不同标本类型对一种NT-proBNP（POCT法）检测结果的影响

龙林会，陈芳四川省自贡市第三人民医院检验科，四川自贡　643000

不同标本类型对一种NT-proBNP（POCT法）检测结果的影响

龙林会，陈芳
四川省自贡市第三人民医院检验科，四川自贡643000

目的 探讨不同标本类型对一种POCT法检测N末端B型利钠肽（NT-proBNP）检测结果的影响。 方法 收集6例患者样本，其中男女各3例。另收集正常体检者2例样本作为样本稀释液。随机收集20例心功能不全病例标本用于相关性分析。结果 以化学发光定量检测作为标准，测定干燥血清管标本的NT-proBNP结果与武汉明德公司POCT法分析仪检测两种标本NT-proBNP浓度的Pearson相关系数分别是r干燥管=0.952 8，rEDTA-K2抗凝管=0.930 7；不同类型标本NT-proBNP（POCT法）浓度比较P＜0.05，差异有统计学意义；将干燥管分离出的血清为最适标本存放在室温下0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h后测定的NT-proBNP，各组数据间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 该研究认为采用武汉明德公司POCT法检测NT-proBNP使用干燥真空管采集标本为最适标本。

N末端B型利钠肽，POCT法，检测，心力衰竭

［Abstract］Objective To study the effect of different specimen types on the test results of NT-proBNP by the POCT method.Methods The specimens of 3 female cases and 3 male cases were collected，and another 2 specimens of cases of normal physical examiners were selected as the sample diluent，and 20 specimens of disease cases with cardiac insufficiency were randomly collected for the relevant analysis.Results The Pearson correlation coefficients of NT-proBNP result of dry serum tube specimen and NT-proBNP concentration of two specimens detected by the analysis meter by the POCT method in Wuhan Mingde Company were respectively rdrying tube=0.9528 and rEDTA-K2anticoagulative tube=0.9307 taking the chemiluminescence quantitative test as standards，the difference in the NT-proBNP concentration between different types of specimens had statistical significance，P＜0.05，the serum isolated from the drying tube were used as the optimal specimen and stored at the room temperature，and the NT-proBNP was measured after 0 h，2 h，4 h，8 h，12 h and 24 h，and the difference between groups had no statistical significance，P＞0.05.Conclusion The research shows that the specimen collected by the dry vacuum tube is the optimal specimen after testing NT-proBNP by the POCT method in Wuhan Mingde Company

［Key words］NT-proBNP；POCT method；Detection；Heart failure

心力衰竭（Heart Failure，HF）是指由于心脏功能障碍而产生的体征和症状的临床综合征；它是目前严重危害人类健康的最常见的一种综合征 因此心衰的早期诊断及规范治疗对逆转左室重构，阻断心血管病的发生与发展极为重要B-型脑利钠肽（BNP）主要由心室分泌，因此在诊断心室功能障碍时，是个直接客观的标志物。N末端B型利钠肽（NT-proBNP）和BNP同属利钠肽家族，均用于临床检测心肌细胞受刺激后，产生含134个氨基酸的B型利钠肽原前体（pre-proBNP），随后形成含108个氨基酸的BNP前体（proBNP），后者在内切酶的作用下裂解为含有76个氨基酸 无生物活性的NT-proBNP和含有32个氨基酸 有活性的B型利钠肽 （BNP）BNP半衰期短（22 min），体外稳定性差，而NT-proBNP半衰期较长（120 min），体外稳定性强，体外检测影响因素相对BNP的检测要少，且在心力衰竭患者中的浓度较BNP高，在有些情况下更有利于心力衰竭的诊断 在应用基因重组技术产生的重组人B型利钠肽（rhBNP）进行治疗时，测定NT-proBNP不受干扰［1］现在国内多数医院采用进口的仪器和试剂进行检测，成本较高，检测时间较长，床旁检测（POCT法）测定NT-proBNP可方便快速地提供较可靠检验结果，有助于医生更早制订治疗策略，并节省治疗费用；它作为中心实验室的扩展，能够增加检测能力，并减轻实验室检验人员的压力；管理人员也能更合理地使用资源。更为重要的是它满足了人们在时间上的需要，使患者及时得到诊断和治疗［2］。怎样获得准确的检测结果是至关重要的，其中选择正确的标本类型是取得准确结果的关键。该院使用的武汉明德公司的NT-proBNP （POCT法）是一种国产试剂，在开始使用时，临床反映检测结果有偏高现象，经详细调查，发现为标本类型选择不适导致。现将在室温下不同标本类型对该院应用的武汉明德公司NT-proBNP（POCT法）检测结果影响分析如下。

