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几种不同花生品种辅酶Q10含量比较*

2016-09-05王协利陶志杰王珊珊吴从文

广州化工 2016年6期
关键词:豫花辅酶细胞培养

王协利,陶志杰,王珊珊,刘 城,吴从文

(蚌埠学院生物与食品工程系,安徽 蚌埠 233030)



几种不同花生品种辅酶Q10含量比较*

王协利,陶志杰,王珊珊,刘城,吴从文

(蚌埠学院生物与食品工程系,安徽蚌埠233030)

分析不同花生品种中辅酶Q10含量,为植物细胞培养制备辅酶Q10提供理论依据。采用紫外分光光度法测定花生中辅酶Q10的含量。结果表明:蚌埠地区主要种植的5个花生品种(鲁花11号、鲁花14号、鲁花8号、豫花4号、中花5号)种子中的辅酶Q10含量以鲁花14号辅酶Q10含量最高,中花5号次之,豫花4号最低。芽茎中辅酶Q10含量以鲁花8号、鲁花14号较高,根中辅酶Q10含量差异不大。

辅酶Q10;花生;紫外分光光度法

辅酶Q10(Coenzyme Q10,简写CoQ10),化学名称为2,3-二甲氧基-5-甲基-6-癸异戊烯基-苯醌,又名泛醌,广泛存在于生物体细胞线粒体中。CoQ10能保护和改善心功能、降血压、保肝、抗癌、治疗皮肤性疾病、糖尿病等药理作用[1]。此外,由于抗氧化作用,CoQ10还可应用于保健食品、化妆品等方面[2-3]。

本实验测定了蚌埠地区主要种植的5个花生品种(鲁花11号、鲁花14号、鲁花8号、豫花4号、中花5号)果实及芽茎、根中CoQ10的含量,预筛选出CoQ10含量较高的品种和外植体,为以后花生细胞悬浮培养产CoQ10奠定理论基础。

1 实 验

1.1材料、试剂与仪器

花生种子鲁花11号、鲁花14号、鲁花8号、豫花4号、中花5号(购于固镇县种子站)。

氢氧化钠,焦性没食子酸,无水乙醇,石油醚,硼氢化钠,无水硫酸钠等,以上试剂均为分析纯。

FW-100高速万能粉碎机,北京市永光明医疗仪器厂;JA1203电子天平,上海精科天平厂;HH-S型数显恒温水浴锅,金环市华科教实验仪器厂;紫外分光光度计,上海精密科学仪器有限公司;旋转蒸发仪RE52CS,上海亚荣生化仪器厂;SHZ-D[III]循环式真空泵,巩义市予华仪器有限公司等。

1.2方法

1.2.1实验流程

采集→清洗→粉碎→皂化→萃取→水洗→脱水→旋蒸浓缩→冷冻→过滤→含量测定

1.2.2CoQ10的提取

将洗净的不同品种花生种子去皮用粉碎机粉碎,称取10 g,再加入0.7 g 焦性没食子酸,7.5 g氢氧化钠-75%的乙醇,在90℃条件下回流30 min,用自来水迅速冷却,加入石油醚,剧烈振荡5 min,萃取2 次,取上清液合并,用蒸馏水洗涤至中性,再加入适量无水硫酸钠除去水分,用旋转蒸发仪(60℃)浓缩至干,并挥发完全,加入10 mL无水乙醇,放入冰箱冷冻析出胆固醇等杂质,待测[4]。

1.2.3CoQ10的含量测定

将上述所得待测液取出,过滤,滤液用无水乙醇定容至25 mL,待测。用无水乙醇溶解定容后,在275 nm波长下测定氧化型CoQ10的光吸收值(A1),然后加入0.1 mL 0.7%的硼氢化钠水溶液充分还原CoQ10,并在同一波长下测定还原型CoQ10光吸收值(A2)[5]。以无水乙醇作对照,按以下公式计算CoQ10的含量:

W(CoQ10)=(A1-A2)×106×n/(142×S)

式中:W——每克花生中CoQ10的含量

n——稀释倍数

S——去皮花生果实鲜重质量

142——质量分数

2 结果与分析

2.1不同花生品种种子中CoQ10含量比较

图1 不同品种花生种子中CoQ10含量比较

图1中表明,在5个不同花生品种中,种子中CoQ10含量最高的是鲁花14号(平均含量为168.378 μg/g);其次是中花5号(平均含量为131.944 μg/g);含量最低的是豫花4号(平均含量为62.382 μg/g)。由此可见,不同品种花生种子中CoQ10含量有较大差异,比较的这5个品种中,CoQ10含量最高比最低高出2倍之多。

