血清IL-22水平与急性戊型肝炎病毒感染患者肝功能损害、疾病进展及转归的相关性

2016-07-28宋玉莲白若岑

肝脏 2016年5期

宋玉莲　白若岑

宋玉莲白若岑

110032辽宁沈阳辽宁中医药大学附属医院临床检验中心(宋玉莲)；中国医科大学(白若岑)

【摘要】目的探讨血清白介素-22(IL-22)水平同急性戊型肝炎病毒(HEV)感染患者肝功能损害、病情及转归的相关性。方法研究对象为我院收治的62例急性HEV感染患者，其中32例伴有肝硬化(A组)，30例为单纯性HEV感染(B组)，另选取同期在我院进行健康体检的30名健康志愿者作为健康对照组及20例单纯性代偿期肝硬化患者作为肝硬化对照组，对所有研究对象进行血清干扰素-γ(IFN-γ)、IL-22、白介素-6(IL-6)检验，对检验结果进行对比分析。结果A、B两组的IL-22水平均显著高于健康对照组及肝硬化对照组(P<0.05)；A组的IL-6水平显著高于健康对照组及肝硬化对照组(P<0.05)；A组患者中，有14例出现慢加急性肝功能衰竭(ACLF)，18例未出现ACLF。伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均显著高于不伴ACLF患者(P<0.05)。伴ACLF组患者治疗9周后的IL-22水平明显降低(P<0.05)。结论急性HEV感染引起的肝脏炎性损伤有IL-22的参与，IL-22水平的高低与患者病情的严重程度、预后情况存在密切联系，临床可将其作为评估HEV患者病情转归的有效指标。

【关键词】肝功能损害；急性；HEV；血清IL-22

急性戊型肝炎是由HEV感染引起的急性自限性肝脏疾病，HEV与其他肝炎病毒一样，均主要由病毒介导的免疫反应而引起损伤。存在慢性肝脏基础疾病的患者在合并感染HEV后会造成肝病急剧进展，导致严重的肝功能失代偿、肝功能衰竭，最终造成预后不良[1]。HEV的致病机制主要为T细胞介导的免疫反应，患者病情的加重与缓解均取决于Th细胞分泌的细胞因子谱所产生的免疫应答性质及强度。IL-22由Th22、Th17细胞分泌的效应分子，其发挥着抵御微生物入侵，修复组织损伤，促进急性期反应等作用[2]。本研究旨在明确IL-22水平变化与急性HEV感染患者病情、肝功能损害的相关性，现报道如下。

资料和方法

一、一般资料

研究对象为我院2010年10月—2015年10月收治的62例急性HEV感染患者。(1)纳入标准：HEV IgG滴度升高3倍以上，或HEV IgM阳性；符合急性HEV感染诊断标准，并经临床、超声检查、肝组织病理活检确诊；HEV感染前3个月无慢性乙型肝炎活动；单纯HEV感染者无肝功能异常或肝炎病史。(2)排除标准：合并溃疡性结肠炎、银屑病、系统性红斑狼疮者；妊娠期女性；合并肝细胞癌或其他恶性肿瘤者；HCV、HIV、HAV及其它可引起肝脏急性炎症的病毒感染者。62例患者中，32例合并肝硬化(A组)，男27例，女5例，平均年龄(45.84±12.42)岁，30例为单纯性HEV感染(B组)，男24例，女6例，平均年龄(44.54±11.73)岁。另选取同期在我院进行健康体检的30名健康志愿者作为健康对照组，男25名，女5名，平均年龄(45.22±11.90)岁。选取20例单纯性代偿期肝硬化患者作为肝硬化对照组，男16例，女4例，平均年龄(45.37±11.74)岁。本研究通过了医院伦理委员会批准，研究对象均知情，并签署了知情同意书。

