再认识血球计数板

周民民 程 姣 朱玉芳

(江苏省滨海中学 盐城 224500)(苏州大学基础医学与生物科学学院 215123)

血球计数板是对细胞进行直接计数的重要工具，高中生物学教材中使用血球计数板对酵母菌等微生物进行计数。在教学实践中发现，教师对计数板的认识有局限。

1 “镜”中窥“室”，只知其一

高中生物学教材中，“探究酵母菌种群大小的动态变化”实验以及“显微镜直接计数土壤浸出液中分解尿素的细菌”实验都需使用血球计数板，在苏教版选修一教材中具体介绍了血球计数板的构造、使用操作、计数方法等。其呈现顺序为：血球计数板整体构造→计数室(九个大方格)→中央大方格→其四角的中方格→每个中方格中的小方格。这种呈现顺序引导师生由整体到局部逐步分析血球计数板，最终围绕计数室进行计数并计算，但主要涉及中央大方格的结构和使用。而部分习题和一些高中生物学的教学论文[1]也侧重于中方格的使用。由此师生对血球计数板的认识比较局限。

2延展视域，全面认识

酵母菌、细菌等微生物的计数确实是在中央大方格范围内计数，那计数板的其他区域可用于哪些细胞的显微计数呢？

红细胞的计数与酵母菌等微生物的计数方法相同，根据不同血球计数板的规格，在中央大方格(图1中的A区域)内选择4或5个中方格为样方来计数。但白细胞的计数则不同，应选取四角大方格(图1中的B、C、D、E区域)为样方来计数(设计数的细胞总数为N)。每个大方格的体积都为0.1mm3，再利用公式计算：细胞数/mL=N/4×104×稀释倍数，最后得到结果。

图1 血球计数板的计数室

另外，在动物细胞培养过程中，往往在细胞悬液制备后，需进行细胞计数，以确定细胞接种密度和数量，并了解细胞存活率和增殖度。此时，按白细胞计数方法进行计数，选择四角大方格[2](B、C、D、E)作为样方来计数细胞，或者选择四角大方格和中央大方格[3](A、B、C、D、E)作为样方来计数细胞。这是因为一些动物细胞体积比微生物大，如果在中央大方格内选择4或5个中方格计数，样方较小，易造成较大的误差。