影响全自动血细胞分析仪BC-5380检测结果的原因分析

2016-09-14樊祖茜

国际检验医学杂志 2016年16期

关键词：白细胞外周血计数

樊祖茜，孙　雷，张　叶

(广西壮族自治区钦州市妇幼保健院　535099)

影响全自动血细胞分析仪BC-5380检测结果的原因分析

樊祖茜，孙雷，张叶

(广西壮族自治区钦州市妇幼保健院535099)

血细胞分析；BC-5380；影响因素

血常规是临床三大常规之一，在临床上有着重要的地位，对于疾病的诊断、治疗方案的制订以及疗效的判断都有很大帮助。本科室自2009年开始使用BC-5380全自动血细胞分析仪。BC-5380是采用半导体激光散射技术和细胞化学染色技术，配合改良的流式分析装置对白细胞进行精确的五分类分析，具有双通道白细胞五分类及异常细胞筛选功能，可提供27项参数、2个散点图、2个直方图以及异常报警等参数和信息。但是，在日常的工作中，血常规的检测结果可能会因为一些生理、病理或操作等方面的因素，直接或间接影响到结果的准确性。为了避免检测结果与临床不符的情况，现将多年临床工作中所了解到的影响BC-5380检测结果的因素总结如下。

1　白细胞计数及分类的影响因素

白细胞计数及分类采用的方法学是激光散射法和电阻抗法，影响其检测结果的因素有以下几个方面：

1.1生理因素白细胞计数存在着日间差异，一天之内白细胞数量最高值与最低值可相差一倍，午后较高，清晨较低[1]。

1.2静脉血与末梢血差异末梢血WBC计数结果稍高于静脉血[2]。

1.3有核红细胞的干扰有核红细胞是未成熟的红细胞，在健康人外周血中一般不会出现[3]。外周血中出现有核红细胞，可能与贫血、缺氧等情况有关，并有报道称有核红细胞数量可作为新生儿窒息、新生儿呼吸窘迫综合征的判断指标[4]。当外周血出现有核红细胞时，由于BC-5380方法学的缺陷，仪器会按照细胞体积的大小把有核红细胞误归入到白细胞总数内，造成白细胞总数的假性增高，甚至会高达(50～100)×109/L，分类中以淋巴细胞为主。遇到这种情况可进行外周血白细胞纠正，公式为：校正后白细胞数=100/(100+有核红细胞数)×校正前白细胞总数，公式中的有核红细胞数为分类100个白细胞时所遇到的有核红细胞总数。

1.4原始幼稚细胞当外周血出现原始幼稚细胞时，白细胞总数通常会异常增高，分类会出现“*”或者分类不准确，这时，需要用显微镜进行复检以估算白细胞总数，白细胞总数=一个高倍镜视野的白细胞平均个数×2×109/L[5]，并在油镜下分类200个白细胞，与仪器进行比较，给临床正确的提示。

2　血红蛋白的影响因素

血红蛋白检测用的是比浊法，利用浊度的改变来判断血红蛋白量的多少，因此，能引起血浆颜色改变的都会影响结果的准确性(比如脂血)。脂血标本血浆颜色呈乳白色或者浑浊状，需通过离心或者自然沉降后观察血浆颜色才可发现是否为脂血标本，但是，在日常工作中血常规标本量大，且检验结果回报时间(TAT)为30 min，检验人员没有足够的时间去处理每一个标本，但是可以通过红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)这个指标来判断。MCHC的正常范围是320 ～360 g/L，MCHC增高常见于遗传性球形红细胞增多症，但是一般不会超过380 g/L，当MCHC超过380 g/L时，可以离心观察标本是否有脂血的现象，如果有，可以采用生理盐水等比例置换血浆的方式，混匀后重新上机检测就可以去除脂血的干扰。只有合格的标本才可以反映患者的真实情况，因此在做血常规检查时要排除脂血的干扰。

3　血小板计数(PLT)的影响因素

血小板的检测采用的是电阻抗法，根据体积的大小来识别血小板，影响因素有以下几个方面：

3.1抽血因素的影响当抽血不顺，标本中出现凝块时，检测结果会出现三系减少，或者出现“*”，血小板直方图呈现尾部抬高(图1)，或横向波浪线的现象(图2)，此时可用竹签挑取或观察标本的流动性来判断是否有凝块，当标本有凝块时，凝块处往往颜色比较深，流动速度不均匀，呈区域性的流动，比较缓慢，此时只有重新采样复查才可以得到比较准确的结果。标本有凝块，也容易造成仪器管道阻塞，对后期的维护和保养造成很大的不便，因此建议上机前先观察标本是否有凝块。在日常工作中，有时候也会出现肉眼看不见的微小凝集，这种情况也会造成PLT的假性减低，而对白细胞、红细胞、血红蛋白影响不大，PLT减低的程度与凝集的程度及标本PLT的基础量有关。当初次检测PLT<100×109/L时，或者与临床疾病不符时，可以通过外周血涂片观察片尾或片中是否有血小板成群聚集现象(图3)，正常的血小板在EDTA-抗凝剂的作用下呈散在分布(图4)。遇到微小凝集的标本需重新采血复查，才可以得到准确的结果。

3.2乙二胺四乙酸二钾依赖性假性血小板减少症(EDTA-PTCP)EDTA-PTCP会造成PLT的假性减低，原因是用EDTA盐作为抗凝剂时，出现免疫介导的冷抗血小板自身抗体，这可能与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关[6]。这是一种体外现象，并非疾病，在健康人群和各种疾病患者中都可以发生，暂时或者长时间伴随都有可能。这种情况只能通过外周血涂片发现，在涂片中，血小板量不少，但是呈一小堆一小堆的聚集分布(图5)，或出现卫星现象，用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管重抽还是如此。对于EDTA-PTCP，目前国内还没有统一的方法，但可以通过以下方法进行纠正：(1)抽血后立即检测；(2)通过采集末梢血用仪器稀释模式立即检测；(3)更换抗凝剂，目前大多选用的是枸橼酸钠，但是也必须在短时间内检测完毕；(4)除此之外有文献报道，在EDTA抗凝血中加入氨基糖苷类抗生素、磷酸吡哆醛、氨茶碱等可能防止血小板凝集[7]。在用以上方法检测的同时必须用PLT手工计数进行比对。