非酒精性脂肪肝病合并代谢综合征患者血清GPC-4水平变化

黄丽丽，南晓利，马光宇，谭丽艳

( 1.佳木斯大学附属第一医院内分泌科，黑龙江 佳木斯 154003；2.佳木斯大学附属口腔医院，黑龙江 佳木斯 154002)



非酒精性脂肪肝病合并代谢综合征患者血清GPC-4水平变化

黄丽丽1，南晓利2，马光宇1，谭丽艳1

( 1.佳木斯大学附属第一医院内分泌科，黑龙江 佳木斯 154003；2.佳木斯大学附属口腔医院，黑龙江 佳木斯 154002)

摘要：目的：研究非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝合并代谢综合征患者血清GPC-4水平变化及其与糖脂代谢和胰岛素抵抗的关系。方法：选取单纯非酒精性脂肪肝患者42例为A组，合并代谢综合征42例为B组，同期健康体检者40例为NC组，记录一般资料并测定血糖、血脂、肝功等生化指标，酶联免疫法检测各组GPC-4水平，B超仪检查脂肪肝，计算体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果：GPC-4浓度从正常组、NAFLD组到NAFLD合并MS组逐渐升高[(2.91±0.47)vs(2.95±0.31)vs(3.72±0.80)]，NC组与A组无显著性差异(P>0.05)，B组与NC组和A组均有显著差异(P<0.01)。血清GPC-4水平与BMI、WHR、SBP、DBP、ALT、AST、TG、TC、LDL-C、UA、FPG、FINS、HOMA-IR呈正相关，与HDL-C呈负相关(P<0.05)。多元线性回归显示BMI、HOMA-IR是GPC-4的独立影响因素。结论：非酒精性脂肪肝病患者有肥胖、高脂血症、高尿酸、胰岛素抵抗等特征，合并代谢综合征时，糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗程度显著加重；GPC-4浓度随胰岛素抵抗加重而逐渐升高,高浓度的GPC-4可能有助于改善胰岛素抵抗。

关键词：非酒精性脂肪肝病;代谢综合征;GPC-4;胰岛素抵抗

随着生活水平的提高和生活方式的改变，非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)和代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的发病率逐年升高，MS患者发生糖尿病、心脑血管疾病的的风险约是无MS者的2～5倍，现已成为影响人类健康的常见慢性疾病。目前认为，胰岛素抵抗是MS的中心环节，几乎所有的NAFLD患者都存在周围组织和肝脏的胰岛素抵抗，同时合并肝细胞的氧化应激及脂质过氧化反应。临床上以原发性NAFLD多见，部分会发生脂肪性肝炎、肝硬化，甚至进展为肝癌。此外，NAFLD还可通过加剧IR进而诱发动脉硬化性心脑血管事件的发生。最新有研究提出，NAFLD是MS在肝脏的另一种表现形式，可把NAFLD纳入为MS的组分[1～3]。磷脂酰肌醇蛋白聚糖-4(Glypican-4，GPC-4)是一种新发现的脂肪因子，它可与胰岛素受体相互作用并影响其信号转导通路[4]。本研究对NAFLD、NAFLD合并MS患者的GPC-4水平及其与肥胖、糖脂代谢、胰岛素抵抗的关系进行初步探讨。

1资料和方法

1.1一般资料

选取2015-06～2015-12就诊于佳木斯大学附属第一医院内分泌及消化科门诊及病房的非酒精性脂肪病患者84例，其中单纯NAFLD患者42例(A组)，男20例，女22例，平均年龄(47.98±7.61)岁；NAFLD合并MS患者42例(B组)，男23例，女19例，平均年龄(48.29±8.54)岁。同期健康体检者40例(NC组)作为对照，其中男19例，女21例,平均年龄(48.05±7.14)岁。三组间年龄、性别构成无显著性差异(P>0.05)。NAFLD诊断标准参照中华医学会2010年修订版非酒精性脂肪肝病诊疗指南[5]。代谢综合征的诊断标准依据2007年中国成人血脂异常防治指南。

1.2方法

记录所有受试者一般情况、家族史、饮酒情况及既往病史，测量其空腹状态下身高、体重、腰围、臀围、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)，计算体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)。禁食8～10h后于次日清晨抽取肘静脉血5mL，常规分离血清，用日本Olympus AU-2700全自动生化分析仪测定肝功、血脂、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)水平，另留一份血清存于-80℃冰箱，用于血清GPC-4测定。所有受试者行肝脏B超检查(Siemens AcusonS 2000彩色多普勒超声诊断仪)。空腹胰岛素测定采用罗氏全自动电化学发光检测仪，血清GPC-4测定采用酶联免疫吸附法(Labsystems Multiskan MS芬兰352型酶标仪)，试剂盒购于上海劲马实验设备有限公司，批内CV<6.6%，批间CV<8.5%。体重指数(BMI)=体重(kg)/身高2(m2)；腰臀比(WHR)=腰围/臀围；依据稳态模型评估法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)：HOMA-IR=FPG×FINS/22.5。

