缺氧诱导因子HIF-2α在前列腺癌中的表达及临床意义

马可为 云志中 乔建坤

缺氧诱导因子HIF-2α在前列腺癌中的表达及临床意义

马可为 云志中 乔建坤

目的 探讨缺氧诱导因子HIF-2α在前列腺癌中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化法检测HIF-2α在前列腺癌组织中的表达，并评价HIF-2α表达与临床病理及临床分期特征的关系以及HIF-2α与血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。结果 HIF-2α在前列腺癌各病理分级的阳性表达率分别为高分化57.1%，中分化63.2%，低分化91.7%，高、中、低分化比较，差异有统计学意义，P＜0.05；临床分析方面，A＋B期60.7%，C＋D期82.4%，二者间比较，差异有统计学意义，P＜0.05。VEGF在前列腺癌各病理分级的阳性表达率分别为高分化42.9%，中分化68.4%，低分化75.0%，高、中、低分化比较，差异有统计学意义，P＜0.05；临床分析方面，A＋B期53.6%，C＋D期76.5%，二者间比较，差异有统计学意义，P＜0.05。HIF-2α与VEGF表达呈正相关，r＝0.258，P＜0.05。结论 HIF-2α在前列腺肿瘤发生、发展中具有重要作用，对于前列腺癌病情的诊断和治疗具有重要临床意义。

缺氧诱导因子；前列腺癌；血管内皮生长因子

前列腺癌是威胁男性健康的常见肿瘤之一，发病隐匿，在我国，前列腺癌的发病率低于西方国家，但是病死率却高于西方国家，且发病率有上升趋势，前列腺癌在不同种族间存在差异，同时受到不同文化、社会、心理因素的影响[1]。研究表明[2]，血管内皮生长因子(VEGF)是重要的淋巴管生成因子之一，其在多种恶性肿瘤中呈高表达，与肿瘤的增殖和转移密切相关。HIF-2α(Hypoxia-inducible factor-2α)是一种低氧转录反应调节子，主要表达在血管内皮细胞中，与胚胎的形成与发育密切相关。研究显示[3-4]，HIF-2α在乳腺癌、结肠癌、胃癌等多种类型中均表达上调，可能是肝瘤干细胞的一种标志。为探讨HIF-2α在前列腺癌中的表达及与VEGF表达的相关性，我们应用免疫组织化学技术对前列腺癌肿瘤组织的HIF-2α进行检测，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院2012—2015年手术切除的前列腺组织标本45例，均经术后病理确认，年龄55～81岁，平均(71.5±3.8)岁，根据Gleason分级和临床医生分级标准分为3级，高分化(2～5分)14例，中分化(6～8分)19例，低分化(9～10分)12例，Whtmore-Jewett临床分期：A＋B期28例，C＋D期17例。

1.2 方法 采用免疫化S-P法，一抗为鼠抗人HIF-2α单克隆抗体(Abcam，美国)，稀释度：1∶1 000；二抗生物素标记兔抗鼠IgG及S-P试剂盒(福州迈新公司)。石蜡包埋后，5 μm切片，常规免疫组织化学染色，二甲苯脱蜡，梯度酒精水化，抗原热修复2 min，3%过氧化氢孵育，依次滴加一抗，4℃孵育过夜，加二抗及S-P复合物，室温孵育，1 h，DAB显色，苏木素复染，逐及脱水，透明封片，光学显微镜下观察。

1.3 阳性结果判定 按阳性细胞百分比分4级：＜25%为1级；25%～49%为2级；50%～74%为3级；≥75%为4级。按染色强度分4级：没有染色为0级；浅棕色为1级；棕色为2级；暗褐色为3级。评分公式：免疫组化评分＝百分比评分×染色强度评分。阴性：≤3分，阳性：＞3分。

VEGF：细胞胞质内含有棕黄色颗粒记为染色阳性细胞。阳性：切片内阳性细胞数≤50%。阴性：切片内无阳性细胞。

1.4 统计学处理 数据采用SPSS 17.0统计学软件进行χ2检验，采用Spearman相关分析描述HIF-2α与VEGF之间的关联程度，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HIF-2α表达与前列腺癌临床病理特征的关系 HIF-2α在前列腺癌各病理分级的阳性表达率分别为高分化57.1%，中分化63.2%，低分化91.7%，高、中、低分化比较，差异有统计学意义，P＜0.05；临床分析方面，A＋B期60.7%，C＋D期82.4%，二者间比较，差异有统计学意义，P＜0.05(表1)。

表1 HIF-2α表达与前列腺癌临床病理特征的关系

2.2 VEGF表达与临床病理特征的关系 VEGF在前列腺癌各病理分级的阳性表达率分别为高分化42.9%，中分化68.4%，低分化75.0%，高、中、低分化比较，差异有统计学意义，P＜0.05；临床分析方面，A＋B期53.6%，C＋D期76.5%，二者间比较，差异有统计学意义，P＜0.05(表2)。

