HemoCue Hb 201+ 分析仪测定血红蛋白结果的可比性研究

杨新平　王伟　项明方　刘志恒

[摘要] 目的 评估便携式HemoCue Hb 201+分析仪急性失血后输血的指导意义。 方法 选择2013年6月～ 2015年5月间深圳市第二人民医院全麻术中因急性失血可能需要输血的患者共208例，血标本采集后，分别采用HemoCue Hb 201+分析仪及SYSMEX XE-2100型血细胞分析仪测定同一标本的Hb，所测得的数据进行相关分析，并采用Bland-Altman 法评价两种检验方法的一致性。 结果 HemoCue Hb 201+分析仪和中心实验室SYSMEX XE-2100全自动血液分析仪测得的Hb具有良好的相关性（y = 15.9297 + 0.8086x，r=0.888，P<0.001）。两种方法检测Hb差值95%的一致性限度超出临床可接受范围。 结论 HemoCue Hb 201+分析仪在急性失血后Hb的检测具有较好的准确性，并且迅捷，对术中输血具有良好的指导意义；但与标准方法的一致性尚有不足，二者不能相互取代。

[关键词] HemoCue Hb 201+分析仪/仪器设备；血液生化分析/仪器设备；血红蛋白测定

[中图分类号] R446.11 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2016）09-140-04

[Abstract] Objective To assess the guiding significance of portable HemoCue Hb 201+ analyzer in blood transfusion after acute blood loss. Methods 208 patients with blood transfusion after acute blood loss during general anesthesia from June 2013 to May 2015 in the second people's hospital of shenzhen were selected， after blood specimen collection， the Hb of same specimen was respectively tested by HemoCue Hb 201+ analyzer and SYSMEX XE-2100 blood cell analyzer simultaneously， the taken data was relatively analyzed， the consistency between the two testing methods was evaluated by Bland-Altman method. Results The measured Hb of HemoCue Hb 201+ analyzer and SYSMEX XE-2100 automatic blood analyzer in central Laboratory had good correlation （y=15.9297+0.8086x， r=0.888， P<0.001）. The consistency limit of the 95% Hb difference tested by the two methods was beyond the clinically acceptable range. Conclusion HemoCue Hb 201+ analyzer in Hb testing after acute blood loss had good accuracy and fast， which had good guiding significance for intraoperative blood transfusion. This was inadequate compared the consistency of standard method， these two methods could not replace each other.

[Key words]HemoCue Hb 201+ analyzer or instrumentation； Blood biochemical analysis or instrumentation； Hemoglobin determination

在外科手术过程中，选择一种简便、快速、准确的血红蛋白（Hb）测定仪器实时掌握术中血红蛋白的变化，以指导术中合理输血，是麻醉医生面临的一大难题[1-2]。在临床工作中，通常的流程是，临床工作人员采集血液标本后由相关人员送入中心实验室，中心实验室多采用全自动血细胞分析仪测定血红蛋白。这种方法虽结果准确，但所需时程长，不能作为手术过程中实时血红蛋白变化的监测[3-5]。随着科技的发展，多种床旁便携式血红蛋白分析仪已应用于许多医院的麻醉科以及ICU等，以获得血

红蛋白的实时检验数据[5]。HemoCue Hb 201+是近年来临床应用较多的一种床旁快速血红蛋白监测仪器。我们应用此仪器测定Hb，将其测定结果与中心实验室的SYSMEX XE-2100全自动血液分析仪检测结果的作对比，评价两种仪器结果的相关性和一致性，从而为HemoCue Hb 201+ 分析仪应用于临床术中输血评估提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2013年6月～2015年5月共3年间择期手术的全麻患者，纳入标准为：术前血红蛋白≥90g/L，术中出血量>800mL，估计可能需要输血者。共收集病例208例，其中颅脑外科手术79例，脊柱外科手术66例，其他骨科手术15例，胸肺手术13例，妇产科手术9例，肝脏手术6例，胃肠道手术6例，胰腺手术3例，其他手术11例。患者术前ASA 评级Ⅰ～Ⅲ级，其中男116例，女92例，年龄18～83岁，平均（49.8±24.44）岁，体重38～90kg，平均（65.62±19.783）kg。

