盘县猪牛羊口蹄疫免疫抗体监测情况与效果分析

胡鹏飞，李文举

(1.贵州省盘县农业局动物疫病预防控制中心，贵州 盘县 553537;2.贵州省盘县农业局兽药饲料监察所，贵州 盘县 553537)

盘县猪牛羊口蹄疫免疫抗体监测情况与效果分析

胡鹏飞1，李文举2

(1.贵州省盘县农业局动物疫病预防控制中心，贵州 盘县 553537;2.贵州省盘县农业局兽药饲料监察所，贵州 盘县 553537)

为掌握盘县辖区内猪、牛、羊口蹄疫疫病免疫抗体水平情况，做好预警预报工作，把握疫情动态，为科学防控口蹄疫疫情提供依据，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪牛羊口蹄疫免疫抗体。结果显示，本辖区内猪、牛、羊口蹄疫免疫抗体合格率均达到国家规定标准。

猪牛羊;口蹄疫;免疫抗体;分析

口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus，FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，主要侵害偶蹄兽，偶见于人和其他动物。为了解盘县动物口蹄疫免疫状况，科学评价免疫抗体水平和效果，2013—2015年，我们对盘县猪、牛、羊进行了口蹄疫(FMD)免疫抗体水平检测，以期为制定FMD防控措施提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 样品采集 动物种类:猪、牛、羊。样品类型:血清。采集地点:盘县39个乡镇的部分规模养殖场、小区、屠宰场、散养户。

1.2 检测方法及试剂盒 FMD免疫抗体检测使用液相阻断ELISA方法，试剂盒购自中国农业科学院兰州兽医研究所 (批号:20130327、20140927、20150927)。

1.3 操作步骤与判定标准

1.3.1 操作步骤:按照FMD免疫抗体检测使用液相阻断ELISA(Liquid－phase blocking ELISA)说明书的要求进行。

1.3.2 结果判定

1.3.2.1 试验成立的标准:每次试验，每块板须设立病毒抗原对照和阴性血清对照。病毒抗原对照至少2个孔的OD值在1.0以上(最好在1.0～1.6之间)，阳性对照抗体滴度应在1∶1 024，阴性对照抗体滴度应小于1∶4。

1.3.2.2 病毒抗原对照平均OD值50%计算(临界值):抗原对照孔是4孔，分别弃去最高和最低OD值，计算剩余2孔的平均值，再除以2，即为50%对照值。

1.3.2.3 判定标准:以病毒抗原对照平均OD值的50%为临界值。被检血清OD值大于临界值为阴性，小于或等于为阳性，阳性孔的OD值等于临界值时所对应的稀释度为该份血清的抗体滴度。如病毒抗原对照平均的OD值为1.2，则其50%为0.6。如待检血清在1∶128时的OD值为0.6，则该份待检血清的抗体滴度为1∶128。若临界值处于2个之间，则抗体滴度取中间值。

1.3.2.4 ELISA抗体滴度与免疫动物免疫保护率的关系:猪、牛、羊ELISA抗体效价≥1∶128时，免疫抗体在保护范围内;ELISA抗体效价≤1∶128时，免疫抗体不在保护范围内，需要进行补免;抗体效价在1∶22～1∶90为50%保护效价范围，需要进行强化免疫。

1.4 数据分析 使用SPSS 17.0分析软件分别对不同年份、不同样本来源、不同品种、不同地区和不同季节等血清抗体检测数据及病原核酸检测数据进行统计及相关性分析。

2 结果与分析

2.1 不同年份FMD免疫效果比较 应用ELISA方法，对盘县39个乡(镇、街道)105个养殖场(小区)、444户散养户的猪、牛、羊采集血清6 461份进行FMD免疫抗体检测，按不同的年份进行比较，结果见表1。

表1 不同年份FMD免疫抗体检测结果

由表1可知，2013—2015年，各年猪FMD免疫抗体合格率分别为 78.54%(355/452)、87.68%(719/820)和 92.34%(1 036/1 122)，2015年 ＞2014年＞2013年，并且2015年合格率极显著高于2013年;各年牛 FMD免疫抗体合格率分别为64.43%(297/461)、82.12%(450/548)和 90.27%(501/555)，2015年＞2014年＞2013年，并且2015年合格率极显著高于2013年，2014年合格率显著高于2013年;各年羊FMD免疫抗体合格率分别为71.26%(419/588)、83.13%(798/960)和 88.17%(842/955)，2015年＞2014年＞2013年，并且2015年合格率显著高于2013年。除2013年牛血清样本免疫合格率总体水平低于农业部≥70%要求，其他血清样本免疫合格率总体水平高于农业部≥70%要求。