表2 45例前列腺癌标本VEGF表达与临床病理特征的关系

2.3 HIF-2α与VEGF表达的相关性分析 HIF-2α与VEGF表达呈正相关，r＝0.258，P＜0.05(表3)。

表3 HIF-2α与VEGF表达的相关性分析

3 讨论

前列腺癌是泌尿男性生殖系肿瘤中生物学行为最复杂的恶性肿瘤，其发病隐匿，恶性程度低的部分前列腺癌患者可以长期带瘤生存，但部分具有恶性表型的患者却进展很快，多发生远处转移或激素抵抗甚至广泛耐药，是引起患者死亡的主要原因[5-6]。因此，揭示前列腺癌恶性表型获得的机制，并寻找相应的靶向性治疗措施，是当前泌尿外科迫切需要解决的重要问题。前列腺癌作为一种实体肿瘤，缺氧的微环境在其生成及发展过程中起着非常重要的作用。在肿瘤对缺氧的适应反应中，HIFs是处于上游的调节因子，发挥关键作用。在缺氧环境下，HIFs通过影响其靶基因的表达从而使细胞的蛋白组成成分发生变化，生理活动产生改变，对于肿瘤的代谢、凋亡增殖，血管生成及侵袭转移等生物学特性具有明显的影响，在这个过程中肿瘤可转变为更具有侵袭性的表型。

HIF-1α和HIF-2α是HIFs功能亚单位的两种亚型，但二者在体内的分布及生物学作用方面存在相当大的差异。HIF-1α作为最早发现的HIF-α亚型，相关的研究已经比较深入，对于其直接或间接地参与肿瘤的发生发展过程的作用也为众多研究所肯定[7-9]。然而目前对于HIF-2α以及两个亚基之间相互关系的研究则所知较少。

本研究中，HIF-2α在前列腺癌各病理分级的阳性表达率分别为高分化57.1%，中分化63.2%，低分化91.7%，高、中、低分化比较，差异有统计学意义，P＜0.05；临床分析方面，A＋B期60.7%，C＋D期82.4%，二者间比较，差异有统计学意义，P＜0.05。研究结果提示，HIF-2α在前列腺癌组织中的表达是升高的，说明HIF-2α可能与前列腺癌的发生、发展有关。VEGF是同源二聚体糖蛋白，可以特异性的作用于血管内皮细胞，促进血管内皮细胞的分裂和趋化，有助于微血管的通透性提升，进而促进内皮细胞的增殖、迁移以及肿瘤新生血管的形成，是肿瘤生长和转移的先决条件[10]。研究显示[11-12]，在乳腺癌、结肠癌、肺癌、肾癌等多种恶性肿瘤组织中有HIF-2α和CEGF的mRNA和蛋白的高表达，在这些肿瘤组织中，HIF-2α促进VEGF高表达，增加肿瘤新生血管的形成，有利于肿瘤浸润和转移。本研究中，VEGF在前列腺癌各病理分级的阳性表达率分别为高分化42.9%，中分化68.4%，低分化75.0%，高、中、低分化比较，差异有统计学意义，P＜0.05；临床分析方面，A＋B期53.6%，C＋D期76.5%，二者间比较，差异有统计学意义，P＜0.05。HIF-2α与VEGF表达呈正相关，r＝0.258，P＜0.05。本研究结果支持上述观点，前列腺癌组织有HIF-2α大片着色，这说明癌变组织数量与HIF-2α表达密切相关，而同时这些区域的VEGF也都呈高表达，这说明癌细胞缺血缺氧后可诱导HIF-2α的大量产生，并促进VEGF高表达，通过与靶基因的低氧反应元件(HREs)结合，诱导靶基因的转录激活，这些靶蛋白往往涉及低氧耐受或血管生成，在前列腺癌组织中，局部低氧环境可能诱导HIF-2α表达增加，而随着HIF-2α表达的大量产生，进一步通过诱导一系列相关蛋白的表达，促进前列腺癌的发展，这也与一些研究表明的HIF-2α能过诱导VEGF表达促进肿瘤发展的报道相一致[13]。

综上所述，缺氧诱导因子HIF-2α在前列腺肿瘤发生、发展中具有重要作用，对于前列腺癌病情的诊断和治疗具有重要临床意义。

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Objective To explore the expression and clinical significance of HIF-2αin prostate cancer.Methods The immunohistochemical method was applied to detect HIF-2αexpression in prostate cancer tissues，then the relationship between HIF-2αexpression and clinical pathology and clinical stage features was evaluated，and the correlation of HIF-2αexpression and vascular endothelial growth factor(VEGF)was also evaluated.Results The positive expression rates of HIF-2α in different pathological gradings of prostate cancer were respectively 57.1%in high differentiation，63.2%in moderate differentiation，and 91.7%in poor differentiation.There were differences of statistical significance between high，moderate and poor differentiation(P＜0.05).Clinical analysis showed 60.7%in stage A＋B，82.4%in stage C＋D，and the differences between them showed statistical significance(P＜0.05).The positive expression rates of VEGF in different pathological gradings of prostate cancer were respectively 42.9%in high differentiation，68.4%in moderate differentiation，and 75.0%in poor differentiation.There were differences of statistical significance between high，moderate and poor differentiation(P＜0.05).Clinical analysis showed 53.6%in stage A＋B，76.5%in stage C＋D，and the differences between them showed statistical significance(P＜0.05).The expression of HIF-2α and VEGF was positively related(r＝0.258，P＜0.05).Conclusion HIF-2α plays an important role in the occurrence and development of prostate cancer，which has great clinical significance in the diagnosis and treatment of prostate cancer.

Hypoxia-inducible factor；Prostate cancer；Vascular endothelial growth factor(VEGF)

2016-04-19)

1005-619X(2016)09-0907-03

10.13517/j.cnki.ccm.2016.09.004

010017 内蒙古自治区人民医院泌尿外科

内蒙古科技厅应用技术研究基金(20120403)

云志中