FS、ENA-78和RANTES在子宫内膜异位症患者早期检测中的意义

顾华芬　张丽文　梅小会　陈亚萍

200240　上海市，复旦大学附属上海市第五人民医院妇产科



·论著·

FS、ENA-78和RANTES在子宫内膜异位症患者早期检测中的意义

顾华芬张丽文梅小会陈亚萍

200240上海市，复旦大学附属上海市第五人民医院妇产科

【摘要】目的观察卵泡抑素(FS)、上皮来源的中性粒细胞活化肽(ENA-78)和T细胞表达和分泌的调节性激活因子(RANTES)在子宫内膜异位症(EMs)患者检测中的意义。方法EMs患者120例为EMs组。根据美国生育协会修正分期法(r-AFS)分期分为Ⅰ期19例，Ⅱ期36例，Ⅲ期39例和Ⅳ期26例，根据痛经评分分为0分26例，1分48例，2分31例和3分15例。另选择同期在确诊为良性肿瘤的患者30例为在位组。选择同期在我院行健康体检的正常女性30例为对照组。观察3组的FS，ENA-78和RANTES水平变化，EMs患者血清FS，ENA-78和RANTES水平与痛经分期和评分的关系及各指标之间的相关性分析。结果EMs组的FS，ENA-78和RANTES水平明显高于在位组和对照组(P<0.01)，在位组明显高于对照组(P<0.01)。机体的FS，ENA-78和RANTES水平随着EMs分期和痛经评分的升高而升高(P<0.01)。EMs组的FS水平与ENA-78和RANTES水平呈正相关(r值分别为0.658、0.568，P<0.05)ENA-78水平与RANTES水平呈正相关(r=0.725，P<0.05)。结论FS、ENA-78和RANTES参与了EMs发生发展的过程，各指标之间相互协同，对于早期诊断EMs具有重要意义。

【关键词】子宫内膜异位症；早期诊断；痛经；卵泡抑素

子宫内膜异位症(EMs)是常见病，多发病，常常导致盆腔炎症和纤维化，严重影响女性生理、心理和社会的健康状态，由于发病机制尚不明确，EMs的治疗仍然十分困难。研究表明，EMs的发病与机体的炎症、免疫和盆腔的微环境改变等具有明显的联系[1]。卵泡抑素(FS)是对垂体卵泡刺激素具有抑制功能的蛋白质，受多种细胞因子的调控，有研究证实血清FS水平对EMs具有临床诊断价值，其灵敏度高于CA125[2]。上皮来源的中性粒细胞活化肽(ENA-78)是一种重要的炎性介质，具有重要趋化和激活中性粒细胞的趋化因子，作为炎症网络中的重要环节，对新生血管的形成具有重要的调节作用[3]。T细胞表达和分泌的调节性激活因子(RANTES)是一种对单核巨噬细胞系统和淋巴细胞具有选择性的趋化因子，可以活化巨噬细胞，参与集体的免疫反应[4]。本研究通过对EMs患者机体的FS、ENA-78和RANTES水平的研究，观察FS、ENA-78和RANTES水平与EMs发生发展的关系。

1资料与方法

1.1一般资料选择2014年1月至2015年6月在我院就诊的EMs的患者120例为EMs组，均未经激素和药物治疗，年龄18～40岁，平均年龄(35±4)岁；平均体重(56±5)kg；月经周期(32±3)d。根据美国生育协会修正分期法(r-AFS)分期分为Ⅰ期19例，Ⅱ期36例，Ⅲ期39例和Ⅳ期26例，根据痛经评分0分26例，1分48例，2分31例和3分15例。另选择同期在我院确诊为良性肿瘤的患者30例为在位组，年龄18～40岁，平均年龄(35±3)岁；平均体重(56±6)kg；月经周期(31±3)d；术后病理分别为卵巢浆液性囊腺瘤12例，卵巢黏液性囊腺瘤7例，卵巢成熟畸胎瘤6例和输卵管中肾管囊肿5例。选择同期我院行健康体检的正常女性30例为对照组，平均年龄(36±3)岁；平均体重(56±6)kg；月经周期(31±4)d。所有入组者均知情同意，并排除：(1)有肝炎，结核和急性肺炎等急性感染；(2)心肝肾等重要脏器功能不全；(3)高血压，糖尿病和恶性肿瘤等慢性疾病；(4)生殖器官发育不良。3组年龄、体重和月经周期等一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1血液标本的储备:EMs组和在位组入院第1天和健康体检者当天抽取空腹血液2～3 ml，以转速为3 000 r/min，离心半径为10 cm，离心20 min，分离血清，并保存于-70℃的冰箱中待测。采用酶联免疫法测定FS、ENA-78和RANTES，采用Freedom Evolyzer 2150 型全自动酶标仪，操作按照试剂盒进行操作。试剂盒均购自美国R&D 公司。

1.2.2痛经评分标准：入院时进行痛经评分：无痛经为0分；有痛经，但无需服药，不影响正常的工作和生活为1分；痛经需要口服药物才能缓解，对日常的生活和工作有影响为2分；痛经需要服药，影响正常生活，不能进行正常的工作。

1.2.3观察指标：观察EMs组，在位组和对照组的FS，ENA-78和RANTES水平变化，EMs患者血清FS，ENA-78和RANTES水平与痛经分期和评分的关系，各指标之间的相关性分析。

2结果

2.13组FS、ENA-78和RANTES水平的变化EMs组的FS、ENA-78和RANTES水平明显高于在位组和对照组(P<0.01)，在位组明显高于对照组(P<0.01)。见表1。

