拳参薄层色谱的鉴别研究

叶锦雄 李睿钧 黄伟佳 梁志锋

广州市东升医院，广东 广州 510140

拳参薄层色谱的鉴别研究

叶锦雄 李睿钧 黄伟佳 梁志锋

广州市东升医院，广东 广州 510140

目的：改进拳参的薄层色谱鉴别方法。方法：以拳参对照药材为对照，通过改变提取方法和展开剂系统，改进其薄层鉴别方法。结果：在薄层色谱中检出拳参的特征斑点，所建方法操作更加简单。结论：该方法专属性强，可用于拳参的质量控制。

拳参；薄层色谱法；鉴别

拳参为蓼科植物拳参 Polygonum bistorta L.的干燥根茎［1］，多生长在山坡草从阴湿处，产于华北、西北、河南、湖北、山东、江苏、浙江等地［2］，又名山虾子、倒根草、紫参、虾参、回头参、山柳柳等，具有清热解毒、消肿、止血的作用，用于赤痢、热泻、肺热咳嗽、痈肿、瘰疬、口舌生疮、吐血、衄血、痔疮出血、毒蛇咬伤。拳参含有黄酮、蒽醌、鞣质等化合物，具有一定的止血、抗菌和保护心脑血管的作用［3-5］。拳参中的没食子酸、儿茶素、表儿茶素等具有强抗氧化、抑制肿瘤生长和抗菌消毒等活性［6］；拳参水提取物能显著增强小鼠单核巨噬细胞吞噬能力，增强NK细胞的细胞毒作用，促进T淋巴细胞增殖，增加血清溶血素及血清 IL-2水平，具有增强正常小鼠的免疫功能作用［7］。药典［1］十六味冬青丸、八味檀香散、感冒退热颗粒等处方中均含拳参，但均未收录其薄层鉴别方法。为更好方便地对该药进行薄层色谱鉴别，对拳参的薄层色谱鉴别方法进行研究，现报告如下：

1 仪器与材料

KQ-1060型超声清洗仪；自制硅胶 G薄层板；Merck硅胶G薄层板；Apple 4s（薄层色谱拍照）；拳参药材 （产地：云南，批号：150101、150102、150201）；拳参对照药材 （批号：121569 -201301，中国药品生物制品检定所）；甲酸、甲苯、乙酸乙酯、甲醇等均为分析纯；水为灭菌注射用水。

2 方法

2.1 拳参的薄层鉴别

2.1.1 供试品溶液的制备 取本品0.5g，加水30mL，煎煮30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇15mL，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为供试品溶液。

2.1.2 对照品溶液的制备 取拳参对照药材0.5g，加水30mL，煎煮30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇15mL，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为对照药材溶液。

2.1.3 阴性对照液的制备 取甲醇10mL，超声处理15min，滤过，滤液作为阴性对照溶液。

2.1.4 定性鉴别 照薄层色谱法 （《中国药典》2015年版一部通则）方法试验，吸取上述三种溶液各 5μL、分别点于同一硅胶 G薄层板上，以甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸（5∶4∶1）为展开剂，展开，取出，待干后，喷以5%三氯化铁溶液，在日光下观察。供试品与对照药材色谱在相应的位置上显相同颜色斑点，阴性对照无相同颜色斑点。见图 1。

图1 拳参的薄层色谱图

2.2 拳参薄层色谱鉴别耐用性考察

2.2.1 不同薄层板的考察 取 Merck硅胶 G薄层板和自制硅胶 G薄层板，分别按上述薄层色谱鉴别方法进行试验。结果显示，自制硅胶 G薄层板及Merck硅胶 G薄层板所得的色谱图斑点清晰，阴性无干扰，均可达到鉴别要求。见图 2。

2.2.2 不同温度的考察 取已点样的Merck硅胶 G薄层板，分别置于温度为 5℃和 25℃的条件下按上述薄层色谱鉴别方法进行试验。结果显示，该方法在不同温度下适应性较好。见图 3。

图2 不同薄层板展开比较

图3 不同温度展开比较

2.2.3 不同湿度的考察 取已点样的 Merck硅胶G薄层板，分别置于湿度为 88%和 32%条件下按上述薄层色谱鉴别方法进行试验。结果显示，该方法在不同湿度下适应性较好。见图4。

3 讨论

研究分别用Merck硅胶G薄层板和自制硅胶 G对拳参进行实验，在 T=25℃和T=5℃、RH= 32%和RH=88%条件下展开，斑点清晰，色谱效果基本一致，均能达到鉴别要求，表明以上方法适用性良好，可用于拳参的鉴别。

拳参的薄层色谱鉴别按药典的方法展开条件为［1］：以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以二氯甲烷 -乙酸乙酯 -甲酸为展开剂，展开后，置氨蒸气中熏至斑点显色清晰。但氨气是有强烈刺激性臭味的无色气体，与酸反应产生热，有燃烧爆炸危险，有腐蚀作用，属于危险化学品［8］。改进其方法后，Rf值适中，展开完成后就有可用于鉴别的斑点，但颜色较浅，不利于观察；喷显色剂后，放置1周依然显色清晰，且阴性对照无干扰，故未对其他显色剂进行比较性研究。且实验所用试剂安全性均较高，斑点颜色清晰，专属性较强，容易观察，显色稳定可靠。

图2 不同薄层板展开比较

研究没对其他产地的拳参进行试验，但避免使用危害性较大的试剂，对斑点判断有明显改善，且处理方法较简单、快捷，专属性强，可用于拳参的鉴别，具有一定的实用价值。

［1］国家药典委员会.中国药典 （一部）［S］.北京：中国医药科技出版社，2015.

［2］江苏新医学院.中药大辞典 ［M］.上海：上海科学技术出版社，1977：1959.

［3］张齐雄，曹蓓.中药拳参生物活性研究进展 ［J］.亚太传统医药，2012，8（7）：195-196.

［4］黄志华，李良东，韩立民.拳参的心脑血管保护作用研究进展 ［J］.赣南医学院学报，2013，33（4）：625-627.

［5］曾靖，单热爱，钟声，等.拳参水提取物镇痛作用的实验观察 ［J］.中国临床康复，2005，9（6）：80-81.

［6］夏晶，夏斌峰，季申.反相高效液相色谱法测定拳参中儿茶素的含量［J］.中国中药杂志，2007，32（11）：1103-1104.

［7］李珂珂，栾希英，刘现兵.拳参水提物对小鼠免疫功能的影响 ［J］.中药材，2010，33（8）：1302-1306.

［8］刘钢，王昌荣.浅谈液氨泄漏的应急处置 ［J］.石油化工安全环保技术，2015，31（2）：50-56.

Study on Identification of Bistort Rhizome by TLC

YE Jinxiong LI Ruijun HUANG Weijia LIANG Zhifeng Guangzhou Dongsheng Hospital，Guangzhou 510140，China

Abstract：Objective To improve the TLC identification method of bistort rhizome.Method Through the improvement of extraction method and expansion system，the feasibility of experimental was evaluated by TLC based on bistort rhizome control.Result Bistort rhizome in TLC had characteristic spots and the method was simpler.Conclusion The result showed the TLC method was highly specific.It was capable to control the quality of bistort rhizome.
Key words：bistort rhizome；TLC；identification

R282.5

A

1007-8517（2016）13-0018-03

2016.0.00

）

叶锦雄，男，主管中药师，主要从事药物分析和临床药学。E-mail：yaehi@126.com