老年卒中相关性肺炎患者外周血T淋巴细胞亚群及血清炎症因子变化的临床分析

刘秋红　张杰文　杨景瑞

1)新乡医学院　新乡　453003　　2)河南省人民医院神经内科　郑州　450003



老年卒中相关性肺炎患者外周血T淋巴细胞亚群及血清炎症因子变化的临床分析

刘秋红1)张杰文2)#杨景瑞1)

1)新乡医学院新乡4530032)河南省人民医院神经内科郑州450003

【摘要】目的探讨老年卒中相关性肺炎(SAP)患者外周血T淋巴细胞亚群及血清降钙素原(PCT)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的变化并分析其临床应用价值。方法连续收集发病24 h内入院的老年卒中患者63例，入院时对其进行NIHSS评分，根据1周内是否发生SAP，分为SAP组和非SAP组；并以同时期门诊体检中心30例健康老年人为对照组。3组入院后于24～48 h抽血送检血清降钙素原(PCT)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及细胞免疫指标(CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+)，比较其差异，并根据临床资料和统计分析其临床应用价值。结果SAP组、非SAP组血清PCT及hs-CRP均明显高于正常对照组(P<0.05)。SAP组、非SAP组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ T淋巴细胞水平均低于对照组，CD8+T淋巴细胞水平均高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)。结论卒中相关性肺炎患者发病早期即存在细胞免疫功能低下，血清PCT和hs-CRP明显升高，且与患者的预后相关，PCT诊断早期细菌感染的特异性优于hs-CRP；其生物标志物对诊断、病情及预后评估提供临床价值。

【关键词】老年；卒中相关性肺炎；外周血T淋巴细胞亚群；炎症因子

卒中后感染临床发生率15%～65%，且与不良预后明显相关，严重影响患者的生存质量和加重患者的经济负担。卒中相关性肺炎(SAP)是脑卒中急性期死亡的首要原因，也是脑卒中后最常见的感染类型。近期研究[1]发现，急性脑血管疾病患者的感染易感性增加，可能与其诱发的免疫功能抑制有关。中枢神经系统和免疫系统二者相互作用、密切相关，通过免疫系统可反应中枢神经系统的损伤。本文观察老年卒中相关性肺炎患者血清PCT、超敏C反应蛋白(hs-CRP)以及外周血T淋巴细胞亚群的变化并分析其临床意义，为临床更好的诊断和治疗卒中相关性肺炎提供依据。

1对象和方法

1.1研究对象随机选取我院神经内科2014-03—2015-09收治的老年卒中患者63例为观察对象，男37例，女26例；年龄61～84(68.2±14.8)岁。并以同期门诊体检中心30例健康老年人为对照组，男18例，女12例；年龄60～86(71.4±13.6)岁。2组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经本院伦理委员会批准，所有研究对象或其家属均签署知情同意书。

纳入标准：(1)脑卒中发病后24 h内入院。(2)磁共振弥散加权成像显示为急性脑梗死灶或CT扫描证实为新发脑出血(不包括原发性蛛网膜下腔出血)。(3)入院当天根据美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale，NIHSS)评分>3分。(4)年龄≥60岁。肺部感染诊断按2010年SAP诊治中国专家共识的诊断标准[2]：(1)出现感染的临床症状(肺炎，尿路感染和不明原因的发热)；(2)血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)>5 mg/L；(3)血清降钙素原浓度>0.5 μg/L。在入院后第7或第14天所有上述3项指标完全满足的患者划入感染组(SAP组)，在整个观察期上述3项指标均未出现的患者划入未感染组(非SAP组)。排除标准：(1)发病前6个月内有卒中史、颅脑外伤史且遗留明显神经功能缺损；(2)发病前3个月内有慢性细菌感染性基础疾病(如支气管扩张、脓肿、皮肤感染、尿路感染等)；(3)合并恶性肿瘤、严重血液系统疾病、自身免疫性疾病及其他中枢神经系统疾病的患者；(4)慢性酒精中毒、吸毒或存在严重心、肺、肝、肾功能不全；(5)短暂性脑缺血发作；(6)<24 h出院或死亡。2组临床资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

表1　2组临床资料比较　[n(%)]

1.2方法

1.2.1一般资料：包括患者年龄、性别、个人史和既往史、NIHSS评分[3]，评估神经功能缺损程度。

1.2.2研究方法：入院后次日清晨取空腹外周静脉血3 mL分装于不同的试管中，分别用于检测PCT、hs-CRP和细胞免疫指标(CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+)，比较各组差异，分析其临床意义。

1.2.3检测方法：①炎症因子的检测：PCT检测采用德国BRAHM.S公司的E170全自动电化学发光免疫分析仪和原装试剂盒严格按照操作说明进行检测，正常值为<0.5 μg/L。hs-CRP的检测采用i-CHROMA全自动蛋白分析仪进行，试剂盒由韩国医学诊断产品公司提供，正常值为<5 mg/L。②细胞免疫指标的检测：采用美国Beckman Coulter公司的EPICS-XL流式细胞仪定量检测外周血T淋巴细胞亚群。在每支试管中加入10 μL四标记的荧光单克隆抗体(CD45-FITC/CD4-RDl/CD8-ECD/CD3-PC5)，继之加入EDTA-K2抽取的静脉血100 μL后混合均匀，室温避光孵育20 min后加人流式细胞专用红细胞裂解液500 μL裂解红细胞，在室温下避光反应15 min后在各试管中加入PBS缓冲液500 μL混合均匀，在室温下避光放置10 min后进行流式细胞仪检测，使用软件系统进行定量分析并记录数据。

