曲妥珠单抗对Her-2阳性乳腺癌患者肿瘤细胞增殖的影响

2016-06-07杨维艳刘亚宁

中国药业 2016年7期

关键词：细胞增殖乳腺癌

张　明，杨维艳，刘亚宁

（河北省任丘市人民医院，河北沧州　062550）

曲妥珠单抗对Her-2阳性乳腺癌患者肿瘤细胞增殖的影响

张明，杨维艳，刘亚宁

（河北省任丘市人民医院，河北沧州062550）

摘要：目的探究曲妥珠单抗对人类表皮生长因子受体2（Her-2）阳性乳腺癌患者肿瘤细胞增殖的影响。方法选取2011年2月至2013年2月收治的100例早期乳腺癌女性患者，根据实时定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）将其分为Her-2阳性组和Her-2阴性组，各50例，比较两组患者术前和化学治疗后的外周血细胞角蛋白19（CK19）表达水平。再将50例Her-2阳性患者随机均分为观察组和对照组，各25例，观察组于化学治疗后继续使用曲妥珠单抗进行治疗，疗程为3个月，比较两组患者化学治疗后3个月外周血CK19的表达水平。结果手术前Her-2阳性组CK19表达阳性50例（100.00%），Her-2阴性组CK19表达阳性16例（32.00%），差异有统计学意义（P＜0.05）；化学治疗后，Her-2阳性患者CK19表达阳性41例（82.00%），Her-2阴性患者CK19表达阳性7例（14.00%），差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组曲妥珠单抗治疗3个月后的CK19平均水平为（21.2±16.5）μg/L，对照组为（73.1±38.6）μg/L，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论早期乳腺癌患者中，Her-2基因的表达与与外周血CK19的水平密切相关，于化学治疗后应用曲妥珠单抗可明显降低外周血CK19的表达水平。

关键词：曲妥珠单抗；人类表皮生长因子受体2；乳腺癌；细胞增殖

对于早期乳腺癌患者，人类表皮生长因子受体2 （Her-2）基因的表达水平是影响其预后的重要因素，Her-2阳性患者5年生存率明显低于Her-2阴性患者［1］。研究表明，Her-2基因的表达与外周血中上皮源性细胞特异性标志基因细胞角蛋白19（CK19）的水平相关，而后者是早期乳腺癌外周血循环肿瘤细胞（CTCs）的异常表达产物［2］。由于Her-2基因的表达与CTCs水平尚缺少大量实验证据［3］，笔者选取我院100例早期乳腺癌患者，以CK19为标志物，比较患者Her-2表达与CTCs的关系，并探讨化学治疗（简称化疗）后继续使用曲妥珠单抗对外周血循环肿瘤细胞（CTCs）的影响，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

选取我院2011年2月至2013年2月收治的早期乳腺癌女性患者100例，纳入标准［4］：所有患者知晓本次试验并签署相关知情同意书；经术前穿刺、组织病理证实为早期乳腺癌；行一侧或双侧乳腺切除术并于术后行化疗；无高血压、糖尿病、心肝肾功能不全等严重内科疾病。根据实时定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术均分为Her-2阳性组和Her-2阴性组，各50例。Her-2阳性组患者年龄26～51岁，平均（44.5±3.8）岁；Her-2阴性组患者年龄26～52岁，平均（45.2±3.9）岁。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性，详见表1。

表1　乳腺肿瘤患者一般资料比较［例（%），n=50］

1.2方法

化疗方案［5］：环磷酰胺600 mg静脉注射，甲氨蝶呤10 mg静脉注射，5-氟尿嘧啶500 mg静脉滴注，先注射甲氨蝶呤，6 h后注射环磷酰胺和5-氟尿嘧啶，每7～10 d给药1次，每次用药2～3次，停用2～3周，持续6个月。两组患者于手术前、化疗、疗程结束后分别抽取静脉血，提取并于-80℃保存RNA。将50例Her-2阳性患者随机均分为观察组和对照组，各25例，观察组患者在化疗结束后继续给予曲妥珠单抗注射剂（商品名赫赛汀，上海罗氏制药有限公司，国药准字J20110020，规格为每瓶440 mg∶20 mL），1次/周，每次110 mg，静脉滴注，疗程为3个月。3个月后，以同样方法收集患者的静脉血标本，制备RNA。所有标本严格按照2700型PCR扩增仪（PE公司）说明书进行操作，使用TrizolRNA提取试剂盒（Promoga公司），CK19引物（上海生工公司合成）计算得到外周血CK19的相对浓度。

1.3统计学处理

采用SPSS 18.0统计学软件进行数据处理分析。计量资料以±s表示，采用t检验；计数资料以百分比表示，应用X2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

