腹泻患儿腺病毒感染临床特征及流行病学分析

黄亮，　吴瑕，　蒋辉英



调查研究

腹泻患儿腺病毒感染临床特征及流行病学分析

黄亮，吴瑕，蒋辉英

518055 广东 深圳，深圳市南山区西丽人民医院儿科

【摘要】目的探讨腹泻患儿腺病毒感染的临床特征及流行病学特点。方法收集2013年1月至2014年12月深圳市南山区5岁以下腹泻儿童粪便标本，采取聚合酶链反应检测腺病毒，对阳性标本进行序列分析及基因型分型，同时分析腺病毒感染与年龄、季节等关系。结果600份标本中共计检出腺病毒感染20例，阳性率3.33%；腺病毒阳性标本中，肠道腺病毒14例，全部为肠道腺病毒41型，占比70.0%；非肠道腺病毒检出6例，占比30.0%；肠道腺病毒患儿病程为(11.24±3.53)d，明显长于非肠道腺病毒(6.67±2.41)d，差异有统计学意义(P<0.05)，两组呕吐次数、发热比较差异无统计学意义(P>0.05)；腺病毒感染性腹泻呈现全年发病情况，其中5月份与10月份呈现出两个高峰期，5月份高峰期(4～6月份)检出最多，占比65.0%(13/20)；腺病毒感染性腹泻各个年龄段均有分布，其中>6～12月龄患儿最为多见，占比65.0%(13/20)。结论肠道腺病毒41型是引起深圳市南山区小儿腹泻的重要病原，加强监测对及时诊治，改善患儿预后具有重要意义。

【关键词】腹泻；腺病毒；临床特征；流行病学

腹泻是世界范围内最为常见的婴幼儿疾病之一，也是导致儿童死亡的重要病因，发展中国家尤甚。据报道，全球5岁以下儿童发生腹泻的病例数在30～50亿例次左右，死亡患儿将近有2百万[1]。在小儿急性腹泻中，病毒是重要病因，而腺病毒则是常见病原体之一[2-4]。国外有报道显示，有9%～11%的儿童腹泻是因肠道腺病毒引发的，甚至造成腹泻暴发[5]。近年来，深圳市因肠道腺病毒感染导致的腹泻状况十分普遍，但缺少对于肠道腺病毒感染的临床特征及流行病学调查，对此，本研究选取2013年1月至2014年12月深圳市南山区5岁以下腹泻儿童作为研究对象，对其粪便标本进行腺病毒检测，以探讨该地区腹泻患儿腺病毒感染的临床特征及流行病学特点，现报道如下。

1资料与方法

1.1临床资料2013年1月至2014年12月深圳市南山区西丽人民医院收治5岁以下疑似诊断病毒性腹泻患儿600例，其中男387例，女213例；年龄为出生后1 h至5岁，平均(2.83±1.03)岁。

1.2诊断标准参照《儿科学》中病毒性腹泻的诊断标准[6]。

1.3纳入标准(1)发病时间>24 h；(2)年龄<5岁；(3)排便次数每日>3次，且大便性状有明显改变，如稀水样、蛋花汤样、稀糊样；(4)便常规镜检白细胞计数<15个/HP，未见红细胞腹泻病例。

1.4排除标准(1)慢性腹泻，病程>2个月或间歇期2～4周的复发性腹泻；(2)大便量<3 mL；(3)脓血便；(4)就诊前应用过抗生素或抗病毒药物。

1.5方法

1.5.1收集标本收集患儿粪便后，立即将标本置于-80 ℃冰箱内保存。

1.5.2DNA提取与检测将标本冻融3次后涡旋，离心，取上清液200 μL，采取德国Qiagen公司DNA提取试剂盒提取腺病毒DNA，具体操作方法严格按照试剂盒说明书进行。

1.5.3PCR腺病毒基因组扩增引物采取针对腺病毒Hexon基因的扩增引物HAdV-F/HAdVR，具体引物序列为HAdV-F:5′-TTC CCC ATG GCI CAY AAC AC-3′；HAdV-R:5′-CCT GGT AKC CRA TRT TGT A-3′，PCR产物长度为482 bp。PCR反应条件：94 ℃ 3 min，94 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 1 min，共进行35个循环，72 ℃延伸7 min。

1.5.4序列分析及基因型分型对所得PCR阳性扩增产物进行克隆，送生物技术公司测序，将所测得的序列和美国生物技术中心GenBank已知序列做BLAST对比分析，以明确病毒基因型。

2结果

2.1腺病毒检测结果600份标本中，共计检出腺病毒感染20例，阳性率3.33%。腺病毒阳性标本中，肠道腺病毒检出14例，全部为Ad41型，占比70.00%。非肠道腺病毒检出6例，占比30.00%，其中Ad1型2例，31型2例，Ad1与Ad5型混合感染1例，Ad3与Ad7型混合感染1例。

2.2肠道腺病毒与非肠道腺病毒患儿临床症状、体征及病程比较见表1。

表1　肠道腺病毒与非肠道腺病毒患儿临床症状、

注：与肠道腺病毒患儿比较，at=2.87，P<0.05。

表1结果表明，肠道腺病毒患儿病程明显长于非肠道腺病毒患儿，差异有统计学意义(P<0.05)；两组呕吐次数、发热比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.3腺病毒感染性腹泻发病季节分布见表2。

表2　腺病毒感染性腹泻发病季节分布(n)