1.2 研究方法

所在患者在麻醉插管成功后，穿刺上肢动脉监测动脉压。在术中估计需要输血前取动脉血3mL。其中1mL动脉血标本抽血后即刻经HemoCue Hb 201+分析仪（采用叠氮化高铁血红蛋白法）行Hb测定。另2mL动脉血标本注入乙二胺四乙酸二钠（EDTA）抗凝真空管，迅速将管内血标本与抗凝剂充分混匀，15min内送入本院中心实验室，用SYSMEX XE-2100全自动血液分析仪（采用十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白法）测定血Hb浓度。结果出来后，电话报告至手术间，记录获得Hb数值的时间。

1.3 统计学处理

定量数用（）的形式表示，采用SPSS18.0 软件进行相关分析和线性回归分析，采用Medcalc软件进行一致性分析（Bland‐Altman 法），以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 分别采用两种方法检测血Hb值及相关性分析

术中全部208例患者在取得血标本后，即刻经HemoCue Hb 201+分析仪检测血Hb，均在2min（120s）时获得数据，测得血Hb 值为40～173g/L，平均（78.47±22.23）g/L。另一份血标本送中心实验室行急诊检验，经SYSMEX XE-2100全自动血液分析仪测定血Hb值后，即刻电话通知结果，获得数据时间为42～75min平均（52.33±15.471min），测得的Hb值为38～175g/L，平均（77.22±24.03）g/L。见表1。

两种方法所测得血Hb浓度具有显著的相关性，相关系数r=0.888（P<0.0001），相关系数的95%置信区间为（0.914～0.978），直线回归方程为： y=15.9297 + 0.8086 x，其中y为HemoCue Hb 201+测得Hb值，x为中心实验室SYSMEX XE-2100全自动血液分析仪测得的Hb值。见图1。

2.2 两种检验方法的一致性分析（Bland‐Altman法）

以中心实验室SYSMEX XE-2100全自动血液分析仪测得的Hb值为横坐标，以两种方法测得的血红蛋白结果差值d为纵坐标，并以差值的均数d±1.96×差值的标准差（sd）为95%的一致性限度，标绘出散点图（图2）。两种测量方法差值的95%一致性限度为（20.5，-23），208个散点中有14个散点位于95%的一致性限度之外，比例为6.73%（14/208），大于5%。

临床可以接受的界限参考美国临床实验室改进法案修正案[6]（CLIA88）规定的血红蛋白检测以靶值±7%为准。两种仪器测定Hb的一致性限度的95%可信区间超过临床可以接受的界限（-5.40，5.40）g/L。其中有19个散点（19/208，9.13%）的值高于这个界限，有49个散点（49/208，23.56%）的值低于这个界限，仅有126个散点（126/208，60.58%）的值在临床可接受的界限范围内。

3 讨论

在手术失血期间，麻醉医生常常需要监测患者血红蛋白水平，以指导术中合理输血[1-2]。我国血红蛋白测定的标准方法根据卫生部颁布的氰化高铁血红蛋白法[7]，但操作过程中需要使用较大毒性试剂，对环境造成污染。因此，国际上均不采用此法作为临床检验的方法。目前常用的是十二烷基月桂酰硫酸钠血红蛋白（SLS-Hb）法，经自动血液分析仪检测，和标准的氰化高铁血红蛋白法有良好的一致性。但此方法需将血液标本送入检验科室进行分析，耗时较长，不能及时获得的血红蛋白数值。本组患者中，即使通过术中急查的方式检测血Hb值，血标本经转运、处理、自动分析和结果回报后，获得Hb结果的时间为42～75min，平均（52.33±15.471） min。这么长的时间，在需要争分夺秒决定是否输血的手术中，往往难以接受的。

