不同肝脏疾病血清GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平的表达
2016-07-28满冬亮王齐晖
满冬亮 王齐晖
不同肝脏疾病血清GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平的表达
满冬亮王齐晖
110001沈阳中国医科大学附属第一医院检验科
【摘要】目的研究不同肝脏疾病血清高尔基蛋白73(GP73)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)、甲胎蛋白(AFP)及α-L-岩藻糖苷酶(AFU)表达水平及临床意义。方法选取我院于2014年1月至2015年11月收治的61例急性肝炎组,89例慢性肝炎组,26例肝硬化组,32例肝癌组及同期进行体检的60名健康对照组为研究对象,对5组分别进行单项血清GP73、AFP-L3、AFP及AFU检测和联合检测,并使用ROC曲线对检测结果进行评价。结果肝癌组GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平与其他肝脏疾病组和健康对照组相比差异均有统计学意义(P均<0.05);联合检测诊断的灵敏度、特异度比单项检测都高,其中灵敏度达90.6%,特异度达89.0%。GP73、AFP-L3、AFP及AFU指标的ROC曲线面积分别为0.811、0.774、0.643、0.609;3项联合指标的ROC曲线面积为0.957。结论GP73、AFP-L3、AFP及AFU在肝脏疾病发生和发展中发挥重要作用,联合检测区分肝癌与其他肝脏疾病价值显著,能显著提高诊断的灵敏度和精确度,ROC曲线评价能直观呈现诊断结果。
【关键词】肝脏疾病;GP73;AFP-L3;AFP;AFU
肝脏疾病包括肝炎、肝硬化、肝癌等,是临床上常见的消化系统疾病之一。其中,肝癌在我国人群中的年发病率高达37.6/10万,且病死率较高,肝癌的病情潜伏期较长,临床发现后,有三分之二以上的患者属于晚期。因此,做好早期诊断极为关键。目前,临床上常用的诊断肝癌的实验室指标有高尔基蛋白73(GP73)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)、甲胎蛋白(AFP)及α-L-岩藻糖苷酶(AFU)等,但是文献报道[1-2]急慢性肝炎、肝硬化患者也会出现GP73等异常。本研究通过分析不同肝脏疾病患者血清GP73、AFP-L3、AFP及AFU表达水平,旨在为肝脏疾病诊断提供依据,现报道如下。
资料和方法
一、一般资料
选取我院于2014年1月至2015年11月收治的61例急性肝炎患者(急性肝炎组),89例慢性肝炎患者(慢性肝炎组),26例肝硬化患者(肝硬化组),32例肝癌患者(肝癌组)及同期进行体检的60名健康对照者(健康对照组)为研究对象。所有研究对象均在知情自愿情况下参与本次研究,排除妊娠期或者哺乳期妇女,健康对照组排除肝炎病毒携带者。急性肝炎组男性34例,女性27例,年龄31~72岁,平均年龄为(49.3±2.1)岁;慢性肝炎组男性48例,女性41例,年龄24~65岁,平均年龄为(48.2±2.0)岁;肝硬化组男性15例,女性11例,年龄26~66岁,平均年龄为(48.6±1.9)岁;肝癌组男性18例,女性14例,年龄31~76岁,平均(49.1±2.3)岁;健康对照组男性37例,女性23例,年龄29~68岁,平均(48.7±1.8)岁。5组研究对象基本资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
二、方法
参与研究的所有对象要在空腹12 h,采取3 mL静脉血液,静置30 min后,4℃ 3000 r/min离心后,分离血清标本,-80℃保存。GP73采用酶联免疫吸附法(酶标仪购自深圳雷杜医疗器械有限公司,试剂盒购自于美国R&D公司);AFP-L3采用亲和吸附离心管法(亲和吸附离心管购自于北京热景生物技术有限公司);AFP采用化学发光法(德国 Liaison 索林全自动化学发光分析仪,质控品和配套试剂也采用该公司提供);AFU采用MG-CNPF法(试剂盒购自上海一研生物技术有限公司)。比较5组GP73、AFP-L3、AFP及AFU。
阳性预测值上,GP73血清要高于106.5 ng/mL、AFP-L3血清要高于9.2%、AFP血清要高于9.6 ng/mL,AFU血清要高于23.5 U/mL。联合检测中阳性预测值高于4项单测中的任何1项就表示检测结果是阳性。应用ROC曲线评价GP73、AFP-L3、AFP及AFU联合检测对肝癌诊断价值。诊断界点移动后,能获得更多的特异度和灵敏度,横坐标由特异度表示,纵坐标由灵敏度表示,对各个点连接后绘制曲线,对曲线下的面积进行计算,面积计算的结果与诊断价值成正相关,即面积越大,诊断价值越高。
三、统计学方法
通过SPSS 19.0软件实现了数据库的录入及统计分析,组间构成比较用卡方检验,组间疗效比较用等级资料的秩和检验分析,计量资料以均数±标准差表示,P<0.05表示差异具有统计学意义。
结果
一、5组的GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平比较
检测结果显示,与健康对照组相比,肝脏疾病组GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平均升高,差异具有统计学意义(P均<0.05)。肝癌组GP73、AFP-L3高于急性肝炎组、慢性肝炎组、肝硬化组,AFP高于急性肝炎组、慢性肝炎组,但是低于肝硬化组,AFU高于急性肝炎组、肝硬化组,但是低于慢性肝炎组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。肝硬化组GP73、AFP-L3、AFP高于急性肝炎组、慢性肝炎组,AFU水平低于急性肝炎组、慢性肝炎组,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。除AFP-L3外,慢性肝炎组GP73、AFP及AFU水平均显著高于急性肝炎组(P均<0.05)。见表1。
