APP下载

HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂在金黄色葡萄球菌检测中的作用

2016-07-20广东省佛山市质量计量检测中心

食品安全导刊 2016年15期
关键词:乳胶金黄色葡萄球菌

□ 孟 宇 广东省佛山市质量计量检测中心



HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂在金黄色葡萄球菌检测中的作用

□ 孟 宇 广东省佛山市质量计量检测中心

目的:通过实验比对,研究HM43葡萄球菌乳胶凝集试剂在食品中金黄色葡萄球菌检测中的作用与地位,提供参考,方便检验工作者在的食品中金金黄色葡萄球菌检测中选择适当的方法,提高检测效率,确保检测结果的可信度。

概念说明

HM43葡萄球菌乳胶凝集,是金黄色葡萄球菌检测发展中产生的新的检测方法。

血浆凝固酶试验是《食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》(GB 4789.10-2010)中,金黄色葡萄球菌检测的确证实验。

VITEK® 2 Compact系统专用于细菌和酵母菌鉴定和重要临床细菌的药敏试验,是当前细菌生化鉴定最权威的仪器。

实验过程

样品:本次实验样品来源于同一批次的熟肉制品,共51个样品。

方法:该实验中所有样品的增菌,平板分离在同一实验室内完全相同的条件下,由相同人员按《食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》(GB 4789.10-201 0)规定的检验方法进行。

样品的处理:称取25 g样品至盛有225 m L 7 .5%氯化钠肉汤的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1~2 min.

增菌:将上述样品匀液于36℃±1℃培养18~24 h。金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长。

分离培养:将上述培养物,分别划线接种到5%的血平板,血平板36℃±1℃培养18~24 h。金黄色葡萄球菌在血平板上,形成菌落较大,圆形、光滑凸起、湿润、金黄色(有时为白色),菌落周围可见完全透明溶血圈。挑取上述菌落进行HM43葡萄球菌乳胶凝集试验,血浆凝固酶试验,VITEK® 2 Compact检测。

鉴定:选取1~2个金黄色葡萄球菌的典型可疑菌落,先用HM43葡萄球菌乳胶凝集做初步筛选,共有32个样品金黄色葡萄球菌检测呈阳性结果,对初步筛选呈阳性的样品,再做血浆凝固酶试验,同时做VITEK® 2 Compact上机检测得到的检测结果见表1。

结果分析

在32个HM43葡萄球菌乳胶凝集初步筛选呈阳性的样品中:血浆凝固酶阳性确证的比率为:7/32=21. 87%;HM43葡萄球菌乳胶凝集假阳性比率为:1-21.87%=78.13%;VITEK® 2 Co mpact阳性确证的比率为:6/32=18. 75%;血浆凝固酶确证阳性和VITEK® 2 Compact阳性确证的相似度为:6/7=85.71%,这两种方法的检测结果高度相似,检测结果基本相同,可以推断结果是可靠的。

《食品安全国家标准 食品微生物学检验总则》中规定,相同细菌用不同方法检测得到不同结果时,以国标方法的检测结果为准。

结论

HM43 葡萄球菌乳胶凝集在食品中金黄色葡萄球菌的检测中,虽然操作简单、方便、快速,但是假阳性结果偏高,金黄色葡萄球菌的确证率低,同时也没有被纳入国标方法,在检测中只能起初步筛选的作用,金黄色葡萄球菌最终的确证,还要依靠血浆凝固酶试验或者VITEK® 2 Compact生化鉴定。

表1 VITEK® 2 Compact上机检测结果

讨论

HM43葡萄球菌乳胶凝集在食品中金黄色葡萄球菌的检测中,高假阳性结果的原因分析。

凝集原理

因为乳胶颗粒表面包被有纤维蛋白原(与凝固酶相结合)和免疫球蛋白(与A蛋白相结合)。与金黄色葡萄球菌悬液混合后,乳胶颗粒可迅速凝集。缺少凝固酶/A蛋白的葡萄球菌不会发生明显凝集。

凝集原理可以得出的结论

(1)如果菌落不纯,可能造成假阳性结果。

(2)如果培养超过30小时后,细菌老化也可能形成阳性结果。

(3)葡萄球菌的粗糙菌株可引起假阳性结果。

(4)纤维状凝集可能为假阳性结果

(5)有些酵母菌株可能引起假阳性凝集结果。

猜你喜欢

乳胶金黄色葡萄球菌
洗乳胶枕 先浸泡后按压
四步挑选乳胶枕
如何防治兔葡萄球菌病
那一抹金黄色
那一抹金黄色
金黄色
如何选购保养乳胶枕
肉鸡葡萄球菌病诊疗
3种微生物脱硫废乳胶及其填充天然橡胶的性能对比
一例水牛疥螨继发感染葡萄球菌病的诊治