4种药物对齐口裂腹鱼鱼苗的急性毒性试验

于振海，王玉新，陈有光,郑玉珍，卢红

(山东省淡水渔业研究院，山东省淡水水产遗传育种重点试验室，山东济南250013)



4种药物对齐口裂腹鱼鱼苗的急性毒性试验

于振海，王玉新，陈有光,郑玉珍，卢红

(山东省淡水渔业研究院，山东省淡水水产遗传育种重点试验室，山东济南250013)

[摘要]采用半静水式试验方法探讨了在水温(20.1±1.5)℃、pH(8.01±0.12)、溶氧(5.1±0.9)mg/L条件下，敌百虫、车轮特宁、二溴海因、甲醛等4种鱼药对齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)鱼苗的急性毒性。结果显示：4种药物中敌百虫的96h半致死浓度最低，为0.473mg/L；甲醛的96h半致死浓度最高，为37.565mg/L。4种药物毒性大小顺序依次为敌百虫>二溴海因>车轮特宁>甲醛。4种药物的安全浓度分别为敌百虫0.128mg/L，车轮特宁0.886mg/L，二溴海因1.011mg/L，甲醛7.531mg/L。该结果表明：4种药物中，敌百虫和甲醛安全浓度低于常规用量，在生产中慎用；二溴海因与车轮特宁安全浓度高于常规用量，可在生产中安全使用。

[关键词]齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)；急性毒性；半致死浓度；安全浓度

齐口裂腹鱼(Schizothoraxprenanti)是鲤形目(Cypriniformes)鲤科(Cyprinidae)裂腹鱼亚科(Schizothoracinae)裂腹鱼属(Schizothorax)鱼类，自然分布于我国长江上游、金沙江、岷江、大渡河、青衣江、酋水、任河及乌江下游等水域,其肉味鲜美,是产区的名贵鱼类,也是我国特有的重要“冷水性经济鱼类”[1,2]。

由于齐口裂腹鱼具有较高的经济价值，近年来养殖面积逐渐增加。在养殖阶段，鱼苗容易因细菌、霉菌、寄生虫等病害侵袭而大批死亡[3]。采用药物进行病害防治是最直接、最有效和最经济的办法[4]。有关水产药物对鱼类急性毒性研究表明，鱼的种类不同、规格不同对药物的安全浓度都存在一定的差异[5]，用药过程中因对药物的毒性不明、浓度使用不当而造成鱼中毒的情况时有发生[6]。因此，通过急性毒性试验确定药物的安全浓度和毒性等级，以确定合适的药物及用药浓度是必要的。本试验选用常规的病害防治药物，通过急性毒性试验探讨试验药物对齐口裂腹鱼的安全浓度，以期为齐口裂腹鱼的病害防治时合理安全用药提供参考。

1材料与方法

1.1材料：

试验用鱼体长(7.5±1.0)cm，体重(2.0±0.3)g。健康活泼，无病、无伤、无畸形。试验前在试验条件下暂养3d，每天投食1次，试验开始前24h停止投食。

受试药物有甲醛、车轮特宁、二溴海因和敌百虫，药品规格及生产厂家等详见表1。

1.2试验方法

试验在规格60cm×40 cm×40 cm的白色塑料箱内进行。试验时间为2015年4月1日至4月27日，每个周期4 d，试验用水为养殖场用深井水，水质符合渔业水质标准( GB11607-89)，水温(20.1±1.5)℃、pH(8.01±0.12)、溶氧(5.1±0.9)mg/L。每箱盛水30L，苗10尾，每日测1次水温、pH、溶解氧。

表1　4种试验药物的规格与成分

采用半静态试验法，参照卢玲等[7]的方法在室内进行。试验期间不投饵，甲醛具有挥发性，为保证试验药液质量浓度，每隔24h 更换1次试验药液。试验开始和结束时，测定试验容器中受试物浓度。

根据预试验结果，在包括使鱼全部死亡的最低浓度和96h鱼类全部存活的最高浓度之间至少设置5个浓度组，以几何级数排布，浓度间隔系数小于等于2.2[8]。每个试验浓度组设2个平行，每一系列设1个空白对照。试验溶液调节至相应温度后，从驯养鱼群中随机取出鱼并随机迅速放入各箱中，每箱放鱼苗10尾。同一试验，试验用鱼在30min内分组完毕。

在24、48、72、96h后检查受试鱼状况，以试验对象失去活力、对外界刺激无反应为死亡标准[9]。在试验开始后3h或6h观察各处理组鱼的状况，并记录异常行为。

1.3数据处理

半致死浓度(LC50)、安全浓度(SC)[10]采用下述公式计算:

(1)

(2)

式中:xm为死亡组最大剂量的对数；LC50为半致死浓度，mg/L；d为相邻浓度的对数差；p为各组的死亡率，%；∑p为各组死亡率之和，%；SC为安全浓度，mg/L；B为48h LC50，mg/L;C为24hLC50，mg/L。

2结果与分析

整个试验过程中空白对照组没有出现死鱼现象，即死亡率为0。敌百虫、车轮特宁、二溴海因、甲醛等4种药物对齐口裂腹鱼的毒性试验结果如表2所示。

2.1敌百虫对齐口裂腹鱼的毒性

敌百虫中毒后的鱼苗对外界刺激反应能力降低，在水中翻滚，游泳时尾部摆动频率高，鱼体有明显弯曲现象，死前鱼体失去平衡，最后死于水底。浓度为0.2mg/L时，96h鱼死亡率为0；浓度为0.8mg/L时，24h内的死亡率为100%(表2)。经计算，敌百虫对齐口裂腹鱼的24、48h的半致死浓度分别为0.583、0.525mg/L，安全浓度为0.128mg/L(表3)。

