紫外分光光度法测定咽炎颗粒剂中人参皂苷Re的含量

2016-08-03陈良华甄汉深许玉华北海市中医医院广西北海536000广西中医药大学广西南宁53000

广西中医药大学学报 2016年2期

陈良华，丘　　琴，甄汉深，许玉华（.北海市中医医院，广西北海　536000；.广西中医药大学，广西南宁　53000）

药学研究

陈良华1，丘琴2，甄汉深2，许玉华2
（1.北海市中医医院，广西北海536000；2.广西中医药大学，广西南宁530001）

［目的］建立咽炎颗粒剂中人参皂苷Re的含量测定方法。［方法］采用紫外-可见分光光度法在550 nm处测定人参皂苷Re的含量。［结果］人参皂苷Re在0.05～0.25μg范围内呈良好的线性关系（r2=0.9848），平均加样回收率为98.52%，RSD= 0.36%（n=6）。［结论］该法操作简便快速，专属性强，适用于咽炎颗粒剂的质量控制。

咽炎颗粒剂；人参皂苷Re；含量测定

岗梅，又名岗梅根、点秤星、秤星树，系冬青科植物梅叶冬青Ilex asprella（Hook.et Arn.）Champ.ex Benth.的干燥根和茎［1-2］，是我国民间的一种常用中草药，其性寒、味甘苦，具有清热解毒、活血生津、消肿止痛等功效。岭南地区常用于治疗感冒、高热烦渴、扁桃体炎、咽喉炎等［3］。咽炎颗粒为北海市中医医院的院内制剂，由岗梅单方制成，用于风热引起的急性咽炎、扁桃体炎、流行性腮腺炎等症，疗效显著。本实验以岗梅的主要有效成分人参皂苷Re作为咽炎颗粒剂的质量控制指标［4］，建立了本品中人参皂苷Re的紫外-可见分光光度含量测定方法，可用于该制剂的质量控制。现报道如下。

1　　实验材料

1.1仪器紫外-可见分光光度计8453（美国安捷伦公司）；电热恒温水浴锅HWS-26（上海一恒科学有限公司）。

1.2药材与试药岗梅饮片购于广西建一药业有限责任公司，经本院中药库鉴定为冬青科冬青属植物梅叶冬青Ilex asprella（Hook.et Arn.）Champ.ex Benth.的根茎；人参皂苷Re对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用）；白糖（市售品）；其他试剂均为分析纯。

2　　实验方法

2.1咽炎颗粒剂的制备取岗梅饮片加水煎煮两次，第一次2 h，第二次1.5 h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，加入乙醇使成含醇量为60%，搅拌，静置18 h使沉淀，取上清液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.35～1.42的稠膏，加入白糖制成颗粒，干燥60～80℃，即得。每10 g颗粒相当于含原药材16 g。

2.2含量测定

2.2.1人参皂苷Re对照品溶液的制备取人参皂苷Re对照品5mg（精确至0.1 mg），置10ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，作为人参皂苷Re对照品储备液。

2.2.2供试品溶液的制备取咽炎颗粒1.0 g，精密称定，加水20ml溶解，以水饱和的正丁醇50m l分3次萃取，再以稀氨水（2→50）50 m l分3次萃洗，最后以正丁醇饱和的水50 m l分3次萃洗，蒸干正丁醇，残渣以甲醇定容至10ml，作为供试品溶液。

2.2.3最大吸收波长的确定精密吸取0.50ml对照品储备液于试管中，将试管置于冰水浴中，精密加入8%香草醛乙醇液0.50m l和77%硫酸乙醇溶液5.0ml，摇匀，置60℃恒温水浴中加热10 min，立即转移至冰水浴中冷却15 min，于400～800 nm范围内扫描吸收光谱，确定最大吸收波长为550 nm（见图1）。

图1　　对照品溶液的最大吸收光谱

2.2.4标准曲线的绘制精密吸取对照品储备液0.10 m l、0.20m l、0.30 m l、0.40 m l、0.50 m l于试管中，将试管置于冰水浴中，分别加入甲醇0.40 m l、0.30 m l、0.20m l、0.10 m l、0 m l，加入8%香草醛乙醇液0.50m l和77%硫酸乙醇液5.0m l，摇匀，置60℃恒温水浴中加热10 min，立即移入冰水浴中冷却15 min，550 nm下测定吸光度值，以进样量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，见图2。并求得标准曲线回归方程为：Y=3.8527X+0.0914（r2=0.9848）。结果显示，人参皂苷Re 在0.05～0.25μg范围内呈良好的线性关系。

图2　　标准曲线图

2.2.5精密度实验精密吸取对照品溶液0.50m l，按上述方法显色，测定吸光度值6次，吸光度值分别为：0.43146、0.43183、0.43225、0.43106、0.43109、0.43067，RSD=0.13%（n= 6）。精密吸取供试品溶液0.50 ml，按上述方法显色，测定吸光度值6次，吸光度值分别为：0.81055、0.81144、0.81290、0.81523、0.81431、0.81425，RSD=0.22%（n=6）。表明仪器精密度良好。

2.2.6稳定性试验精密吸取供试品溶液0.50ml，按上述方法显色，测定2 h，1 h内每5min测定1次，1～2 h每15min测定1次，共测定17次。测定结果见图3。