新生儿ABO溶血病与ABO血型的关系

徐 新，刘 琦，王 霞（南华大学附属第二医院：.输血科；.消化内科，湖南衡阳400）

新生儿ABO溶血病与ABO血型的关系

徐 新1，刘 琦2，王 霞1
（南华大学附属第二医院：1.输血科；2.消化内科，湖南衡阳421001）

目的 探讨新生儿ABO溶血病与新生儿ABO血型的关系。方法 选取该院2015年1月至2016年1月符合筛选标准的64例ABO新生儿溶血病筛查（包括直接抗人球蛋白试验，即Coombs试验、游离试验及放散试验）结果为阳性患儿作为研究对象，对其中A、B型患儿的患病情况进行比较分析。结果 64例新生儿ABO溶血病患儿中，A型Rh （D）患儿阳性率［60.9%（39/64）］显著高于B型Rh（D）阳性患儿［39.1%（25/64）］，差异有统计学意义（P＜0.05）。当Coombs试验阳性强度为1+时，A型患儿阳性率与B型患儿阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；当阳性强度为2+时，A型患儿阳性率［25.6%（10/39）］显著高于B型患儿［12.0%（3/25）］，差异有统计学意义（P＜0.05）。当游离试验阳性强度为1+时，A型患儿阳性率［25.6%（10/39）］低于B型患儿［44.0%（11/25）］；而当阳性强度为2+～3+时，A型患儿阳性率［61.5%（24/39）］高于B型患儿［32.0%（8/25）］，差异均有统计学意义（P＜0.05）。当放散试验阳性强度为1+时，A型患儿阳性率［17.9%（7/39）］显著低于B型患儿［48.0%（12/25）］；而当阳性强度为3+～4+时，A型患儿阳性率［41.0%（16/39）］高于B型患儿［16.0%（4/25）］，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 在ABO血型不合引起的新生儿溶血病中，A型患儿的患病概率高于B型患儿，其病情常重于B型患儿，且病情的进展情况也可能高于B型患儿。

ABO血型系统； 溶血； 血型不合； 婴儿，新生； 血型抗原

新生儿溶血病（hemolytic disease of the newborn，HDN）是指由于母亲与胎儿或新生儿血型不合而引起的免疫性溶血性疾病，其发病始于胎儿从父亲处遗传了母体所缺少的显性血型抗原，而这些抗原可能会刺激母体产生相应的抗体，其中免疫球蛋白G（IgG）类抗体可通过胎盘进入胎儿血液循环破坏胎儿红细胞，致使患儿出现黄疸、贫血、肝脾增大和水肿等症状，严重者可导致胎儿流产和（或）新生儿死亡［1］。其中以新生儿ABO溶血病（ABOHDN）最为常见，主要是母亲血型为O型，胎儿血型为A型或B型，至于其他血型则极为少见［2-3］。ABO-HDN的实验室诊断主要依靠HDN ABO血型筛查，包括Coombs试验、游离试验及放散试验共同组成。检测出Coombs试验和（或）放散试验阳性即可判断为ABO-HDN筛查阳性［4］，为ABO-HDN的诊断提供可靠依据。本研究选取2015年1月至2016年1月在本院行ABO-HDN筛查并符合筛选标准的64例患儿作为研究对象，对ABO-HDN及其与ABO血型的关系进行研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究64例ABO-HDN的筛选标准为：（1）新生儿出生后早期出现明显黄疸并伴有溶血证据；（2）发现黄疸后24 h内进行ABO-HDN筛查；（3）母亲血型为O型Rh（D）阳性，母子血型不合；（4）Coombs试验和（或）放散试验阳性；（5）排除其他原因引起的溶血病或肝胆疾病。

1.2 仪器与试剂 ABO、RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）及抗人球蛋白检测卡购于长春博迅生物技术有限责任公司；TD-A型血型血清学用离心机及FYQ型免疫微柱孵育器（购于长春博研科学仪器有限责任公司）；HH-W420数显恒温水浴箱购于金坛市国旺实验仪器厂。

1.3 方法

1.3.1 微柱凝胶法母亲及新生儿血型鉴定 使用微量移液器向ABO、Rh（D）血型定型检测卡A、B、D、Control微孔分别加入50 μL受检者0.5%红细胞悬液做正定型；向Ac、Bc微孔各加入受检者血浆50 μL，再分别加入0.5%A、B型试剂红细胞悬液50 μL做反定型。加样静置5 min后离心观察结果。