随着科技发展，各类便携式检测仪器的出现，使得即时检测血红蛋白数值得以实现[8-9]。HemoCue Hb 201+分析仪是近年来国内外快速检测Hb的仪器之一，它被广泛应用于街头献血者的筛查，其测定血红蛋白精密度好，检测结果可靠 [9-12]。研究表明Hb在低于12.5g/dL时，HemoCue Hb 201+测定的Hb值与标准方法的相关性良好，而当Hb高于18g/dL时，两种方法测定的Hb值即失去线性相关关系[13-14]。街头献血者大部分是血红蛋白浓度正常的人，即使筛选出贫血患者，往往是慢性贫血，其血浆容量是正常的，最常见类型为缺铁性贫血所导致的小细胞低色素性贫血。随着HemoCue Hb的广泛应用，亦有研究者将之应用快捷的疾控机构现场血红蛋白测定和术中快速失血后输血的评估[15-16]。对于后者，由于急性失血和血液稀释引起的急性贫血， HemoCue Hb 201+分析仪测定Hb能否准确估计贫血的程度和出血量，它与中心实验室测定Hb之间的一致性如何，还有待评估。Akhtar K等[16]认为在术中应用HemoCue法可以准确地检测血红蛋白的含量，并优于其他的快速方法。国内刘芳等[17-18]亦有类似的报道。

本组患者在手术过程中的均存在急性失血或/和血液稀释，临床判断需紧急输血。笔者采用HemoCue Hb 201+分析仪测定Hb，并和SYSMEX XE-2100全自动血液分析仪（采用SLS-Hb）测定Hb值进行对比。结果表明：本研究发现血红蛋白值在4 ～ 15g/dL区间内两种仪器所测得的血红蛋白值相关性显著，相关系数为0.888（P<0.0001），且具有线性关系，说明HemoCue Hb 201+分析仪在术中急性失血时应用来测定Hb是有良好的参考价值的。术中经HemoCue Hb 201+分析仪检测血Hb，均在2分钟（120s）时获得数据，非常快捷。并且，测得血Hb平均值（78.47±22.23）g/L，95%CI为75.43～81.51g/L，正是临床上需要输血的区间。因此，这种快速而又较准确的术中Hb检测法，对输血与否的评估，具有重要的指导意义。

同时，我们采用Bland‐Altman分析法[19]评价HemoCue Hb 201+分析仪在术中的应用是否可以替代SYSMEX XE-2100全自动血液分析仪，即采用叠氮化高铁血红蛋白法检测Hb是否和实验室SLS-Hb血红蛋白法是一致的。结果表明，两种检测指标95%CI 均超出了临床可接受的界限，故两种检测方法的一致性欠佳，尚无法进行完全相互替代。两种检测方法的一致性欠佳产生的原因可能为多方面：首先，两种仪器检测原理不同，可能导致检测结果存在一定差异。全自动血液分析仪采用是SLS-Hb法[7]，测定原理为利用表面活性剂先将红细胞溶解，释放出血红蛋白分子。血红蛋白分子中的正二价铁离子被氧化为正三价铁离子，十二烷基硫酸钠（SLS）的亲水端与正三价铁离子结合形成稳定的SLS-Hb有色基团。SLS-Hb在535nm有最大吸收峰，根据吸光度，即可求得血红蛋白浓度。而HemoCue Hb 201+分析仪采用叠氮高铁血红蛋白法，其测定血红蛋白的原理为[20]：取HemoCue Hb 201+血红蛋白仪专用玻璃片， 虹吸法吸取10ul血至玻璃片微小孔内， 与孔内试剂发生反应。在孔内红细胞膜被脱氧胆酸钠裂解，释放出血红蛋白， 亚硝酸钠将血红蛋白转换成高铁血红蛋白， 然后叠氮化钠与高铁血红蛋白结合形成叠氮化高铁血红蛋白， 在570nm 和880nm 双波长测量红细胞破坏后释放出的血红蛋白。两者不同的校准检测体系有可能产生一定的系统误差。方法机制不同，受影响因素亦不同， 在某些病理条件下， HemoCue Hb 201+分析仪测定结果可能会产生较大的偏差[18-21]。因此，在术中使用HemoCue Hb 201+分析仪时要求严格按照操作规程使用，定期进行质量控制，定期与实验室结果进行比对。

综上所述，HemoCue Hb 201+分析仪应用于急性失血后Hb测定具有较好的准确性，并且迅捷，对术中输血有良好的指导意义，但与标准方法的一致性尚有不足，二者不能相互取代。

[参考文献]

[1] Chee YL， Crawford JC， Watson HG， et al. Guidelines on the assessment of bleeding risk prior to surgery or invasive procedures. British Committee for Standards in Haematology[J]. Br J Haematol，2008，140（5）：496-504.