1.3统计学方法

2结果

2.1三组间一般临床资料及实验室指标比较

三组间年龄、性别构成无显著性差异(P>0.05)。A组及B组的BMI、WHR、SBP、DBP、ALT、AST、TG、TC、LDL-C、UA、FPG、FINS、HOMA-IR水平均高于NC组，HDL-C水平低于NC组；B组与A组相比，除TC、LDL-C、UA水平无统计学差异，HDL-C水平降低外，各指标均高于A组，且差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与NC组比较，A组、B组GPC-4水平呈上升趋势。见表1。

表1　三组一般临床资料及实验室指标比较

组别ALT(U/L)AST(U/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)UA(μmol/L)男女NC组18.38±5.0719.65±3.390.99±0.264.43±0.911.79±0.382.15±0.75348.98±94.75249.84±63.90A组33.24±12.50▲29.10±7.64▲1.88±1.29▲5.13±0.99▲1.52±0.31▲2.66±0.86▲407.3±78.49271.18±50.94B组39.95±13.23▲■33.07±10.94▲□2.79±1.84▲■5.49±1.14▲1.23±0.27▲■2.70±0.85▲406.88±54.21▲328.59±83.25▲

注：与NC组比较，△P<0.05，▲P<0.01；与A组比较，□P<0.05，■P<0.01。

2.2血清GPC-4水平影响因素的Pearson相关性分析

结果显示，血清GPC-4水平与BMI、WHR、SBP、DBP、ALT、AST、TG、TC、LDL-C、UA、FPG、FINS、HOMA-IR呈正相关，与HDL-C呈负相关(P<0.05)。

表2　血清GPC-4影响因素的Pearson相关性分析

项目ALTASTTGTCHDL-CLDL-CUAr值0.2600.1520.3960.204-0.3030.0220.286P值0.0030.0930.0000.0230.0010.8100.001

2.3多元线性逐步回归分析

以GPC-4为因变量，以BMI、WHR、SBP、DBP、ALT、AST、TG、TC、HDL-C、LDL-C、UA、FPG、FINS、HOMA-IR为自变量进行多元线性逐步回归，结果显示BMI、HOMA-IR是血清GPC-4水平的独立危险因素。见表3。

表3　血清GPC-4相关因素的多元线性回归分析

3讨论

非酒精性脂肪肝病是一组除了表现为肝脏病变之外，还与机体糖脂代谢密切相关的疾病。肝脏是胰岛素作用的靶器官。研究表明，几乎所有的NAFLD患者都存在周围和肝脏的胰岛素抵抗，IR是NAFLD发生、发展的基础，其严重程度与NAFLD的病情进展相关[6]。代谢综合征是具备以下4项组分中的3项或全部的一组代谢紊乱症候群：超重和(或)肥胖，尤其是中心性肥胖；高血糖；高血压；血脂紊乱。肥胖和胰岛素抵抗是代谢综合征的中心环节。目前研究认为，NAFLD是代谢综合征在肝脏的表现形式[7，8]。

本研究结果显示，NAFLD患者具有肥胖、高脂血症、高尿酸、胰岛素抵抗等特征。合并代谢综合征时，糖脂代谢紊乱胰岛素抵抗程度显著加重，其中以TG的升高和HDL-C的降低最为明显。高TG的患者体内游离脂肪酸增多，干扰胰岛素在周围组织中与受体结合，降低胰岛素作用而产生胰岛素抵抗。IR通过脂解作用和高胰岛素血症两种机制使脂质从脂肪细胞向非脂肪细胞尤其是肝细胞内转移，肝内脂肪堆积进而形成脂肪肝。这种脂毒性继续诱发和加剧胰岛素抵抗，形成恶性循环。NAFLD患者发生MS及心血管疾病的风险明显增高[9，10]。单纯NAFLD如积极治疗是可以完全恢复的，因此我们应早期干预并治疗NAFLD，以降低MS及心血管事件的发生风险。

GPC-4由白色脂肪组织分泌，研究表明这种脂肪因子可直接作用于胰岛素受体并增强其信号传导，促进脂肪分化[4]。Gesta等人最早发现GPC-4基因在大鼠及人类的内脏及皮下脂肪中差异性表达并在肥胖者体内受到高度调控[11]。血清GPC-4随着BMI的增加而增加，并与胰岛素抵抗呈显著的正相关。同时，GPC-4在腹型肥胖的超重人群中表达最高[4]。我们的研究结果显示，血清GPC-4水平与BMI、WHR、SBP、DBP、ALT、AST、TG、TC、LDL-C、UA、FPG、FINS、HOMA-IR呈正相关，与HDL-C呈负相关。其中，以BMI及HOMA-IR的影响最为显著。GPC-4浓度随着胰岛素抵抗程度和糖脂代谢紊乱的加重呈上升趋势，考虑与其参与胰岛素受体的活化和下游信号的转导有关。Ussar等认为增加GPC-4水平可能是脂肪组织对胰岛素抵抗反应出的一种新调控机制，在胰岛素抵抗严重或者糖尿病患者体内维持高浓度的GPC-4水平有可能会降低机体胰岛素需求，改善胰岛素抵抗[4]。

