滋肾育胎丸对IVF-ET女性卵巢储备功能影响的临床研究

2016-09-08刘思诗赵颖

广州中医药大学学报 2016年4期

关键词：胎丸卵泡胚胎

刘思诗，　赵颖

（广州中医药大学第一附属医院妇科，广东广州　510405）

滋肾育胎丸对IVF-ET女性卵巢储备功能影响的临床研究

刘思诗，赵颖

（广州中医药大学第一附属医院妇科，广东广州510405）

【目的】观察滋肾育胎丸对再次行体外受精—胚胎移植（IVF-ET）及冻胚移植女性的卵巢储备功能的影响。【方法】选取60例拟再次行胚胎移植者，其中鲜胚移植者和冻胚移植者各30例，分别将其随机纳入治疗组和对照组，每组鲜胚移植和冻胚移植各15例。治疗组给予服用滋肾育胎丸，对照组给予服用维生素E胶囊，共治疗3个周期。比较2组女性服药前后的基础促卵泡刺激素（FSH）值和基础窦卵泡数（AFC）。【结果】（1）在新鲜胚胎移植中，服药3个周期后，2组的基础FSH值比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗组的窦卵泡数较服药前显著增多（P＜0.05），而对照组较服药前有增多趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）；2组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）在冻胚移植周期中，服药3个周期后，2组的基础FSH值比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗组的窦卵泡数较服药前显著增多（P＜0.05），而对照组较服药前有增多趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）；组间比较，治疗组的窦卵泡数较对照组显著增多（P＜0.05）。【结论】滋肾育胎丸可提高再次接受移植女性的窦卵泡数，对再次接受移植的女性的卵巢储备功能可能有一定益处，有望获取更多卵子。

卵巢储备功能；滋肾育胎丸；体外受精—胚胎移植（IVF-ET）；窦卵泡数；促卵泡刺激素

随着辅助生育技术的广泛应用及其局限性，现在中医药治疗已经参与到辅助生育技术的各个环节，在协助辅助生育提高成功率的同时，还能降低其在不同阶段的副作用。滋肾育胎丸是用于防治自然流产及先兆流产的中成药，具有补肾健脾、益气培元的功效，本课题组将其应用于辅助生育技术中，取得较好的疗效，现将临床观察结果报道如下。

1　对象与方法

1.1研究对象及分组选取2013年8月至2015 年2月在广州医科大学第三附属医院生殖中心就诊的女性，拟再次行体外受精—胚胎移植（IVF-ET）者，共60例。其中，鲜胚移植者和冻胚移植者各30例。采用随机数字表法分别将其分为治疗组和对照组，每组鲜胚移植和冻胚移植各15例。

其中，鲜胚移植的治疗组有1例因取卵较多，为预防卵巢过度刺激综合征（OHSS）选择全胚冷冻；鲜胚移植（FET）的对照组有1例因胚胎质量差，取消移植。冻胚移植的治疗组中有1例因内膜因素取消周期。故共完成57个移植周期。

1.2纳入标准（1）25岁≤年龄≤40岁的不孕女性；（2）拟行IVF-ET或FET者；（3）自愿接受服药3个周期者。

1.3排除标准（1）既往移植失败≥3次者；（2）染色体异常者；（3）重度子宫内膜异位症，包括子宫腺肌症、卵巢巧克力囊肿的患者；（4）存在未治愈的子宫内膜疾病患者；（5）先天性子宫畸形及卵巢缺如患者；（6）明显的双侧输卵管积水患者；（7）多囊卵巢综合征患者；（8）合并其他内分泌异常，如下丘脑—垂体功能障碍、高催乳素（PRL）血症等的患者；（9）合并内科疾病，包括糖尿病、高血压、甲状腺疾病患者。

1.4剔除标准（1）未按要求服药者；（2）因个人因素要求退出治疗者。

1.5治疗方法

1.5.1治疗组给予滋肾育胎丸治疗。用法：于再次取卵或移植冻胚前，口服滋肾育胎丸（批准文号：国药准字004Z24008，生产厂家：广州白云山中一药业有限公司）3个周期，每个月经周期第5天开始连续服药，经期1～4 d停药。用量为每次5 g，每日3次。