二、方法

急性HEV感染患者入院后均行标准的抗病毒治疗，收集患者的年龄、性别及住院期间的并发症、常规生化指标(WBC、PTA、PLT、Alb、ALT等)等临床资料。同期将检测剩余血清送入血清样本库保存，以备IL-22、IL-6、IFN-γ检验。肝硬化对照组在入院时采集血清标本，健康对照组在进行健康体检时采集血清标本完成常规生化指标及IL-22、IL-6、IFN-γ指标检测。

IL-22、IL-6、IFN-γ指标检测方法：使用相应的酶联免疫吸附试验检测试剂盒(IL-22、IL-6、IFN-γ)进行检验，试剂盒由美国Ray Biotech 公司提供。室温下严格按照试剂盒说明书进行操作，各样本设复孔3个，并设标准品孔和空白对照，最终取3个复孔检测结果的平均值。建立标准曲线，并根据曲线计算出每个样本的IL-22、IL-6、IFN-γ浓度。在450 nm的波长下，使用全光谱酶标仪检测OD值。

三、统计学处理

研究数据运用SPSS 20.0软件处理，计数资料比较用卡方检验，计量资料比较用t检验，P<0.05差异有统计学意义。

结果

一、各组的IL-22、IL-6、IFN-γ水平结果比较

A、B两组的IL-22水平均显著高于健康对照组和肝硬化对照组(P<0.05)；A组的IL-6水平显著高于健康对照组和肝硬化对照组(P<0.05)；A组的IL-22、IL-6水平均显著高于B组(P<0.05)；4组的IFN-γ水平比较差异无明显统计学意义(P>0.05)。见表1。

二、ACLF与IL-22、IL-6、IFN-γ的关系

A组患者中，有14例出现ACLF，18例未出现ACLF。伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均显著高于不伴ACLF患者(P<0.05)；伴ACLF与不伴ACLF患者的IFN-γ水平比较差异无明显统计学意义(P>0.05)。见表2。

三、伴ACLF患者的IL-22水平变化

对伴ACLF患者的IL-22水平进行持续动态监测，每周进行1次IL-22检测。伴ACLF患者经治疗后，病情逐渐好转，出血、腹胀、乏力症状均显著改善。伴ACLF组患者首次检测的IL-22水平为(164.35±13.54) pg/mL，持续治疗9周后，检测的IL-22水平为(46.4±21.8) pg/mL，明显低于首次检测结果，差异具有统计学意义(P<0.05)。

讨论

慢性肝炎病毒感染容易引起肝硬化和肝纤维化，对肝功能造成严重损害。国外研究资料显示，肝硬化合并急性HEV感染后容易引起ACLF，而发生ACLF患者约1/2在3个月内死亡。现阶段，临床认为急性HEV感染造成的炎症主要与T细胞介导的免疫性损伤有关，但对于其具体的致病机制仍无完全明确的阐释[3]。近期研究显示[4]，免疫调节细胞Th22与Th17在功能、数量方面的平衡，及其分泌的关键效应分子在肝炎病毒相关性肝病、移植排斥反应、自身免疫性疾病的发生及发展过程中均发挥着至关重要的作用。Th22和Th17细胞均会分泌一种重要的效应分子IL-22，目前IL-22已被临床证实在类风湿关节炎、银屑病等炎性疾病中发挥着组织修复、免疫调节、抗炎等功能，由于肝细胞等实质细胞会特异性表达IL-22受体，所以IL-22在肝病中的作用也越来越受到临床的关注[5]。

关于IL-22与肝病关系的研究普遍以HBV和HCV引起的急慢性感染为焦点，甚少有学者研究急性HEV感染患者的IL-22表达规律及临床意义，并且对于IL-22在肝病中到底是发挥抗炎还是促炎作用均存在较大争议。有学者认为[6]，IL-22在急性乙型肝炎的发生、发展中所发挥的作用以促炎为主，IL-22能够刺激免疫细胞分化聚集达到清除被病毒感染肝细胞的目的，但是IL-22在慢性乙型肝炎的发生发展中所发挥的作用则以抗炎为主，其能促进肝细胞增殖缓解慢性炎症损伤。由于急性HEV感染与急性HBV感染较为相似，所以推测IL-22在急性HEV感染中所发挥的作用也可能以促炎为主，但具体是以组织修复作用还是以促炎作用为主，还与其自身浓度、局部环境、细胞来源等因素有关[7]。