[2] Cosmi B， Alatri A， Cattaneo M，et al.Assessment of the risk of bleeding patients undergoing surgery or invasive procedures： Guidelines of the Italian Society for Haemostasis and Thrombosis （SISET） [J]. Thromb Res，2009，124：e6-e12.

[3] 刘跃平，李明，王超，等. 急诊住院血常规标本实验室内周转时间调查与分析[J]. 检验医学与临床，2015，12（5）：611-613.

[4] 倪军，黄爱军，张燕，等. 急诊血常规检测结果回报时间分析[J]. 临床检验杂志， 2013，33（2）：151-152.

[5] Saxe JM， Ledgerwood AM， Lucas CB. Principles of resuscitation.In：Geller ER，ed.Shock and resuscitation[M]. NewYork： McGraw-HillInc， 1993：147-179.

[6] Department of Health and Human Services. Regulations implementing the clinical laboratory for improvement amendments of 1988： A Summary[S]. MMWR， 1992， 57：7002-7187.

[7] 中华人民共和国卫生部.WS/T 341-2011 血红蛋白测定参考方法[S].北京：中国标准出版社，2011.

[8] Gómez-Simón A， Navarro-Núez L， Pérez-Ceballos E， et al.Evaluation of four rapid methods for hemoglobin screening of whole blood donors in mobile collection settings[J]. Transfus Apher Sci，2007，36（3）：235-242.

[9] Shahshahani HJ， Meraat N， Mansouri F. Evaluation of the validity of a rapid method for measuring high and low haemoglobin levels in whole blood donors[J]. Blood Transfus，2013，11 （3）： 385-390.

[10] Akhtar K， Sherwani RK， Khaliqur R， et al. HemoCue photometer： a better alternative of hemoglobin estimation in blood donors[J]. Indian J Hematol Blood Transfus，2008，24（2）： 170-172.

[11] 于连辉，邱玲，国秀芝，等.HemoCue Hb201+快速血红蛋白测定仪的性能评价[J].现代检验医学杂志，2010，25（6）：99-100.

[12] 金志坚， 宣雯， 胡俊锋. HemoCue-B 血红蛋白仪在献血者初筛中的应用[J]. 临床输血与检验，2006，8（4）： 318.

[13] Rudolf-Oliveira RC， Gonalves KT， Martignago ML， et al. Comparison between two portable hemoglobinometers and a reference method to verify the reliability of screening in blood donors[J]. Transfus Apher Sci，2013，49 （3）： 578-582.

[14] 方跃强，王文娟，陈江，等. HemoCue仪和临床血液分析仪测定血红蛋白结果的可比性研究[J].中国卫生检验杂志，2010，20（5）：988-990，1031.

[15] Nkrumah B， Nguah SB， Sarpong N，et al. Hemoglobin estimation by the HemoCue portable hemoglobin photometer in a resource poor setting[J]. BMC Clinical Pathology，2011，11（5）：1-6.

[16] Jahr JS， Lurie F， Driessen B， et al. The HemoCue， a point of care B-hemoglobin photometer， measures hemoglobin concentrations accurately when mixed in vitro with canine plasma and three hemoglobin-based oxygen carriers （HBOC） [J]. Can J Anesth， 2002， 49（3）：243-248.

[17] 刘芳，李轶聪. HemoCue Hb 201+分析仪在手术中的应用[J]. 黑龙江医学， 2011， 35（1）： 8-10.

[18] 李轶聪，刘芳，咸琳琳. HemoCue Hb 201+分析仪与血气分析用于测定血红蛋白的研究分析[J]. 现代预防医学，2010，37（19）：3732，3745.

[19] Bland JM， Altman DG. Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement[J]. Lancet， 1986，1：307-310.

[20] Hiscock R， Kumar D， Simmons SW. Systematic review and meta-analysis of method comparison studies of Masimo pulse co-oximeters （Radical-7 or Pronto-7） and HemoCue absorption spectrometers （B-Hemoglobin or 201+） with laboratory haemoglobin estimation[J]. Anaesth Intensive Care，2015，43（3）：341-350.

[21] 郭建生，钟炽辉，何子毅. 3种血红蛋白快速检测仪检测结果可靠性分析[J].现代医院，2014，14（3）：65-68.

（收稿日期：2016-02-16）