40种苦苣苔科植物毛蕊花糖苷与总黄酮含量的测定

陈 朋，谢锐星，邱志敬

（深圳市中国科学院仙湖植物园，南亚热带植物多样性重点实验室，广东深圳518004）

40种苦苣苔科植物毛蕊花糖苷与总黄酮含量的测定

陈 朋，谢锐星，邱志敬＊

（深圳市中国科学院仙湖植物园，南亚热带植物多样性重点实验室，广东深圳518004）

为给苦苣苔科植物的药用研究提供依据，采用反相高效液相色谱法和紫外分光光度法测定苦苣苔科4属40种植物的毛蕊花糖苷与总黄酮含量。结果表明：40种苦苣苔科植物中有30种含有毛蕊花糖苷，其中只有半蒴苣苔属11种植物全部含有，吊石苣苔属不含有毛蕊花糖苷，且半蒴苣苔属在4个属间分布含量较高，平均含量为0.078%；吊石苣苔属分布含量最低，平均含量为0.004 4%。40种苦苣苔科植物中均含有丰富的黄酮类化合物，其含量为0.31%～7.84%。报春苣苔属、半蒴苣苔属、吊石苣苔属和芒毛苣苔属的黄酮含量分布均无明确规律，含量高低差异较大。其中，半蒴苣苔属植物毛蕊花糖苷和总黄酮平均含量均最高，分别为0.078%和4.53%。

苦苣苔科；毛蕊花糖苷；总黄酮

苦苣苔科隶属于玄参目，传统上分为苦苣苔亚科和大岩桐亚科，我国苦苣苔科植物分布有54个属，自西藏南部、云南、华南至河北及辽宁西南部广泛分布，多数属、种分布于云南、广西、贵州等省区的热带及亚热带丘陵地带，全部属于苦苣苔亚科，部分种类属于濒危植物［1］。其中，100多种苦苣苔科植物是我国传统民间草药，在广西［2－4］、贵州［5］和云南等省区广泛用于治疗各种炎症、咳喘、疮疖、风湿、骨折、烫伤、蛇虫咬伤及妇科等疾病，疗效显著［6］。

苦苣苔科植物作为民间传统药材其化学成分的研究报道很少。到目前为止，该科植物化学成分研究主要集中在吊石苣苔属石吊兰素和其他属黄酮类化合物和苯丙素类化合物。毛蕊花糖苷又名阿克苷属于苯丙素类化合物，是一种天然多酚类化合物［7］。越来越多的研究发现，毛蕊花糖苷具有很好的抗氧化、淬灭自由基作用，诸多生物学作用表现为抗肿瘤、神经保护、肝脏保护、抗炎症、抗病毒和DNA氧化损伤修复等［8－9］。黄酮类化合物同样也表现出良好的抗氧化、淬灭自由基和抗癌等作用［10－12，16］。为阐述苦苣苔的植物药用药效机理，对报春苣苔属、吊石苣苔属、半蒴苣苔属、芒毛苣苔属中40种植物所含总黄酮含量和毛蕊花糖苷含量进行测定，以期为苦苣苔科植物的基础研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

苦苣苔科植物全株4属40种，分别为报春苣苔属11种，半蒴苣苔属11种，吊石苣苔属11种，芒毛苣苔属7种，引种栽培于深圳市仙湖植物园，均为2年栽培苗。参照文献［13］，于2015年5月对采集的药材进行干燥。

仪器：日本岛津高效液相色谱仪，TB－215D分析天平（十万分之一精度，DENVER INSTRUMENT），TU－1810紫外分光光度计（北京普析通用）。

试剂：毛蕊花糖苷标准品（98%HPLC用，中国药品检定所），色谱乙腈（Fisher色谱纯），甲酸（色谱纯），水（超纯水），所有流动相用前过0.45μm微孔滤膜。芦丁标准品（中检所100080－201408ID：G5TE－8VP5）、甲醇、氢氧化钠、硝酸铝和亚硝酸钠均为分析纯。

1.2 毛蕊花糖苷的测定

1.2.1 色谱条件［14－15］色谱柱：InertsilR ODS－SP C18（250mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈∶0.5%甲酸水溶液＝20∶80（体积比），流速1.00mL／min，检测波长331nm，柱温30℃，进样体积10μL。

1.2.2 对照品溶液制备 精密称定毛蕊花糖苷标准品0.001 47g，加甲醇定容至25mL，即得。

1.2.3 标准曲线绘制 分别取对照品溶液0μL、200μL、400μL、600μL、800μL和1 000μL，加甲醇定容至1mL，依次取10μL注入高效液相色谱仪，测定，即得标准曲线。

1.2.4 供试品溶液的制备 供试样品粉碎过60目筛，取样品约0.5g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇25mL，密塞，称定重量，超声20min，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，即得。

1.2.5 样品含量测定 取供试品溶液按照1.2.1项下色谱条件下测定，按照外标法以峰面积计算毛蕊花糖苷含量。

1.3 总黄酮含量的测定

1.3.1 标准曲线的绘制 精密称定芦丁标准品0.005 52g，甲醇溶解定容至25mL，备用。依次量取芦丁对照品溶液0mL、0.5mL、1.5mL、2.5mL、3.5mL和4.5mL，用70%乙醇补足溶液至5mL，加入5%亚硝酸钠溶液1mL，混合均匀后放置6min，加入10%硝酸铝溶液1mL，混合均匀后放置6min，然后加入4%氢氧化钠溶液3mL用70%乙醇补足定容至总体积10mL，摇匀后放置15min，紫外分光光度计510nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。得线性回归方程y＝0.249 1x－0.020 1，R＝0.998 7。