2.2车轮特宁对齐口裂腹鱼的毒性

由表2可知，齐口裂腹鱼在药物浓度为1.000～1.496mg/L时96h内未出现死亡，当浓度为5mg/L时，鱼苗开始无明显不适，后逐渐反应迟钝，偶有突然窜动，身体失去平衡，约5h出现死亡，24h箱内鱼苗全部死亡(表2)。经计算，车轮特宁对齐口裂腹鱼的24、48h的半致死浓度为3.772、3.477mg/L，安全浓度为0.886mg/L(表3)。

2.3二溴海因对齐口裂腹鱼的毒性

齐口裂腹鱼放入二溴海因的水箱中后，药物浓度为10mg/L时，大约10min就出现失去平衡的现象，30min开始出现死亡，死亡前出现浮头，侧翻失去平衡的现象，死亡后鱼口张开，腹部略涨。药物浓度分别为10.0mg/L 、5.6mg/L的2个试验组的24h死亡率均为100%；浓度分别为1.0mg/L 和1.8ml/L的2个试验组96h死亡率均为0(表2)。经计算，二溴海因对齐口裂腹鱼的24、48h的半致死浓度均为3.369mg/L，安全浓度为1.011mg/L(表3)。

表2　4种药物对昆明裂腹鱼鱼苗的致死率

表3　4种药物的半致死浓度和安全浓度

2.4甲醛对齐口裂腹鱼的毒性

甲醛急性中毒的齐口裂腹鱼表现为不安乱窜，浮头，后身体侧翻失去平衡，最后死亡。药物浓度为10mg/L时，96h鱼死亡率为0；浓度为100mg/L时，24h内的死亡率为100%(表2)。经计算，甲醛对齐口裂腹鱼的24、48h的半致死浓度为70.771、50.097mg/L，安全浓度为7.531mg/L(表3)。

3讨论

3.14种药物对齐口裂腹鱼的毒性评价

半致死浓度(LC50)用来衡量药物对试验鱼毒性的大小，其值越小，药物毒性越大；其值越大，毒性越低[11,12]。以96h LC50为鱼类急性毒性分级标准，分为极高毒(<1mg/L)、高毒(1～10mg/L)、中毒(10～100mg/L)和低毒(>100mg/L)4个等级[8]。本试验中4种药物对齐口裂腹鱼的96h LC50顺序依次为甲醛>车轮特宁>二溴海因>敌百虫，按照药物对齐口裂腹鱼的毒性大小顺序依次为敌百虫>二溴海因>车轮特宁>甲醛。从本试验结果看：4种药物中敌百虫对齐口裂腹鱼是极高毒药物，二溴海因和车轮特宁是高毒药物，甲醛是中毒药物。由表3可知,4种药物对齐口裂腹鱼的半致死浓度基本表现为24h LC50>48h LC50>96h LC50，说明随时间的延长，4种药物对试验鱼的毒性效应相应提高。

3.24种药物对齐口裂腹鱼苗的用药安全

敌百虫为胆碱酯酶抑制剂，能将胆碱酯酶的活性点磷酸化而抑制其活性，因其在鱼体内残留量少、残留时间短而被广泛用于防治体外寄生甲壳类、单殖吸虫及肠内寄生的部分蠕虫，常用剂量为0.2～0.5mg/L[13]。试验中敌百虫对齐口裂腹鱼的安全浓度为0.128mg/L，低于常用剂量，并且其在毒性分级标准中属极高毒，因此在齐口裂腹鱼鱼苗的病害防治过程中不宜使用敌百虫。甲醛具有广谱性杀灭细菌、寄生虫、真菌、芽孢和病毒的作用，甲醛已被广泛应用于水生动物疾病防治，且使用剂量较大，常规用量为10～30mg/L[14]。试验中，甲醛的安全浓度为7.531mg/L，低于常规用量，但其毒性分级属中毒，因此在齐口裂腹鱼鱼苗的病害防治过程中甲醛要慎用。

二溴海因在水产养殖中作为杀菌型消毒剂，常用剂量为0.3～0.4mg/L ，多种水产动物安全浓度均高于常规用量，其安全系数较高，是很好的消毒剂[15]。试验中二溴海因的安全浓度为1.011mg/L，高于常规用量，说明二溴海因能够用于齐口裂腹鱼鱼苗的病害防治。车轮特宁为阿维菌素水乳剂生产制品，其有效成分为阿维菌素。阿维菌素对水产养殖动物对锚头鳋、中华鳋、纤毛虫、指环虫和线虫等寄生虫均有着极强的驱杀作用，现已广泛应用于水产动物体内外寄生虫病的防治[16]。车轮特宁的规定剂量为0.037～0.045mg/L。本试验中车轮特宁的安全浓度为0.886mg/L，高于常用剂量，说明车轮特宁能够用于齐口裂腹鱼鱼苗疾病的防治。由于阿维菌素对鱼类和虾蟹类毒性较强[17,18]，在病害防止过程中注意合理用药。

在生产上选用药物除了考虑药物的半致死浓度和安全浓度以外，还需对药物的常用浓度及用药时间进行综合考虑。

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[收稿日期]2015-11-03

[作者简介]于振海(1983-)，男，硕士，助理研究员，主要从事养殖工程研究，zhenhaiyu-007@163.com。

[中图分类号]S948

[文献标识码]A

[文章编号]1673-1409(2016)09-0038-04

[引著格式]于振海，王玉新，陈有光，等.4种药物对齐口裂腹鱼鱼苗的急性毒性试验[J].长江大学学报(自科版) ，2016，13(9)：38～41.