1　材料与方法

1.1仪器、试剂与标本

1.1.1仪器与试剂NT-proBNP定量检测采用罗氏Cobas E601电化学发光分析仪测定，校准液、试剂、质控物、消耗品等由罗氏公司原装配套提供；NT-proBNP （POCT法），定量分析仪，试剂，质控卡由武汉明德公司提供。

1.1.2标本的选择临床标本采集考虑到检测干扰的存在，所选标本均无溶血、脂血及黄疸的新鲜标本。抽血患者为临床确诊为心力衰竭患者。共收集6例患者样本，其中男女各3例。另收集正常体检者2例样本作为样本稀释液。随机收集20例心功能不全病例标本用于相关性分析。

1.2检测方法

1.2.1标本采集于清晨空腹抽取静脉血4～5 mL，分别置于EDTA-K2真空抗凝管、干燥血清管，3 000 r/min离心10 min，分离血清和血浆（标本管均由BD公司提供）。已有较多研究表明NT-proBNP定量检测最适标本为干燥真空管采集的标本［3］。为了节约成本，使用美国罗氏公司Cobas E601免疫分析仪检测干燥血清管标本NT-proBNP浓度。武汉明德公司NT-proBN（POCT法）分析仪检测两种标本NT-proBNP浓度。

1.2.2标本准备将分离后的患者标本按不同标本管用低值血清或血浆进行配制成高值，中值，低值。立即连续测定高、中、低5次并取均值。剩余标本分别分装成20份备用。

1.2.3室温下稳定性实验将干燥血清管标本于室温（22℃±3℃）放置0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h，测定NT-proBNP浓度，根据其检测结果观察其结果稳定性。

1.3统计方法

2　结果

2.1相关性分析

以化学发光定量检测作为标准，测定干燥血清管标本的NT-proBNP结果与武汉明德公司NT-proBN（POCT法）分析仪检测两种标本NT-proBNP浓度的相关性比较，见表1。

表1　不同标本类型POCT法检测NT-proBNP与Cobas E601免疫分析仪检测NT-proBNP相关性分析

2.2不同类型标本NT-proBNP（POCT法）浓度比较

两种不同类型标本中，NT-proBNP浓度存在明显差异，EDTA-K2抗凝血浆较高，与干燥管标本的NT-proBNP水平相比明显升高（P＜0.05），差异有统计学意义。这个结果与化学发光分析法检测结果相关研究不符［3-4］，化学发光法定量检测认为二者差异无统计学意义。见表2。

表2　不同标本类型NT-proBNP（POCT）检测结果间比较（±s）

表2　不同标本类型NT-proBNP（POCT）检测结果间比较（±s）

注：与干燥管（红色头）血清比较，△P＜0.05。

NT-proBNP（pg/mL）　干燥管（红色头）血清　EDTA-K2抗凝血浆高值中值低值8 440±743.64 560±66.71 148±19.24 （9 300±1 004.03）△（652±81.97）△（166±20.4）△

2.3 NT—proBNP（POCT法）不同保存条件下结果的稳定性观察

将干燥管分离出的血清为最适标本存放在室温下0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h后测定的NT-proBNP结果见下图。NT-proBNP水平在室温下24 h内检测结果不受存放时间的影响，各组数据间差异无统计学意义（P＞0.05）。