1.3.2 微柱凝胶法ABO-HDN筛查 （1）Coombs试验：取经生理盐水洗涤3次的患儿红细胞配制成0.5%红细胞悬液，加50 μL至抗人球蛋白检测卡微孔中，同时设置阴性及阳性对照，离心后观察结果。（2）游离试验：向抗人球蛋白检测卡微孔中分别加入0.5%A、B、O型试剂红细胞悬液50 μL，再向各孔加入患儿血浆50 μL，混合均匀后于37℃孵育15min，离心后观察结果。（3）放散试验：采用热放散法。取患儿血细胞比容1 mL用生理盐水洗涤4次，最后一次洗涤液转入另一试管中留作对照。取洗涤后的血细胞比容加入等量生理盐水，充分混匀后于56℃水浴10 min，每30秒轻摇一次，在56℃保温离心，上清液即为放散液转移至另一试管备用。向抗人球蛋白检测卡微孔中分别加入0.5%A、B、O型试剂红细胞悬液50 μL，再向各孔加入放散液100 μL，混合均匀后于37℃孵育15 min，离心后观察结果。

1.3.3 结果判断标准 微柱凝胶法检测结果判读如表1所示。

表1 微柱凝胶法试验结果判读

母亲血型必须正反定型相符；新生儿血型以正定型结果为主。Coombs试验和（或）放散试验阳性即可判断为ABO-HDN筛查阳性；仅游离试验阳性不可作为阳性结果判断。某试验某血型患儿的阳性率=（该试验该血型患儿阳性例数/该血型患儿总数）×100%。

1.4 统计学处理 应用SPSS14.0统计软件进行数据分析，计数资料以率或构成比表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 母亲及新生儿血型鉴定结果 64例患儿母亲的血型均为O型Rh（D）阳性；64例患儿中A型Rh（D）阳性率为60.9%（39/64）；B型Rh（D）阳性率为39.1%（25/64），A型患儿阳性率显著高于B型患儿，差异有统计学意义（P＜0.05），未检测出其他血型类型。

2.2 Coombs试验阳性结果与ABO血型的关系 64例患儿中Coombs试验结果阳性共29例，阳性率为45.3%，其中A型患儿19例，阳性率为48.7%（19/39），B型患儿10例，阳性率40.0%（10/25），二者比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。当Coombs试验阳性强度为1+时，A型患儿与B型患儿阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），但当阳性强度为2+时，A型患儿阳性率则显著高于B型患儿，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 Coombs试验阳性结果与ABO血型的关系［n（%）］

2.3 游离试验阳性结果与ABO血型的关系 64例患儿中游离试验结果阳性53例，阳性率82.8%。其中A型患儿34例，阳性率为87.2%（34/39），B型患儿19例，阳性率为76.0%（19/25），二者比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。当游离试验阳性强度为1+时，A型患儿阳性率低于B型患儿，而当阳性强度为2+～3+时，A型患儿阳性率高于B型患儿，差异均有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 游离试验阳性结果与ABO血型的关系［n（%）］

2.4 放散试验阳性结果与ABO血型的关系 64例患儿的放散试验结果均呈阳性，阳性率100.0%。其中A型患儿39例，阳性率为100.0%（39/39），B型患儿25例，阳性率为100.0%（25/25），二者比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。当放散试验阳性强度为1+时，A型患儿阳性率显著低于B型患儿；而阳性强度为3+～4+时，A型患儿阳性率高于B型患儿，差异均有统计学意义（P＜0.05）；当放散试验阳性强度为2+时，A型患儿阳性率与B型患儿阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。

表4 放散试验阳性结果与ABO血型的关系

3 讨 论

ABO-HDN是由于母体与胎儿ABO血型不合而引起的免疫性溶血性疾病，是儿科最常见的急性溶血性疾病之一。据统计，孕妇与胎儿发生ABO血型不合的概率为20%～25%，而其中发生溶血病的概率约为10%［5］。ABO-HDN患儿的血清学检测主要是依靠ABO-HDN筛查，包括Coombs试验、游离试验及放散试验。游离试验是检测母体IgG进入胎儿体内的量，因IgG尚未作用于胎儿红细胞，故游离试验阳性只能作为参考，不能作为诊断指标［6］；只有当提示胎儿红细胞被致敏、Coombs试验和（或）放散试验阳性时才可判断为ABO-HDN筛查阳性。且有研究表明，Coombs试验阳性越强，通常意味着HDN的病情越严重［7-9］；放散试验敏感性虽高于Coombs试验［10］，但其强度与病情严重程度却不一定成正比。