1.5.2对照组给予维生素E软胶囊治疗。用法：于再次取卵或移植冻胚前，口服维生素E胶囊（批准文号：国药准字H33020187，生产厂家：浙江医药股份有限公司新昌制药厂）3个周期，每个月经周期的第5天开始连续服药，经期1～4 d停药。用量为每次1粒，每日1次。

1.6观测指标2组在第1次和第3次月经的第3天检测血清促卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）水平；第1次和第3次月经的第7天由同一位超声医生用同一台机器测量双卵巢窦卵泡数目。

1.7统计方法采用双人数据输入，使用SPSS 17.0软件进行数据的统计处理。计量资料用均数±标准差（±s）表示，自身前后比较采用配对t检验，组间比较采用独立样本t检验；计数资料用率或构成比表示，组间比较采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1新鲜胚胎周期

2.1.12组年龄和既往移植次数比较在治疗组15例女性中，25～35岁14例，35～40岁1例，平均年龄（32.0±4.71）岁；既往移植次数：移植1次10例，移植2次5例，平均（1.33±0.49）次。对照组15例女性中，25～35岁14例，35～40岁1例，平均年龄（30.6±3.02）岁；既往移植次数：移植1次11例，移植2次4例，平均（1.27 ±0.46）次。在新鲜胚胎周期，2组的既往移植次数及年龄比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

2.1.22组服药前后基础FSH值比较表1结果显示：在新鲜胚胎周期中，服药前，2组的基础FSH值比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；服药后，2组的基础FSH值比较，差异亦无统计学意义（P＞0.05）。

表1　鲜胚周期2组服药前后基础FSH值比较Table 1　Comparison of basal FSH level of both groups in fresh embryo transfer cycle　［±s，J/（U·L-1）］

组别治疗组对照组N 15 15服药前5.96±1.66 6.42±2.01服药后5.73±2.05 5.90±1.57

2.1.32组服药前后窦卵泡数比较表2结果显示：在新鲜胚胎周期中，服药前，2组的基础窦卵泡数比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；服药后，治疗组的窦卵泡数较服药前增多，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组的窦卵泡数较服药前有增多趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）；2组在服药后的窦卵泡数比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

表2　鲜胚周期2组服药前后窦卵泡数比较Table 2　Comparison of AFC of both groups in fresh embryo transfer cycle　（±s，n/个）

①P＜0.05，与服药前比较

组别治疗组对照组N 15 15服药前12.73±3.80 11.47±3.70服药后15.73±5.22①13.86±4.51

2.2解冻胚胎周期

2.2.12组年龄和既往移植次数比较在治疗组15例女性中，25～35岁9例，35～40岁6例，平均年龄（33.0±3.56）岁；既往移植次数：移植1次6例，移植2次9例，平均（1.6±0.51）次。对照组15例女性中，25～35岁7例，35～40岁8例，平均年龄（34.4±3.34）岁；既往移植次数：移植1次8例，移植2次7例，平均（1.47±0.52）次。在解冻胚胎周期，2组的既往移植次数及年龄比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

2.2.22组服药前后的基础FSH值比较表3结果显示：在解冻胚胎周期，服药前，2组的基础FSH值比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；服药后，2组的基础FSH值比较，差异亦无统计学意义（P＞0.05）。

表3　解冻周期2组服药前后基础FSH值比较Table 3　Comparison of basal FSH level of both groupsin frozen embryo transfer cycle　［±s，J/（U·L-1）］

组别治疗组对照组N 15 15服药前5.08±1.22 5.56±1.85服药后5.67±1.16 6.06±1.07

2.2.32组服药前后的窦卵泡数比较表4结果显示：在解冻胚胎周期，服药前，2组的窦卵泡数比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；服药后，治疗组的窦卵泡数较服药前显著增多，差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组的窦卵泡数较服药前有增多趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）；组间比较，治疗组的窦卵泡数较对照组显著增多，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表4　解冻周期2组服药前后窦卵泡数比较Table 4　Comparison of AFC of both groups in frozen embryo transfer cycle　（±s，n/个）