注：A：干燥管标本NT-proBNP高值在室温保存不同时间稳定性分析；B：干燥管标本NT-proBNP低值在室温保存不同时间稳定性分析。

3　讨论

①根据使用美国罗氏公司Cobas E601免疫分析仪检测干燥血清管标本的NT-proBNP；其检测结果与武汉明德公司NT-proBN（POCT）分析仪检测两种标本NT-proBNP浓度进行相关性分析结果可见（r干燥管=0.952 8，rEDTA-K2抗凝管=0.930 7）：检测结果与武汉明德公司 NT-proBNP（POCT）分析仪检测干燥管分离的血清标本结果相关性较好。与王伟佳等人研究相符［3-4］。

②通过表2结果分析可以看出，采用武汉明德公司NT-proBN（POCT法）分析仪检测NT-proBNP，EDTA-K2抗凝血浆检测结果明显高于干燥管（红色头）血清检测结果，二者比较P＜0.05，差异有统计学意义，与采用化学发光分析法检测的临床研究不符［3-4］。尽管EDTA-K2抗凝血浆检测结果明显高于干燥管（红色头）血清检测结果，似乎前者灵敏度更高，但特异性太低会增加临床医生鉴别诊断的难度，导致不必要的麻烦。目前NT-proBNP是临床医生对心衰发生和发展的观测指标之一，其与临床症状不符的异常升高或降低是引起临床医生质疑的重要原因［5］。

③结合相关性分析、不同类型标本检测结果分析、该方法检测NT-proBNP稳定性分析，以及“NT-proBNP临床应用中国专家共识”的相关陈述，该院采用武汉明德公司NT-proBN（POCT法）分析仪检测NT-proBNP使用干燥真空管采集标本进行检测。自2013年2月至今检测结果稳定可靠。因此正确的选择标本类型是获得准确结果的前提。

④床旁检测 （point of care testing，POCT）测定NT-proBNP方便快速地提供可靠检验结果，有助于医生更早制订治疗策略，并节省治疗费用；它作为中心实验室的扩展，能够增加检测能力，并减轻实验室检验人员的压力；管理人员也能更合理地使用资源。但是该方法目前还无法进行国家性的标准化管理，所以在投入使用前一定要做方法的性能评价，选择最适检测条件，尽可能的避免一些影响因素导致的结果不准确。同时在应用的过程中多与临床联系，了解检测结果与临床诊断、临床治疗效果的评价，从而为临床医疗和患者健康提供更有效的服务。

［1］NT-proBNP临床应用中国专家共识小组.NT-proBNP临床应用中国专家共识［J］.中国心血管病研究，2011，9（6）：401-408.

［2］康熙雄.床旁检测临床应用手册［M］.人民军医出版社，2010，5（1）：前言.

［3］王伟佳，张秀明，温冬梅，等.不同抗凝剂、样本放置时间及保存温度对B型利钠肽和氨基末端B型利钠肽原检测的影响［J］.现代检验医学杂志，2012，27（2）：83-87.

［4］戴雯，李艳，苏汉文.标本类型及存放时问对心衰患者BNP 和NT-proBNP检测结果的影响［J］.微循环学杂志，2010，20 （2）：37-38.

［5］韦丙奇，杨跃进，张健，等.血浆N末端B型利钠肽原对预测心力衰竭患者住院病死率的价值［J］.中华心血管病杂志，2009，37：481-485.

Effect of Different Specimen Types on the Test Result of a Kind of NT-proBNP by the POCT Method

LONG Lin-hui，CHEN Fang
Department of Clinical Laboratory，Zigong Third People's Hospital，Zigong，Sichuan Province，643000 China

R541

A

1672-5654（2016）06（c）-0114-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.18.114

龙林会（1971.11-），女，四川宜宾人，本科，主管技师，主要从事临床免疫学检验工作，E-mail：2644815114@qq. com）。

（2016-03-26）