2.2 不同样本来源 FMD免疫效果比较 应用ELISA方法，对猪、牛、羊采集血清6 461份进行FMD免疫抗体检测，按不同样本来源进行比较，结果见表2。

由表2可知，种畜场、规模场、养殖小区、散养户和屠宰场猪FMD免疫抗体合格率分别为:96.51%(359/372)、92.17%(848/920)、80.74%(373/462)、76.52%(352/460)和58.33%(105/180)，种畜场抗体合格率极显著高于屠宰场和散养户(P＜0.01)，显著高于养殖小区(P＜0.05)，屠宰场未达到国家农业部≥70%标准;规模场、养殖小区和散养户牛FMD免疫抗体合格率分别为:90.64%(368/406)、80.15%(210/262)和 78.57%(704/896)，均达到了国家农业部≥70%标准;种畜场、规模场、养殖小区和散养户羊FMD免疫抗体合格率分别为:94.44%(459/486)、89.93%(964/1072)、78.21%(219/280)和 71.13%(473/665)，种畜场和规模场合格率极显著高于散养户(P＜0.01)，均达到了国家农业部≥70%标准。

表2 不同样本来源FMD免疫抗体检测结果

2.3 不同季节FMD免疫效果比较 应用ELISA方法，对猪、牛、羊采集血清6 461份进行FMD免疫抗体检测，按不同的年份进行比较，结果见表3。

表3 不同季节FMD免疫抗体检测结果

由表3可知，春季和秋季猪FMD免疫抗体合格率分别为:89.79%(1 117/1 244)和 85.48%(983/1 150)，均达到了国家农业部≥70%标准;春季和秋季牛FMD免疫抗体合格率分别为:86.51%(763/882)和 81.09%(553/682)，均达到了国家农业部≥70%标准;春季和秋季羊FMD免疫抗体合格率分别为:80.05%(1 043/1 303)和74.08%(889/1 200)，均达到了国家农业部≥70%标准。

2.4 不同乡镇FMD型免疫效果比较 应用ELISA方法，对盘县10个乡(镇、街道)68个养殖场(小区)的猪、牛、羊采集血清4 187份进行 FMDAsiaⅠ型免疫抗体检测，按不同乡镇进行比较，结果见表4。

表4 不同乡镇FMD型免疫抗体检测结果

2.5 不同品种FMD免疫效果比较 应用ELISA方法，对盘县9个乡(镇、街道)125个养殖场(小区)的猪、牛、羊采集血清6 075份进行FMD免疫抗体检测，按不同的品种进行比较，结果见表5。

表5 不同品种FMD免疫抗体检测结果

由表5可知，长白猪和杜长大三元杂交猪FMD免疫抗体合格率分别为:86.94%(939/1 080)和89.90%(1 086/1 208)，均达到了国家农业部≥70%标准;西门塔尔和关岭黄牛FMD免疫抗体合格率分别为:82.83%(381/460)和 83.93%(705/840)，均达到了国家农业部≥70%标准;湖羊和贵州黑山羊FMD免疫抗体合格率分别为:74.83%(770/1 029)和78.88%(1 150/1 458)，均达到了国家农业部≥70%标准。

3 讨论

3.1 本试验应用LB－ELISA方法对2013—2015年贵州省盘县的猪、牛、羊血清样本进行FMD免疫抗体检测，结果显示，2013—2015年猪、牛、羊血清免疫抗体合格率均呈现逐年上升的现象，除2013年牛血清样本FMD免疫抗体合格率为64.43%外，其他血清样本免疫抗体合格率均达到了国家农业部≥70%标准。对盘县10个乡(镇)采集的血清样本进行FMD免疫抗体检测，结果显示，除大山镇羊血清样本免疫抗体合格率为65.83%外，其他血清样本免疫抗体合格率均达到了国家农业部≥70%标准。

3.2 从不同样本来源FMD免疫抗体检测结果来看，种畜场、规模场免疫抗体合格率明显高于散养户和屠宰场，且屠宰场猪FMD免疫抗体合格率只有58.33%，这可能与种畜场及规模场良好的饲养管理水平有关，另外，屠宰场的血清样本来源较广，有的猪在采血时可能还未免疫FMD疫苗或者采血时已超过最佳采样时间，所以导致其免疫抗体水平较低。本试验分别对不同品种的猪、牛、羊FMD免疫抗体合格率进行了比较，杜长大三元杂交猪免疫抗体合格率高于长白猪，关岭黄牛免疫抗体合格率高于西门塔尔，贵州黑山羊免疫抗体合格率高于湖羊，但是差异均不显著。

3.3 通过对盘县猪、牛、羊口蹄疫免疫抗体监测结果表明，2013年以来盘县FMD免疫抗体水平整体呈上升趋势，但是散养户和屠宰场免疫抗体水平依然较低，应加以重视。

S851.31+3

B

1007－1474(2016)01－0037－04

2015－10－22