①P＜0.05，与服药前比较；②P＜0.05，与对照组比较

3　讨论

滋肾育胎丸是用于防治自然流产及先兆流产的中成药，具有补肾健脾、益气培元之功效。本研究将滋肾育胎丸应用于辅助生育技术中，以观察其作用疗效。

本临床观察采用基础促卵泡刺激素（FSH）及基础窦卵泡数（AFC）来评估患者的卵巢储备功能。基础FSH作为垂体分泌的促性腺激素，受下丘脑—垂体—卵巢轴的调控。基础FSH值与卵巢反应性呈负相关，当FSH升高意味着卵巢功能的减退，卵巢反应的下降，预示着女性在超促排卵过程中需要使用更大剂量、更长时间的促性腺激素。高剂量促排卵药物的应用可能会增加早期胚胎非整倍体出现，导致植入率下降及流产率上升［1］。乔杰等［2］认为在不同方案中，合理使用促排卵用药对胚胎的正常卵裂率、形态、发育潜能及降低碎片比例有益。B超测量AFC具有无创伤性、可重复性强、患者容易接受等优点，对预测卵巢储备和卵巢反应性准确性较高。有研究显示，AFC是评价卵巢储备的最佳单一指标，基础FSH对于卵巢储备的预测价值有限［3］。另有研究显示，AFC和血清FSH水平对于预测卵巢反应性有较好的敏感性和特异性［4］。临床上常结合基础性激素、基础窦卵泡数及女性年龄，来选择合适的超促排卵方案。

本研究将拟进入新周期或移植冻胚的女性，分为滋肾育胎丸组和维生素E组，两组分别在进入周期之前服药3个周期。在这段时间中，女性的身心得以恢复，3个周期后测量女性卵巢的基础窦卵泡数及基础FSH值。研究结果显示：在鲜胚移植周期中，滋肾育胎丸能提高患者的基础窦卵泡数目，而服用维生素E组并未显示出此差异；而在冻胚移植组中，服药3个周期后的滋肾育胎丸组女性的窦卵泡数显著多于维生素E组，差异有统计学意义（P＜0.05）。推测拟行冻胚移植的女性，前次有胚胎剩余，卵巢功能相对较好，用药后能在统计学上显示出较明显的差异。鲜胚组中虽未看出统计学差异，但滋肾育胎丸组服药后的窦卵泡数也是增多的，该结果与冻胚组中的结论一致，也与前期动物实验发现滋肾育胎丸对兔性腺和性器官有增加血液供应、促进卵泡发育的作用相符［5］。

窦卵泡是成熟卵泡的前体，能很好地反映卵泡池中的原始卵泡数，故窦卵泡数越多，预示卵巢储备越好。因此，本课题组推测滋肾育胎丸对女性卵巢储备功能有一定益处。高琦等［6］研究也表示滋肾育胎丸能增加卵子受精数及质量，优化胚胎数。

卵巢储备功能是指卵巢产生卵子数量和质量的潜能，间接反映卵巢的功能。在中医妇科学中，需要肾阴阳的平衡方能产生足够且优质的卵子。通过中医滋肾补肾法来填精固本，调理天癸和冲任，对提高卵巢储备功能有一定作用［7］。根据正常月经周期的阴阳转化关系，卵泡期应当出现肾水渐复，因行IVF-ET的女性经历超促排卵，超促排卵技术是利用促性腺激素药物一次促使一批卵泡发育，对于正常女性每个周期发育成熟一个卵子的生理状况来说，需消耗更多肾阴及肾气。肾阴耗伤致血海不足，可见冲任失养或阴损及阳；肾精亏虚不能化为肾气，肾气受损累及肾阳，均可致肾中阴阳失衡。

滋肾育胎丸中何首乌、枸杞子、熟地黄滋补肾阴，使卵泡生长有源；艾叶、菟丝子、巴戟天、杜仲、鹿角霜温肾气补虚，使卵泡生长有速。先天之肾精及后天之气血充盛于冲任二脉，罗元恺教授认为妊娠与肾气有密切关系，妊娠失败不外乎肾脾、气血、冲任脉之耗损，肾气亏损为主要病因［8］。加之现代女性承受着较大的生活、工作压力，越来越离不开电脑、手机等带辐射的电子设备。刘云肖等［9］的动物实验发现滋肾育胎丸能防治受电磁辐射的大鼠的卵巢组织引起的氧化损伤。李小球［10］认为补肾健脾中药复方除了免疫调节作用外，还应有内分泌调节效应。故滋肾育胎丸可能是从多个方面来保护女性卵巢功能。

本研究结果显示：服用滋肾育胎丸3个周期后，女性的基础窦卵泡数目增多，有机会获得更多卵子，对最终的妊娠结局有一定裨益；而另一观察指标基础FSH值并未显示出统计学差异（P＞0.05），可能与观察时间短，样本量偏少有关。中医历来注重治未病，笔者认为不孕的女性在进行辅助生育前得到治疗，卵巢功能得到保护，可增加女性的生育潜能。

［1］Santos M A，Kuijk E W，Macklon N S.The impact of ovarian stimulation for IVF on the developing embryo［J］.Reproduction，2010，139（1）：23.