2.2不同花生品种芽茎中CoQ10含量比较

在25℃黑暗条件下用上述5种品种花生种子催芽,待芽长6~8 cm时,去除花生瓣及根,采收白色粗壮的芽茎用丙酮研磨法提取CoQ10,含量按方法1.3.3测定。图2中所示,在5种不同花生品种芽茎中CoQ10含量不等,最高的是鲁花8号(平均含量为63.672 μg/g);其次是鲁花14号(平均含量为57.933 μg/g);含量最低的是鲁花11号(平均含量为38.532 μg/g)。

图2 不同品种花生芽茎中CoQ10含量比较

2.3不同花生品种根中CoQ10含量比较

花生根采集于固镇县花生种植基地。由图3可知,在5个不同花生品种根中CoQ10含量最高的是鲁花14号(平均含量为86.295 μg/g);其次是鲁花8号(平均含量为79.389 μg/g);含量最低的是鲁花11号(平均含量为57.367 μg/g)。待测的5种花生品种根中CoQ10含量差异并不大,均在60~90 μg/g之间。

图3 不同品种花生根中CoQ10含量比较

3 讨 论

植物细胞培养法产CoQ10最早由Ikeda通过烟草组织细胞培养分离得到。鉴于植物细胞培养生产次生代谢物的独特优势,采用植物细胞培养技术生产CoQ10己成为研究热点。花生组培技术应用于次生代谢物质的生产是有关学者研究的新课题。花生是CoQ10含量较高的植物物种之一,利用花生组织培养产CoQ10具有可行性。试验测定的5个花生品种中CoQ10含量最高比最低高出2~3倍。而各个品种的根部CoQ10含量差异不明显,均约为60~90 μg/g之间。花生芽茎中CoQ10含量较高,最高含量的鲁花8号,平均值63.672 μg/g鲜重,花生芽茎由于含水量较高,若转换为干重含量,将是花生种子含量的数倍。

4 结 论

测定的5个花生品种种子中的CoQ10含量鲁花14号最高,中花5号次之,豫花4号最低。其芽茎中CoQ10含量则以鲁花8号、鲁花14号较高,而根中CoQ10含量差异不大。由此说明,可以选用鲁花14号、鲁花8号为试验材料进行花生芽茎细胞培养产CoQ10的研究。本实验为后续花生细胞培养体系的建立及生物合成CoQ10的研究奠定了试验基础。

[1]钱雪,王祖巧,韩国平,等.辅酶Q10的药理与应用[J].食品与药品,2006,8(1):16-19.

[2]马菊,石宁.食品中应用辅酶Q10的研究进展[J].食品科技,2009,34(2):18-21.

[3]叶青,张宾红,关屹.辅酶Q10的性质及其在化妆品中的应用[J].香料香精化妆品,1999,03:32-34.

[4]陶志杰,曹迪,王改玲,等.超声波法辅助提取花生中辅酶Q10的工艺优化[J].食品科学,2012,33(18):53-56.

[5]吕春茂,孙忠思,杨国放,等.几个烟草品种辅酶Q10含量的比较[J].安徽农业科学,2007,35(1):129-130.

Comparison of CoQ10Content of Several Peanut Varieties*

WANG Xie-li,TAO Zhi-jie,WANG Shan-shan,LIU Cheng,WU Cong-wen

(Department of Biology and Food Engineering,Bengbu College,Anhui Bengbu 233030,China)

Coenzyme Q10content of five peanut varieties was analyzed,theoretical basis for production of CoQ10was provided by the application of plant cell culture technique.The results showed that five peanut varieties were mainly planted in Bengbu,the CoQ10content of peanut seeds was highest in Luhua No.14,moderate in Zhonghua No.5,and lowest in Yuhua No.4.The CoQ10content of peanut buds was higher in Luhua No.8,Luhua No.14,and the CoQ10content in roots was not significant differences.

Coenzyme Q10;peanut;ultraviolet spectrophotometry

省级大学生创新创业训练计划项目(No:AH201411305067);安徽省高校自然科学研究项目(No:113052015KJ07)。

王协利(1994-),女,生物工程专业学士在读。

陶志杰(1979-),女,讲师,研究方向为生物活性物质提取与制备。

Q946.5

A

1001-9677(2016)06-0087-02

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