1.3.2 供试品溶液的制备 供试品粉碎过40目筛混合均匀，精密称取样品约0.5g，70%乙醇超声波提取3次，减压蒸干，用70%乙醇定容至25mL，备用［17］。

1.3.3 总黄酮含量的测定 按照1.3.1的方法，精确量取样品1mL，70%乙醇溶液补足至5mL，依次加入亚硝酸钠溶液、硝酸铝溶液、氢氧化钠溶液定容放置后测定吸光度。

2 结果与分析

由表中可知，40种苦苣苔科植物中有30种含有毛蕊花糖苷。按照属划分，只有半蒴苣苔属11种植物全部含有，吊石苣苔属不含有毛蕊花糖苷的种最多，达60%。40种苦苣苔中毛蕊花糖苷最高为纤细半蒴苣苔，达0.34%，超过0.1%的有4种，半蒴苣苔属在4个属间分布含量较高，吊石苣苔属分布含量最低。

表40 种苦苣苔科植物总黄酮含量及毛蕊花糖苷的含量Table Contents of total flavonoids and verbascoside in 40Gesneriaceae plants

续表

40种苦苣苔科植物中均含有丰富的黄酮类化合物，其含量为0.31%～7.84%。报春苣苔属、半蒴苣苔属、吊石苣苔属和芒毛苣苔属的植物黄酮含量分布均无明确规律，含量高低差异较大。其中半蒴苣苔属和芒毛苣苔属总黄酮含量的整体水平偏高。

3 结论与讨论

对苦苣苔科植物中总黄酮含量和毛蕊花糖苷含量进行检测发现，4个属植物毛蕊花糖苷平均含量依次为半蒴苣苔属0.078%、报春苣苔属0.025%、芒毛苣苔属0.017%和吊石苣苔属0.004 4%；总黄酮平均含量低依次为半蒴苣苔属4.53%、芒毛苣苔属3.60%、报春苣苔属2.38%和吊石苣苔属1.85%。现代研究发现，诸多生理病理的发生、发展过程都与自由基和氧化损伤有着密切的关系。毛蕊花糖苷的神经保护作用、抗肿瘤、肝脏功能保护、抗炎症和抗病毒等作用与其较强的抗氧化和淬灭自由基的作用有直接关系［18－19］。试验结果表明，半蒴苣苔属植物含有较高的毛蕊花糖苷和总黄酮，毛蕊花糖苷的神经保护作用和抗炎作用与半数苣苔属植物在瑶族、景颇族和苗族等少数民族中用于神经衰弱和炎症的治疗应用一致，黄酮类化合物良好的淬灭自由基和抗氧化作用与民族用药中的抗炎、清热等应用一致，该类药材有望在抗老年痴呆药物方向做出突出贡献；而吊石苣苔属在毛蕊花糖苷和总黄酮含量上并不突出，但是由于其独特的石吊兰素成分已经被广泛应用于宣肺止咳和平喘等方面［20］。

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（责任编辑：孙小岚）

Measurement of Acteoside and Total Flavonoids Contents in 40 Kinds of Gesneriaceae Plants

CHEN Peng，XIE Ruixing，QIU Zhijing＊
（Key Laboratory of Southern Subtropical Plant Diversity，Fairylake Botanical Garden，Shenzhen ＆Chinese Academy of Sciences，Shenzhen，Guangdong518004，China）

To provide references for studying on Gesneriaceae plants，the acteoside and total flavonoids contents in 40kinds（four genera）of Gesneriaceae plants were measured by reversed phase high performance liquid chromatography and UV spectrophotometry determination separately.Results：Acteoside contained in 30kinds of Gesneriaceae plants，all the 11plant species of the genus Hemiboea contained acteoside while Aeschynanthus contained no acteoside.And the content in Hemiboea was higher among the four genera，0.078%on average，while that in Aeschynanthuswas the lowest，merely 0.004 4%on average.All the 40Gesneriaceae plants contained abundant flavonoids（0.31%～7.84%）.Flavonoids contents in Primulina，Hemiboea，Lysionotus and Aeschynanthus varied greatly and had no obvious regulation.Acteoside and total flavonoids contents were all the highest in Hemiboea plants，0.078%and 4.53%respectively.

Gesneriaceae；acteoside；total flavonoids

S－3

A

1001－3601（2016）08－0348－0094－03

2016－01－04；2016－07－31修回

国家自然科学基金资助项目“石蝴蝶属的分类学修订”（31200159）；广东省省级科技计划项目“观赏苦苣苔科植物在园林配置中的应用和评价”（2013B060400008）；深圳市城市管理局科技项目“苦苣苔科植物的药用功能研究和开发”（201412）；深圳市城市管理局科技项目基金“苦苣苔科植物种质创新和开发利用”（201312）

陈 朋（1981－），男，工程师，执业药师，硕士，从事中药学及植物化学研究。E－mail：chenpeng1003＠163.com

＊通讯作者：邱志敬（1981－），男，高级工程师，博士，从事苦苣苔科植物的分类与应用研究。E－mail：qiuzhijing＠foxmail.com