［2］乔杰，马彩虹，刘嘉茵，等.辅助生殖促排卵药物治疗专家共识［J］.生殖与避孕，2015（4）：211.

［3］Hendriks D J，Kwee J，Mol B W，et al.Ultrasonography as a tool for the prediction of outcome in IVF patients：a comparative meta-analysis of ovarian volume and antral follicle count［J］. Fertil Steril，2007，87（4）：764.

［4］Broekmans F J，Kwee J，Hendriks D J，et al.A systematic review of tests predicting ovarian reserve and IVF outcome［J］. Hum Reprod Update，2006，12（6）：685.

［5］邹琦，王如萍.滋肾育胎丸［J］.广东药学，2002，12（2）：56.

［6］高琦，王松峰，腊晓琳.滋肾育胎丸在体外受精—胚胎移植中的疗效观察［J］.甘肃医药，2014（12）：914.

［7］罗颂平.肾主生殖的中医理论探讨与补肾法防治肾虚生殖障碍的机理研究［D］.广州：广州中医药大学，2005.

［8］张玉珍，罗颂平.罗元恺教授论治不孕不育症学术经验介绍［J］.新中医，2002，34（4）：7.

［9］刘云肖，马惠荣，陈景伟，等.滋肾育胎丸对电磁辐射大鼠卵巢组织氧化损伤和Nrf2蛋白表达的影响［J］.中国药房，2016 （4）：470.

［10］李小球.补肾健脾中药对妊娠大鼠孕激素及其受体的影响［J］.广州中医药大学学报，1998，15（3）：49.

【责任编辑：陈建宏】

Effect of Zishen Yutai Pills on Functional Ovarian Reserve of Females Undergoing In-vitro Fertilization Embryo Transfer

LIU Sishi，ZHAO Ying
（Dept.of Gynecology，the First Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510405 Guangdong，China）

ObjectiveTo observe the effect of Zishen Yutai Pills on functional ovarian reserve in the female undergoing in-vitro fertilization embryo transfer（IVF-ET）and frozen embryo transplantation（FET）.Methods Sixty female undergoing re-IVF-ET were enrolled into the study.Of the 60 females，30 cases were transplanted with the fresh embryo and another 30 cases were transplanted with the frozen embryo，and then were evenly divided into treatment group and control group.Each group had half cases receiving fresh embryo transplantation. The treatment group was given oral use of Zishen Yutai Pills，the control group was administered with Vitamin E capsules，and the treatment lasted for 3 weeks.Before and after treatment，the basal follicle-stimulating hormone（FSH）level and antral follicle count（AFC）were observed before and after treatment.Results（1）In fresh embryo transfer cycle，there was no significant difference in basal FSH and AFC after three treatment cycles between the two groups（P＞0.05）；after taking the pills AFC of the treatment group was increased（P＜0.05 compared with that before treatment），but the control group only showed an increasing trend（P＞0.05）.（2）In frozen embryo transfer cycle，there was no significant difference in basal FSH after three treatment cycles between the two groups（P＞0.05）；after taking the pills AFC of the treatment group was increased（P＜0.05 compared with that before treatment），but the control group only showed an increasing trend（P＞0.05）；the inter-group comparison showed that AFC of the treatment group was higher than that of the control group （P＜0.05）.Conclusion Intervention with Zishen Yutai Pills at least three cycles is beneficial to the functional ovarian reserve of females undergoing re-IVF-ET through increasing AFC，which is expected for widely use in the clinic.

functional ovarian reserve；Zishen Yutai Pills；in-vitro fertilization embryo transfer（IVF-ET）；antral follicle count；follicle-stimulating hormone

R271.9

1007-3213（2016）04-0469-04

10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2016.04.006

2016-03-03

刘思诗（1989-），女，医师；E-mail：3538340@qq.com

赵颖（1972-），女，主任中医师；E-mail：drzhaoying@126.com

广东省科技计划项目（编号：20110315）