本研究发现，64例ABO-HDN筛查结果为阳性的病例中，A型患儿所占比率显著高于B型患儿，差异有统计学意义（P＜0.05）。该64例病例均符合筛选标准并诊断为ABO-HDN，表明在ABO血型不合引起的HDN中，A型患儿的患病概率高于B型患儿，这一结论与袁咏梅等［11］及解金辉等［12］的研究结果一致。

本研究中Coombs试验阳性强度均未超过2+，阳性率也远低于放散试验，这与该试验敏感性较差的特点相符。Coombs试验A型患儿阳性率高于B型患儿阳性率，但二者比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；当Coombs试验阳性强度为1+时，A型患儿阳性率与B型患儿阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），但当阳性强度为2+时，A型患儿阳性率显著高于B型，差异有统计学意义（P＜0.05），表明A型患儿发生严重ABO-HDN的概率要高于B型患儿，即A型患儿发生ABO-HDN的病情常重于B型患儿。导致这一结果的原因可能是胎儿红细胞上A位点抗原决定簇的数量较B位点多，故A型新生儿溶血反应强度较B型强。

放散试验虽然最为敏感，但由于试验步骤中存在较多对阳性强度产生影响的因素，故虽然A型患儿阳性率在强度为3+～4+时显著高于B型患儿，但无法因此成为A型患儿发生ABO-HDN病情常重于B型患儿的佐证。

虽然游离试验不能作为诊断指标，但因其反映了母体IgG抗体进入胎儿体内的情况，因此对判断病情的进展具有一定的预测作用。在本研究64例ABO-HDN筛查阳性病例中，游离试验A型患儿阳性率高于B型患儿。虽然当游离试验阳性强度为1+时，A型患儿阳性率低于B型患儿，但当阳性强度为2+～3+时，A型患儿阳性率高于B型患儿，差异均有统计学意义（P＜0.05）。由此推测，A型患儿病情进展的概率大于B型患儿。

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Relationship between neonatal ABO hemolytic disease and ABO blood type

Xu Xin1，Liu Qi2，Wang Xia1
（1.Department of Blood Transfusion；2.Department of Gastroenterology，Second Affiliated Hospital，University of South China，Hengyang，Hunan 421001，China）

Objective To investigate the relationship between neonatal ABO hemolytic disease and ABO blood type.Methods Sixty-four neonatal patients with positive results of the direct antiglobulin test（Coombs test），free test and elution test andmeetingthe screeningstandardinourhospitalfrom January 2015 to January 2016 were selected as the research subjects.Among them，the prevalence situation was analyzed and compared between neonatal patients with blood type A and blood type B.Results In64casesofneonatalABOhemolyticdisease，thepositiverateoftypeARh（D）was60.9%（39/64），whichwassignificantlyhigher than 39.1%（25/64）of type B Rh（D），the difference was statistically significant（P＜0.05）.When the intensity of the Coombs test positive was 1+，the difference in the positive rate between the type A and type B had no statistical significance（P＞0.05）；when the positive intensity was 2+，the positive rate of type A was 25.6%（10/39），which was significantly higher than 12.0%（3/25）of type B，the difference was statistical significant（P＜0.05）.When the positive intensity in the free test reached 1+，the positive rate of type A was 25.6%（10/39），which was lower than 44.0%（11/25）of type B；when the positive intensity was 2+～3+，the positive rate of type A was 61.5%（24/39），which was higher than 32.0%（8/25）of type B，the difference was statistically significant（P＜0.05）.The intensity of elution test positive was 1+，the positive rate of type A was 17.9%（7/39），which was significant lower than 48.0%（12/25）of type B；when the positive intensity was 3+～4+，the positive rate of type A was 41.0%（16/39），which was higher than 16.0%（4/25），the difference was statistically significant（P＜0.05）.Conclusion In neonatal hemolytic disease caused by ABO blood type incompatibility，the prevalence rate of type A neonatal patients is higher than that of type B neonatal patients and the disease condition is usually severe than that of type B，moreover the probability of disease progression is also higher than that of type B neonatal patients.

ABOblood-groupsystem； Hemolysis； Bloodgroupincompatibility； Infant，newborn； Bloodgroupantigens

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.16.013

A

1009-5519（2016）16-2484-03

徐新（1983-），硕士研究生，主要从事输血及新生儿溶血病的相关研究。

2016-04-28）