma pneumaniae，MP）是急性呼吸道感染、支气管炎、哮喘等的常见病原体之一，近年来呈明显上升的趋势［1-3］。任何年龄段均可以发生MP感染，多见于儿童和婴幼儿。值得注意的是，肺炎支原体肺炎（mycoplasma pneumaniae pneumania，MPP）与其他肺部感染的临床症状和特征较为相似，因此在临床上容易出现误诊或漏诊［5］。研究显示，MP主要通过气溶胶形式传播，大约每隔3年即出现局部地区大范围流行，其不仅能引起呼吸道疾病，还能引发其他系统多种并发症［6］。大多数情况下，仅仅依据临床症状难以与病毒、细菌及结核感染相互区别，因此医生需要通过临床检验分析，才能准确迅速的诊断MP感染，及时进行治疗，避免发生严重的并发症［7］。本次研究将对患儿血清进行ELISA法与冷凝集试验两种方法比较，探讨其在肺炎支原体感染的诊断过程中的价值。现将结果报道如下。

资料与方法

1 临床资料

选取本院儿科2014年3月至2015年3月收治确诊的201例MP感染患儿为研究对象。患儿年龄范围为1～12岁，根据已有的文献，将其分为1～2岁54例、3～5岁65例以及6～12岁以上82例，其中男性为100例，女性为101例［8］。所有患儿临床上均表现出有呼吸道感染的症状，包括持续发热并伴有刺激性咳嗽、呼吸困难、腹泻和食欲减退。患儿一般临床资料见表1。

DOI：10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.04.026

收稿日期：2015-10-11；修回日期：2015-11-15

作者简介：韩红星（1970—），男，本科，副主任技师。研究方向：临床免疫检验。Tel：18102786250；E-mall：lqlqianl1626@163.com

表1　患儿基本临床资料统计

2 方法

患者静脉血采集后3000 rpm离心15 min，分离获得血清标本，采用德国欧蒙EIISA试剂盒进行血清MP-IgM检测，操作方法严格按说明书进行。另外，通过日本富士肺炎支原体检测凝集试验试剂盒，按照《中华医学检验全书》中的要求标准化操作，当检测滴度大于1∶64时判定该标本为MP阳性［2］。

3 统计学分析

运用SPSS17.0进行数据统计，计数资料行χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1 两种MP检测方法阳性率对比

两种小儿MP检测结果显示，ELISA检测的MPIgM阳性有179例，冷凝集试验方法检测阳性为159例。经统计学分析，ELISA方法的阳性检出率高于冷凝集试验（P＜0.05）。结果见表2。

表　2 两种小儿　MP检测方法阳性率对比

2 两种MP检测方法阳性数对比

经统计发现，ELISA法和冷凝集法检测均为阳性的为150例；ELISA法阳性而冷凝集为阴性的有29例；ELISA法阴性冷凝集阳性的有9例；两种方法均为阴性的共有13例。经配对χ2检验分析，两种检测方法差异具有统计学意义（P＜0.05）。结果见表3。

表3　两种小儿　MP检测方法阳性数对比

讨 论

已有的临床调研显示，MP是引起小儿急性呼吸道感染的一种常见病原体。该病原体介于细菌和病毒之间，通过呼吸道传染，容易引起呼吸道感染、咽炎、支气管炎等疾病，对多系统器官造成损伤，严重者危及患者生命［9-11］。自MP被证实为小儿肺炎的病原体后，已逐渐受到人们的关注。目前，用于检测MP感染的实验诊断方法有培养、冷凝集试验、ELISA法、免疫荧光法和PCR法等。培养分离MP虽然对诊断和鉴别有决定性意义，但其检出时间较长（2～3周），实验操作繁琐，难度大以及试剂不能保存导致其不能作为临床快速诊断的方法，因而在临床上推广应用有困难；冷凝集试验为非特异性方法，操作简单易行，被视为诊断MP的传统方法；MP-IgM在发病7天左右出现，21～28天达到最高，随后开始下降。由于MP潜伏期为14～21天，因此当患者就诊时，大部分均已出现MP-IgM。由于其为MP感染早期出现的特异性抗体，因此检测MP-IgM对于早期诊断MP感染有重要意义，可明显缩短患儿MP感染病程；PCR通过检测MP的DNA水平，虽然检出率较高，检测快速，但其费用较高，需要具有PCR实验室已验收的医院才能开展，且检出假阳性率较高。因此临床上常采用血清学方法即ELISA法和冷凝集方法 ［12-14］。

本次研究对本院儿科接治的201例MP感染患儿，经ELISA和冷凝集试验进行检测后所得到的各年龄段患儿阳性标本数，统计得出ELISA法阳性检出率较冷凝集法高，其中1～2岁、3～5岁和6～12岁的小儿阳性率分别高了7.4%、10.8%和11.0%，表明各年龄段的MP患儿采用ELISA进行检测阳性率均高于冷凝集法。各年龄段的ELISA法和冷凝集法检测的阳性率差异不大，表明两种方法在不同年龄段患儿的检测上差异无统计学意义（P＞0.05）。

值得注意的是，两种检测方法均出现假阴性，分析原因，可能与中后期重症感染患儿不出现MP-IgM抗体以及免疫功能低下患儿仅产生少量血清抗体密切相关。所以，在临床诊断中，检验结果为阴性的要注意根据临床患儿症状、发病时间和用药状况进行再次诊断，从而确诊是否为MP患儿。

总结相关结果得出，ELISA法与冷凝集方法相比，敏感性更高。因此临床上可以考虑将其法用于初检筛选或者检测联用的方法进行推广。

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（李 凌编辑）

Comparison of ELISA and Cold Agglutination Test in Detection of Anti-MP-IgM in Children with Mycoplasma Pneumoniae Infection

HAN Hong-xing
（Shenzhen Third People’s Hospital，Shenzhen 518112，China）

Objective To evaluate value of ELISA and cold agglutination test（CAT）in detection of serum MPIgM in children with infection of mycoplasma pneumoniae.Methods A total of 157 children with infection of mycoplasma pneumoniae were involved in this study.The serum samples were collected and detected by ELISA and CAT.The positive rates of MP-IgM by two methods were analyzed in different ages of children.Results The number of positive anti-MP-IgM antibody samples was 142 and the positive rate was 90.4%with ELISA.On the other hand，the number with CAT detection was 126 and the positive rate was 80.3%.The positive rates of MPIgM in different ages of children were significant difference detected by two methods（P＜0.05）.Conclusion ELISA could have higher sensitivity than cold agglutination test in the detection of serum MP-IgM，and it might be more suitable for clinical application.

ELISA； Cold agglutination test； Mycoplasma pneumoniae