表1　4组研究对象的IL-22、IL-6、IFN-γ水平比较(±s，pg/mL)

注：1)与健康对照组比较，P<0.05；2)与肝硬化对照组比较，P<0.05；3)与B组比较，P<0.05

表2　伴ACLF者与未伴ACLF者的IL-22、IL-6、IFN-γ水平比较(±s，pg/mL)

注：表示与不伴ACLF组比较，*P<0.05

目前，临床已证实IL-6是参与肝脏损伤修复过程的重要细胞因子，同时也是触发CD4+T细胞向Th22细胞分化，并刺激Th22和Th17细胞分泌IL-22的调控因子，其与IL-22有共同的信号转导通路，二者可发挥协同效应[8]。IFN-γ是由Th1细胞分泌的细胞因子，其具有介导CTL效应的作用，IFN-γ的编码基因与IL-22基因距离很近，且IL-22与IFN-γ转录起始位点相同。在本研究中，选择了IL-22及其来源细胞分化相关的细胞因子IL-6和转录起始位点相同的IFN-γ，对其在急性HEV感染患者的表达规律进行了分析。结果显示，A、B两组的IL-22水平均显著高于健康对照组，A组的IL-22、IL-6水平均显著高于B组(P<0.05)。说明急性HEV感染确实会引起IL-22水平异常升高，而合并肝硬化的急性HEV感染患者的IL-22、IL-6水平比单纯急性HEV感染患者更高，并且IL-22的升高幅度比IL-6更大，提示IL-22对病情的判断能力可能比IL-6更加敏感和稳定。研究结果还显示，4组患者的IFN-γ水平比较差异均无明显统计学意义(P>0.05)，说明急性HEV感染并不会引起IFN-γ分泌增加，其并不会增加Th1型免疫反应优势，由此推测可能是因为Th17和Th22细胞在外周血的优势表达造成了Th1与Th17、T22细胞轴免疫失调。本研究结果还显示，伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均显著高于不伴ACLF患者，并且随着ACLF患者病情的好转，IL-22的水平也会明显降低[9]，说明IL-22参与了急性HEV感染后的严重肝损伤过程，其与患者的病情变化、预后情况有着密切的关系[10]。

综上所述，急性HEV感染引起的肝脏炎性损伤有IL-22的参与，IL-22水平的高低与患者病情的严重程度、预后情况存在密切联系，临床可将其作为评估HEV患者病情转归的有效指标。

参考文献

[ 1 ]王琦,王煜,刘娅，等.替比夫定治疗慢性乙型肝炎过程中患者血清IL-22的变化及意义.包头医学院学报, 2014, 30:37-39.

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[ 3 ]张自然,郭世民,赵和平,等.HBV相关肝硬化患者血清IL-22水平及临床意义.肝脏, 2015, 20:513-516.

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[ 5 ]邢微微,朱贺,龙民慧,等.重组人IL-22对大鼠酒精性肝炎的治疗效果评价.军事医学, 2011, 35:607-610.

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[ 7 ]邢培祥,王传新,王立水,等.IL-1B及IL-1RN内含子2基因多态性在HCV相关肝病中的分布特征.中华微生物学和免疫学杂志, 2014, 34:186-193.

[ 8 ]邓意志,徐慧.白细胞介素22对晚期肝硬化患者预后预测价值研究.中国现代医学杂志, 2014, 24:35-40.

[ 9 ]赵孝荣,吴继周.白细胞介素22在HBV相关性肝病中的表达及意义.中国医学创新, 2015, 12:1-3.

[10]华忠,顾锡炳,汤琴,等.慢性乙型肝炎患者不同HBV DNA水平诱导细胞免疫不同及其意义.实用医学杂志, 2013, 29:3718-3720.