表2结果表明，腺病毒感染性腹泻呈现全年发病情况，其中5月份与10月份呈现出两个高峰期，5月份高峰期(4～6月份)检出率最高，占比65.0%(13/20)。

2.4腺病毒感染性腹泻发病年龄分布见表3。

表3　腺病毒感染性腹泻发病年龄分布(n)

表3可见，腺病毒感染性腹泻各个年龄段均有分布，其中>6～12月龄患儿最为多见，占比65.0%(13/20)。

3讨论

本研究通过对深圳市南山区2013年1月至2014年12月收集的600例5岁以下儿童粪便标本采取腺病毒检测发现阳性病例数20例，儿童腺病毒感染性腹泻发生率为3.33%，与国内相关研究有一定出入[7]。贾娜尔等[8]的研究中，对乌鲁木齐地区腹泻患儿进行病毒检测发现，腺病毒感染性腹泻发生率为2.3%。儿童腺病毒感染性腹泻以肠道腺病毒感染最为多见，本研究中，肠道腺病毒感染率为70.0%，且均为Ad41型，与国内外大多数研究一致[9]。有文献解释，之所以Ad41成为流行菌株，可能揭示了Ad41出现抗原漂移，而抗原性变化可能使得Ad41成功逃脱获得性免疫，最终使得个体对Ad41易感性增加。儿童腺病毒感染性腹泻临床主要表现为腹泻、呕吐、发热等，本研究中肠道腺病毒患儿病程明显长于非肠道腺病毒。

儿童腺病毒感染性腹泻全年均可发病，其中以春夏、秋冬交替时节多见，其中5月份与10月份呈现出两个高峰期，又以5月份高峰期最为多见，4～6月份发病人数占到总阳性病例数的65.0%。与高文娟等[10]研究基本一致。但也有不少研究显示，儿童腺病毒感染性腹泻并无季节流行性，故关于腺病毒感染性腹泻是否存在明显季节流行性仍有待大样本研究，以为临床防治提供依据[11-12]。通过观察腺病毒感染性腹泻患儿的发病年龄分布情况可见，本病的主要发病人群集中在>6～12月龄，占到总阳性病例数的65.0%。该结果与胡婷婷等[4]研究有出入，与朱铭[13]研究有相似之处，其研究中肠道腺病毒感染多见于7～12月龄儿童。

儿童腺病毒感染性腹泻如不及时给予治疗可导致严重后果，故一旦发现患儿有腹泻、呕吐、发热等症状，需引起重视，并及时给予明确诊断及有效治疗。当诊出是腺病毒感染性腹泻后，临床常先给予抗病毒治疗，再口服思密达药物，饮食方面注意低乳糖饮食原则，通常在治疗5～7 d即可显著好转或痊愈。

综上所述，深圳市南山区近年来腹泻患儿腺病毒感染以Ad41型流行为主，5月份与10月份可能是高峰期，>6～12月龄为高发年龄段，故应加强对该年龄段患儿的监护工作，以降低腺病毒感染性腹泻的发生率。

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(本文编辑：刘颖)

Clinical features and epidemiological analysis of adenovirus infection in children with diarrhea

HUANGLiang，WUXia，JIANGHuiying.

DepartmentofPediatrics，XiliPeople′sHospitalofNanshanDistrict,Shenzhen518055，China.

【Abstract】ObjectiveTo probe into the clinical features and epidemiological characteristics of adenovirus infection in children with diarrhea.MethodsThe stool samples of children under 5 years of age from January 2013 to December 2014 in Nanshan District,Shenzhen，were collected,and the positive specimen were sequentially analyzed and genotype was typed through the detection of adenovirus by polymerase chain reaction,and at the same time,the relationship between adenovirus infection and age,season and so on were analyzed.ResultsTotally 600 specimens were detected in 20 cases of adenovirus infection,the positive rate being 3.33%.In the adenovirus positive samples,there were 14 cases of intestinal adenovirus,and all were Ad41 type,accounting for 70%.Non-intestinal adenovirus was detected in 6 cases,accounting for 30%.The course of disease of enteric adenovirus was (11.24±3.53)d,which was significantly longer than that of non-enteric adenovirus[(6.67±2.41)d],and the difference was statistically significant(P<0.05).In addition,there was no significant difference between the two groups concerning frequency of vomiting and fever(P>0.05).The adenovirus infectious diarrhea in the whole year,which peaked in October and May,and the peak in May(April to June) was the most,accounting for 65%(13/20).The adenovirus infectious diarrhea could occur in all ages,with >6～12 years of age being the most common,accounting for 65%(13/20).ConclusionIntestinal adenovirus type 41 is an important pathogen causing diarrhea in children in Nanshan District of Shenzhen,and to strengthen the monitoring is of great significance to the timely diagnosis and treatment,which improves the prognosis of children.

【Keywords】Diarrhea;Adenovirus;Clinical features;Epidemiology

基金项目：2015年深圳市南山区卫生科技计划项目(医疗卫生类)资助(2015059)

作者简介：黄亮(1973-)，男，主治医师。研究方向：小儿呼吸系统、消化系统疾病的诊治 通讯作者：黄亮，E-mail：hbs8888888@126.com

doi：10.3969/j.issn.1674-3865.2016.03.035

【中图分类号】R725.7

【文献标识码】A

【文章编号】1674-3865(2016)03-0348-03

(收稿日期：2015-10-15)