2结果

2.1卒中组与健康对照组血清PCT、hs-CRP比较SAP组、非SAP组血清PCT及hs-CRP均明显高于正常对照组；SAP组hs-CRP、PCT均明显高于非SAP组(P<0.05)。见表2。

表2　卒中组与正常对照组血清PCT及hs-CRP比较

注：与正常对照组相比，aP<0.05；与SAP组相比，bP<0.05

2.2卒中组与健康对照组T淋巴细胞亚群比较SAP组、非SAP组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与对照组比较有差异均有统计学意义(P<0.01)。见表3。

表3　卒中组与正常对照组T淋巴细胞亚群比较±s)

注：卒中组与对照组比较，P<0.01

3讨论

卒中在世界范围内是致死和永久致残的主要原因。目前由于生活节奏的加快和水平的提高，以及人口老龄化的加剧，脑卒中的发病率骤增。免疫和炎症是卒中病程中的关键因素，免疫和炎症反应参与急性脑损伤和卒中后康复，卒中介导的损伤可能影响外围免疫系统功能。很多原因均可引起卒中后相关感染，如因吞咽障碍或误吸及排痰不利等，目前采用的常规检查手段不仅时间过长，且灵敏性差(包括外周血白细胞、细菌培养和胸部影像检查等)，因此可能延误即时和更有效的治疗。机体在发生炎症时产生的一些蛋白质成为急性期蛋白，hs-CRP是临床研究和使用最多的炎症指标之一。hs-CRP由肝脏产生，当机体受到感染、创伤、严重的精神打击、手术等刺激时均会导致体内hs-CRP产生增多。机体在出现急性脑损伤时血hs-CRP会明显升高，无论是否合并感染均会有一定程度的升高，但程度不同。本研究提示，卒中患者血清hs-CRP均高于健康对照人群，SAP组hs-CRP明显高于非SAP组，是一种灵敏度较高但特异度较低的炎症指标。hs-CRP明显升高时卒中相关性感染的可能性较大，对于临床医师选择治疗及判断预后有一定的指导意义。

PCT是一种由甲状腺分泌的降钙素的前体物质，正常情况下体内仅有少量的PCT存在；但是当机体受到感染时则PCT的浓度会明显升高，这时体内的PCT则主要由甲状腺以外的器官和组织分泌。研究[4]显示，PCT与卒中相关性感染的程度呈正相关。在急性脑血管病中PCT显著升高，与其他指标相比(如WBC、CRP、细菌培养等)，其特异性和敏感性均高，已逐渐成为诊断、鉴别SAP的可靠指标。本研究结果显示，急性脑血管病患者血清PCT均明显高于正常对照组，SAP组PCT明显高于非SAP组，由此可见，PCT对于诊断卒中相关性肺炎方面具有重要的临床意义，可为临床提供指导。

SAP的发生是老年卒中患者面临的最大难关，症状加重可能会导致神经系统和免疫系统的功能受到很大限制，可以加快机体被外界病菌感染的速度，也会加重患者的病情。研究证实[5]，T淋巴细胞在胸腺中发育成熟，其主要功能是介导细胞免疫和免疫调节，既是免疫反应的效应细胞，还是免疫调节细胞。T淋巴细胞种类众多，分类方法多样，而CD4+和CD8+又是T淋巴细胞免疫的核心，其中CD4+/CD8+可在一定程度上反应机体的免疫状态，当机体免疫状态受到抑制时体内CD4+/CD8+明显降低。本研究显示，卒中组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+T淋巴细胞水平均低于对照组，CD8+T淋巴细胞水平均高于对照组，说明卒中组体内存在着免疫细胞数量的异常和免疫功能的抑制。SAP是导致机体卒中后期机体免疫系统功能减弱的原理，必要时给予调节免疫的药物促进患者恢复。

综上所述，老年卒中相关性肺炎患者发病早期即存在细胞免疫功能低下，血清PCT和CRP明显升高，且与患者的预后相关，PCT诊断早期细菌感染的特异性优于hs-CRP；其生物标志物对SAP患者的诊断、病情及预后评估提供了参考依据。临床上对SAP的治疗，在积极促进机体免疫功能及细胞免疫平衡的恢复的同时，还应针对性给予抗病原微生物治疗。

4参考文献

[1]Prass K，Braun JS，Dimagl U，et al.Storke propagates bacterial aspiration to pneumonia in a model ofcerebral ischemia[J].Stroke，2006，37(10)：2 607-2 612.

[2]中华医学会神经病学分会脑血管病学组急性缺血性脑卒中诊治指南撰写组.中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010[J].中华神经科杂志，2010，43(2)：146-153.

[3]卒中相关性肺炎诊治中国专家共识组.卒中相关性肺炎诊治中国专家共识[J].中华内科杂志，2010，49(12)：1 075-1 078.

[4]Myrianthefs PM，Kalafati M，Samara I，et al.Nosocomial pneumonia[J].Crit Care Nut Q，2004，27(3)：241-257.

[5]Matwiyoff GN，Prahl JD，Miller RJ，et al.Immune regulation of procalcitonin：a biomarker and mediator ofinfection[J].Inflamm Res，2012，61(5)：401-409.

(收稿2015-12-24修回2016-03-22)

【中图分类号】R743.3

【文献标识码】A

【文章编号】1673-5110(2016)08-0034-02

#通讯作者：张杰文，E-mail：zhangjiewen9900@126.com