二、血清单项指标检测和联合检测对肝癌的诊断学价值
单项指标对肝癌诊断结果显示,4项血清指标的性能表现不一,就灵敏度上,AFP-L3最高;特异度上,GP73最高;阳性预测值上,GP73最高;阴性预测值上,AFP-L3最高;4项联合检测结果显示,联合检测诊断的灵敏度、特异度比单项检测都高,其中灵敏度达90.6%,特异度达89.0%,阳性和阴性预测值比单项检测都有一定程度的提高。见表2。
三、血清单项和联合检测的ROC曲线
ROC曲线检测的横坐标以特异度为参照,纵坐标以灵敏度为参照,在SPSS 19.0软件上作ROC曲线图,计算出曲线下的面积。GP73、AFP-L3、AFP及AFU指标的ROC曲线面积分别为0.811、0.774、0.643、0.609;3项联合指标的ROC曲线面积为0.957。血清指标单项检测的ROC曲线见图1,联合检测的ROC曲线见图2。
表1 5组GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平比较(±s)
注:与健康对照组比较,★P<0.05;与肝癌组相比,▲P<0.05
表2 4项血清指标对肝癌的诊断性能评价(%)
图1 血清指标单项检测的ROC曲线
图2 联合检测的ROC曲线
讨论
肝癌是由于乙型肝炎、肝硬化、黄曲霉菌等因素导致的发生于肝脏的肿瘤,好发于30~50岁年龄段。据统计,全球每年死于肝癌的患者约26万,而我国每年有14万患者死于此病。因此,如何有效治疗肝癌,提高患者生存率成为临床工作者研究的热点。目前研究表明,在肝癌早期,患者肿瘤体积较小,给予积极有效治疗,能够显著提高生存几率,而中晚期肝癌大多不能够切除或者切除效果较差,但是肝癌患者早期的临床症状,如纳差、腹胀、乏力等,与肝炎、肝硬化具有较大的相似性,通过临床表现无法进行鉴别诊断。因此,如何早期诊断成为临床科研工作者亟待解决的关键问题。
GP73、AFP-L3、AFP及AFU等血清学指标对肝癌的诊断具有重要的参考意义。其中GP73 是存在于高尔基体的一种跨膜蛋白,在正常肝组织表达很少甚至无表达,肝癌患者血清中GP73 水平显著升高。AFP-L3是肝细胞癌的特异性蛋白,相关临床研究结果显示,该蛋白和肝癌的关系最为紧密。AFP是临床上诊断肝癌最重要的血清学肿瘤标志物,已被广泛用于肝癌的普查、诊断和监测。AFU是一种溶酶体酸性水解酶,在肝肾组织中较高,动物实验发现肝癌组织中AFU活力显著升高,且与肿瘤生长期有关[3-6]。本研究通过分析肝癌组、肝硬化组、肝炎组及健康对照组GP73、AFP-L3、AFP及AFU表达差异表明,肝脏疾病组GP73、AFP-L3、AFP及AFU水平均升高,差异具有统计学意义(P均<0.05),提示其在肝脏疾病的发生中发挥重要作用。文献报道[7],GP73、AFP-L3、AFP及AFU在肝炎、肝硬化以及肝癌进展过程中血清水平都会上调,可能存在着交叉重叠,造成使用单一指标诊断肝癌时出现假阳性或者假阴性反映,如常用的AFP,特异度低于60%。本研究中肝癌组GP73、AFP-L3高于急性肝炎组、慢性肝炎组、肝硬化组,与文献报道基本一致[8],提示将其用于区分肝癌与其他肝脏疾病有助于提高诊断准确率。AFP高于急性肝炎组、慢性肝炎组,但是低于肝硬化组,AFU高于急性肝炎组、肝硬化组,但是低于慢性肝炎组,差异均具有统计学意义(P均<0.05),提示单一使用AFP及AFU鉴别肝癌与其它肝脏疾病可能会出现漏诊误诊。
单项指标对肝癌诊断结果显示,4项血清学指标的性能表现不一。就灵敏度上,AFP-L3最高;特异度上,GP73最高;阳性预测值上,GP73最高;阴性预测值上,AFP-L3最高;也表明GP73、AFP-L3作为一项单项指标,在肝癌与其它肝脏疾病鉴别诊断中的价值高于AFU及AFP。4项联合检测结果显示,联合检测诊断的灵敏度、特异度比单项检测都高,其中灵敏度达90.6%,特异度达89.0%,阳性和阴性预测值比单项检测都有一定程度地提高,表明联合检测对肝脏疾病区分诊断的价值最优。但是联合检测中的阳性预测值仍较低,表明在联合检测中必须注重假阳性的问题,临床上可以结合其他手段进行检测,如超声等。ROC曲线是不同二分类方式绘制的一种曲线,曲线的横坐标由特异度表示,曲线的纵坐标由灵敏度表示,ROC曲线可从灵敏度和特异性两个标准来评价一个或多个效能,通过计算曲线下的面积能客观地展现出诊断结果[9]。GP73、AFP-L3、AFP及AFU指标的ROC曲线面积分别为0.811、0.774、0.643、0.609,3项联合指标的ROC曲线面积为0.957,表明联合指标检测的ROC曲线有较高的诊断价值,本研究结果与以往文献数据相符[10]。
综上所述,GP73、AFP-L3、AFP及AFU在肝脏疾病发生发展中发挥重要作用,在对肝癌与其他肝脏疾病鉴别诊断中,使用GP73、AFP-L3、AFP及AFU联合检测能显著提高诊断的灵敏度和精确度,这比单项检测的价值更高。
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(本文编辑:赖荣陶)
通信作者:满冬亮, Email: gbcdbj@sina.com
(收稿日期:2015-12-29)
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