结果见表2和表3。

表2　Her-2阳性与阴性患者外周血CK19表达比较［例（%），n=50］

表3　曲妥珠单抗对Her-2阳性患者外周血CK19的影响（±s，μg/L，n=25）

组别观察组对照组t值　P治疗前81.6±49.2 79.6±45.7 0.15 >0.05治疗后21.2±16.5 73.1±38.6 6.20 ＜0.05

3　讨论

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，起源于乳腺腺上皮组织，发病率较高。由于乳腺本身并不是维持人体生命活动的重要器官，因此原位癌并不致命。但乳腺细胞丧失正常细胞的结构功能，细胞间松散，极易脱落发生转移，一旦发生转移将严重降低乳腺癌的预后，因此早发现、早治疗是关键。乳腺癌细胞最常见的转移方式为淋巴转移和血行转移［6-7］，在血液中发现肿瘤细胞是判断其发生转移的重要标志。

CK19是一种上皮特异性蛋白，在血液、骨髓和淋巴结等处不表达［8-9］，因此外周血中CK19升高对判断肿瘤转移具有重要意义。研究表明，Her-2基因与肿瘤细胞的增殖有密切关系，其高表达往往预示癌细胞有转移，分化低且预后较差，但其对CK19的影响目前尚不明确［10］。对于乳腺癌的治疗，以往为手术切除加术后化疗，但传统的化疗方案对外周血CK19降低效果不佳且治疗过程中的毒副反应较大［11］。

曲妥珠单抗是目前临床公认的唯一用于乳腺癌靶向治疗的药物，通过附着于Her-2来阻止人体表皮生长因子的附着，促使Her-2蛋白被相关蛋白酶降解，从而阻断癌细胞的增殖，提高Her-2阳性乳腺癌患者的无病生存期和总生存期［12］。曲妥珠单抗单独应用有效率较低，可能是由于癌细胞造成的低pH环境有利于其逃避曲妥珠单抗与之结合，目前尚不十分明确，但传统化疗后应用曲妥珠单抗可明显提高其有效率。美国国家癌症综合治疗联盟（NCCN）指南于2010年将曲妥珠单抗列为Her-2阳性乳腺癌患者的新型辅助治疗方案。

本研究结果显示，Her-2阳性的早期乳腺癌患者手术前和传统化疗后其外周血CK19表达阳性率均明显高于Her-2阴性的患者，观察组患者在应用曲妥珠单抗3个月后CK19水平明显低于观察组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，早期乳腺癌患者中，Her-2基因的表达可提高外周血中CK19的水平，降低乳腺癌的预后。于传统化疗后应用曲妥珠单抗可明显加强对Her-2阳性患者癌细胞增殖的抑制作用，减少CTCs数量，降低外周血CK19水平，但是否可以缩减传统化疗的剂量和疗程有待进一步探究。

参考文献：

［1］郭婧昀，姚广裕，顾繁，等.曲妥珠单抗对HER-2过表达乳腺癌细胞株mTOR信号通路影响的观察［J］.中华肿瘤防治杂志，2012，19（13）：983-986.

［2］顾建芬.赫赛汀治疗人类表皮生长因子受体2高表达晚期乳腺癌30例［J］.中国药业，2012，21（7）：54-55.

［3］殷科，曹永晋.曲妥珠单抗新辅助化疗表皮生长因子受体2阳性乳腺癌的临床疗效及安全性评价［J］.中国临床药理学杂志，2015，31（9）：725-727.

［4］吴志勇，孙胜杰，焦顺昌.曲妥珠单抗与顺铂序贯联合应用对乳腺癌细胞抑制作用的研究［J］.中国药物应用与检测，2012，9（1）：26-28.

［5］罗群英，甘炜坚，杜斌盛，等.3种化疗方案治疗乳腺癌的药物经济学分析［J］.中国执业药师，2015，12（4）：37-42.

［6］廖宁，张国淳，李学瑞，等.新辅助紫杉醇联合曲妥珠单抗在表皮生长因子受体2阳性可手术乳腺癌患者中的疗效及安全性评价［J］.中华肿瘤杂志，2010，32（7）：544-547.

［7］李伟，潘燕，李学军.HER2阳性乳腺癌治疗药物曲妥珠单抗耐药机制及新一代靶向药物研究进展［J］.中国临床药理学杂志，2014，30（1）：48-51.

［8］王研，李俊杰，狄根红，等.曲妥珠单抗治疗141例人表皮生长因子受体2阳性乳腺癌的回顾性分析［J］.中华肿瘤杂志，2014，32（11）：864-867.

［9］孙宏治，王巍，李晴，等.曲妥珠单抗联合辅助化疗治疗晚期乳腺癌的临床观察［J］.中国生化药物杂志，2014，32（5）：398-400.