综上所述，本研究结果显示：从正常组、NAFLD组到NAFLD合并MS组，糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗程度逐渐加重，GPC-4浓度逐渐升高，且与BMI、WHR、TG、HOMA-IR等明显相关。GPC-4水平升高可能有助于改善胰岛素抵抗。脂肪因子与糖脂代谢的关系研究需更多实验佐证，以进一步探讨可能的作用机制。

参考文献：

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[3]朱金玲,张虎,张小波,等. 非酒精性脂肪肝形成过程中肝型脂肪酸结合蛋白的表达[J]. 黑龙江医药科学,2009,32(4):34-35

[4]Ussar S，Bezy O，Bluher M，et al.Glypican-4 enhances insulin signaling via interaction with the insulin receptor and serves as a novel adipokine[J].Diabetes,2012,61(9):2289-2298

[5]中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组.非酒精性脂肪性肝病诊疗指南[J].中国肝脏病杂志(电子版),2010,(04):43-48

[6]Marchesini G,Maxzocchi R,Agostini F,et al. Nonalcoholic fatty liver disease and the metabolic syndrome[J].Curr Opin Lipidol,2005,16(4):421-427

[7]Tarantino G, Saldalamacchia G, Conca P,et al. Non-alcoholic fatty liver disease:further expression of the metabolic syndrome[J].Journal of Gastroenterology and Hepatology,2007,22(3):293-303

[8]Souza MR, Diniz MF, Medeiros-Filho JE, et al.Metabolic syndrome and risk factors for non-alcoholic fatty liver disease[J].Arq Gastroenterol,2012,49(1):89-96

[9]赵玲，杜鹃，徐勉，等.2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病与胰岛素抵抗及血脂代谢紊乱的关系[J].中华内分泌代谢杂志，2012,28(1):16-20

[10]谭丽艳,谭丽萍,王静,等. 糖尿病合并代谢综合征患者血浆脂联素变化及肾素血管紧张素系统对其影响[J]. 黑龙江医药科学,2011,34(2):49-50

[11]Gesta S，Bluher M，Yamamoto Y，et al.Evidence for a role of developmental genes in the origin of obesity and body fat distribution[J].Proc Natl Acad Sci USA,2006,103(17):6676-6681

基金项目：①1.佳木斯大学研究生科技创新课题，编号： LM2015-023 ；2.佳木斯大学科学技术研究项目，编号：s2008-040。

作者简介：黄丽丽(1989～)女，河北承德人，在读硕士研究生。 通讯作者：谭丽艳(1969～)女,黑龙江佳木斯人，硕士，主任医师，硕士研究生导师。E-mail:tanliyan69@163.com。

中图分类号：R589;R575.5

文献标识码：B

文章编号：1008-0104(2016)03-0028-03

(收稿日期：2016-01-25)

Research in association of serum Glypican-4 with non-alcoholic fatty liver disease and metabolic syndrome

HUANGLi-li1,NANXiao-li2,MAGuang-yu1,TANLi-yan1

(1.Department of Endocrinology，the First Affiliated Hospital of Jiamusi University，Jiamusi 154003,China; 2. Affiliated Stomatology Hospital of Jiamusi University，Jiamusi 154002, China)

Abstract:Objective: To investigate the changes of serum Glypican-4(GPC-4) levels in Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) alone and NAFLD with metabolic syndrome(MS) patients. Methods: A total of 42 patients with NAFLD alone (Group A), 42 NAFLD patients with MS(Group B) and 40 normal controls(NC Group) were recruited. General and biochemical parameters were measured. Serum GPC-4 was determined by ELISA kits. NAFLD was diagnosed according to ultrasound findings. Results: Serum GPC-4 levels were increased from normal controls to group A, group B[(2.91±0.47)vs(2.95±0.31)vs(3.72±0.80)]. Compared with group A and normal controls, GPC4 was significantly increased in group B(P<0.01). Futher more, Pearson correlation analysis showed that GPC4 levels were positively correlated with body mass index(BMI), waist to hip ratio(WHR), systolic blood pressure(SBP), diastolic blood pressure(DBP), alanine aminotransferase(ALT), Aspartate transaminase(AST), triglyceride(TG), total cholesterol(TC), low-density cholesterol(LDL-C), uric acid(UA), fasting plasma glucose(FPG), fasting insulin(FINS), homeostasis model assessment of insulin resistance(HOMA-IR); and negatively correlated with high-density cholesterol(HDL-C). Multiple linear regression analysis showed that BMI, HOMA-IR were independent relevant factors for GPC-4(P<0.05). Conclusion: NAFLD patients tend to have overweight/obesity, lipid disorders, hyperuricemia and insulin resistance. NAFLD patients with MS are more susceptible to glucose and lipid metabolism disorder and higher IR. Increased serum GPC4 levels could be a novel regulatory mechanism by which fat acts to counteract insulin resistance.

Key words:non-alcoholic fatty liver disease; metabolic syndrome; Glypican-4; insulin resistance