Livin基因与宫颈癌前病变及宫颈癌关系的研究

曾艳　梁桂云

【摘要】 目的 探讨凋亡抑制基因 Livin与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系。方法 64例宫颈癌、56例宫颈上皮内瘤变和 32例正常宫颈患者作为研究对象。用免疫组织化学 SABC法进行Livin 基因表达检测， 比较三者之间表达的差异， 探讨Livin 表达与正常宫颈、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者的病理相关关系。结果 宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中 Livin的表达率分别为70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比较差异有统计学意义（P<0.05）。Livin在宫颈癌组织与宫颈上皮内瘤变组织中的表达率比较差异无统计学意义（P>0.05）。Livin基因表达与宫颈癌的淋巴结转移及宫颈癌的临床分期具有相关性（r=0.56、0.52， P<0.05）。Livin基因表达与宫颈癌的病理分型、病理分级、患者年龄无明显相关性（P>0.05）。结论 Livin 基因在宫颈癌的发生中具有抑制肿瘤细胞凋亡的作用， 可以做为宫颈癌诊断及预后的相关指标。

【关键词】 Livin基因；宫颈上皮内瘤变；宫颈癌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.070

Livin是近年来发现的人类凋亡抑制蛋白 （IAP）家族的新成员之一， 认为与肿瘤的发生、进展及预后有密切联系。Livin蛋白能够与 Caspase蛋白结合， 抑制细胞凋亡， 对Livin研究在肿瘤发生、发展及预后有着重要的作用[1]。本研究拟采用免疫组化方法探讨 Livin在宫颈癌组织中及正常宫颈组织中的表达， 并研究其与年龄、组织类型、病理分级、临床分期、淋巴结转移等临床生物学行为及预后之间的关系和其临床意义， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取 2004～2012年本院治疗的 64例宫颈癌患者， 年龄 35～72岁， 平均年龄 （51.7±6.8）岁， 组织学分型为宫颈鳞癌；临床分期：Ⅱa期14例， Ⅱb期8例， Ⅲa期42例；病理分型：溃疡型 8例， 结节型16例， 菜花型 24例， 混合型16例。宫颈上皮内瘤变患者56例， 另选取 32例正常宫颈组织患者作为对照。

1. 2 实验方法 切取活组织检查标本， 用 10%甲醛固定， 石蜡包埋后切片。采用SABC。一抗为兔抗人 Livin多克隆抗体 （武汉博士德公司）， 用 PBS液作为阴性对照。采用免疫组化染色。免疫组化方法参照 SABC试剂盒说明进行， Livin 多克隆抗体按 1∶50 稀释， 主要试剂为 Livin 多克隆兔抗人抗体， SABC试剂盒 （武汉博士德公司）。

1. 3 评价标准 观察宫颈上皮组织或宫颈癌组织切片病变位置染色， 参考 Kawasaki 等[2]报道的方法计算各指标表达程度， 依染色程度将阳性信号分为 3类 ：染色强度弱、染色强度强、染色强度中等。

1. 4 统计学方法 采用 SPSS19.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率 （%）表示， 采用 χ2检验；相关性采用 Spearman相关分析。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 Livin表达情况 Livin的阳性表达为棕黄色阳性反应， 在细胞胞浆及少部分胞核也有不同程度着色。宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中 Livin的表达率分别为70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比较差异有统计学意义（P<0.05）。Livin在宫颈癌组织与宫颈上皮内瘤变组织中的表达率比较差异无统计学意义（P>0.05）。

2. 2 Livin的相关性 Livin基因表达与宫颈癌的淋巴结转移及宫颈癌的临床分期具有相关性（r=0.56、0.52， P<0.05）。Livin基因表达与宫颈癌的病理分型、病理分级、患者年龄无明显相关性 （P>0.05）。

3 讨论

Livin是新发现的人类凋亡抑制蛋白， 同其他凋亡抑制蛋白相似， Livin可通过抑制凋亡抑制通路中 Caspase 3、7的活性， 发挥抑制肿瘤细胞凋亡的作用， 在已经发现的一些肿瘤组织如乳腺癌、胃肠癌等肿瘤组织中高表达。凋亡抑制蛋白是细胞凋亡抑制因子家族新成员， 它能够抑制细胞凋亡， 促进肿瘤细胞形成及增长[3]。

本文通过对宫颈癌 Livin基因表达与临床病理的关系研究表明， 宫颈癌的肿瘤病理分型、病理分级与 Livin基因表达程度无明显相关关系（P>0.05）；Livin基因表达与宫颈癌的淋巴结转移及宫颈癌的临床分期具有相关性（P<0.05）， 说明Livin在宫颈癌的细胞凋亡过程中产生重要抑制作用， 并促进了肿瘤细胞的不断增殖。对于宫颈良性病变发展为上皮内瘤变的病例， 应密切监测 Livin表达情况， 有利于指导临床早期诊断及早期治疗。

在淋巴结转移的宫颈癌病例中， 宫颈癌组织中 Livin 高表达， 提示对于宫颈癌组织中 Livin 高表达的病例， 应实施手术、化疗、生物治疗等综合治疗， 最大程度提高肿瘤生存率。凋亡抑制蛋白 Livin在宫颈癌的演近过程中， 抑制细胞凋亡活动增强， 对其进行检测可以做为判定宫颈癌发生及预后的重要指标。目前对 Livin 的研究仍有许多问题尚未阐明， 通过反义阻断或 Si-RNA技术， 降低 Livin 表达， 能否逆转宫颈癌细胞增殖， 促进肿瘤细胞凋亡， 成为宫颈癌治疗的新途径， 有待进一步研究证实。

总之， Livin 基因在宫颈癌的发生中具有抑制肿瘤细胞凋亡的作用， 可以做为宫颈癌诊断及预后的相关指标。

参考文献

[1] Ka H， Hunt JS. Temporal and spatial patterns of expression of inhibitors of apoptosis in human placentas. Am J Pathol， 2003， 163（2）：413-422.

[2] Kawasaki H， Altieri DC， Lu CD， et al. Inhibition of apoptosis by survivin predicts shorter survival rates in colorectal cancer. Cancer Res， 1998， 58（22）：5071-5074.

[3] 吴晓梅， 袁涛. Survivin、Livin、CD44v6在宫颈癌以及癌前病变中的表达及其临床意义. 中国老年学杂志， 2014， 34（3）：660-662.

[收稿日期：2016-01-26]