表13组FS、ENA-78和RANTES水平比较

组别FS(ng/L)ENA-78(mg/L)RANTES(ng/L)对照组(n=30)55±9 0.87±0.1527±10 在位组(n=30)134±12*1.49±0.38*44±10*EMs组(n=120)758±24*#2.84±0.79*#128±28*# F值32179.205190.367455.535 P值0.0000.0000.000

注：与对照组比较，*P<0.01；与在位组比较，#P<0.01

2.2FS、ENA-78和RANTES水平与EMs分期的关系机体的FS、ENA-78和RANTES水平随着EMs分期的增高而升高(P<0.01)。见表2。

表2FS，ENA-78和RANTES水平与EMs分期的关系

r-AFS分期FS(ng/L)ENA-78(mg/L)RANTES(ng/L)Ⅰ期(n=19)565±171.32±0.2879±17Ⅱ期(n=36)644±28*2.14±0.87*113±22*Ⅲ期(n=39)817±23*#3.25±0.91*#136±32*#Ⅳ期(n=26)970±26*#△4.31±1.19*#△171±34*#△ F值1362.01852.39547.044 P值0.0000.0000.000

注：与Ⅰ期比较，*P<0.01；与Ⅱ期比较，#P<0.01；与Ⅲ期比较，△P<0.01

2.3FS，ENA-78和RANTES水平与痛经评分的关系FS，ENA-78和RANTES水平与EMs患者痛经评分的升高而升高(P<0.01)。见表3。

表3FS，ENA-78和RANTES水平与痛经评分的关系

痛经评分FS(ng/L)ENA-78(mg/L)RANTES(ng/L)0(n=26)583±181.27±0.4387±181(n=48)675±25*2.18±0.78*126±23*2(n=31)835±28*#4.09±0.97*#143±34*#3(n=15)1168±31*#△5.09±1.13*#△174±38*#△ F值2127.468108.67037.146 P值0.0000.0000.000

注：与0分比较，*P<0.01；与1分比较，#P<0.01；与2分比较，△P<0.01

2.4EMs组的FS、ENA-78和RANTES水平之间的相关性分析EMs组的FS水平与ENA-78和RANTES水平呈正相关(r值分别为0.658和0.568，P<0.05)，ENA-78水平与RANTES水平呈正相关(r=0.725，P<0.05)。

3讨论

EMs是妇科的常见病，由于病因复杂，多种因素参与了其发生发展过程，致诊断困难，早期误诊率高达70%以上。目前腹腔镜仍是本病惟一的确诊方法，但由于为有创，费用高和需要麻醉等缺点，导致早期诊断率不高，治疗效果欠佳。血清标志物具有无创，费用低，可重复性等优点，可以通过血清标志物含量推测EMs的发生发展，对本病的早期诊断和治疗具有重要意义，可以减少EMs病情的延误和提高EMs的早期诊断率。本组研究表明EMs机体的FS水平明显高于在位组和对照组，并且随着EMs分期和痛经评分增加而出现明显增加，说明FS参与了EMs疾病的发生发展过程，提示FS在诊断EMs中具有重要意义。FS是转化生长因子-β家族的单体蛋白，通过拮抗激活激素来发挥重要的生理功能。FS主要的存在于卵泡、胎盘、子宫内膜和胰腺等组织中，以卵泡内最多。FS参与EMs发病的作用并不明确，有研究显示，FS对子宫内膜组织的分化，间质的侵袭，免疫调节和凋亡方面具有重要作用，并参与了EMs的发生发展过程[5]。FS在EMs中升高，可能与子宫内膜分泌FS，并释放入血，从而引起血清中的FS水平明显升高[6]。血清中的FS水平升高，对活化素的拮抗作用明显增强，从而加大子宫内膜的损害，而血清活化素表达的升高，也同时促进外周血FS水平的升高。

本组研究表明EMs组的ENA-78水平明显高于在位组和对照组，EMs组的血清ENA-78水平随着EMs分期和痛经评分升高而升高，说明ENA-78参与了EMs疾病的发生发展过程，是发生EMs局部微环境中的重要细胞因子，微环境中的细胞因子相互作用和相互促进，直接或者间接促进异位内膜和间质的增值，对于诊断EMs具有重要意义[7, 8]。与文献报道显示EMs患者的ENA-78水平明显高于对照组，并且与EMs的分期具有明显的相关性一致[9]。ENA-78具有趋化中性粒细胞，与中性粒细胞的特异性受体结合，促进中性粒细胞分泌更多的生长因子和细胞因子，延缓中性粒细胞的凋亡，具有多种调节和免疫叠加的作用，形成复杂的细胞因子的级联反应[10]。ENA-78能够直接促进EMs异位内膜新生血管的形成，间接促进血管内皮细胞生长因子的表达，为异位子宫内膜的种植奠定了基础。ENA-78诱发异位内膜与腹膜间皮细胞的黏附，激活基质金属蛋白酶，并促进降解细胞外基质，有利于异位内膜种植在腹膜和其他结缔组织，刺激间质细胞增生[11]。ENA-78的产生受到多种细胞因子和卵巢激素的调节，作用于中心粒细胞，对于维持EMs的发生发展具有重要作用。

本研究表明，EMs患者机体的RANTES水平明显高于在位组和对照组，并随着EMs的分期和痛经评分升高而升高，说明RANTES水平的升高与EMs的发生发展具有重要联系，与文献报道RANTES与EMs分期和痛经评分呈正相关[12,13]一致。RANTES作为趋化因子对中性粒细胞，单核细胞和淋巴细胞等具有趋化和激活作用的细胞因子，参与机体的急慢性炎性反应。有研究表明RANTES是一种巨噬细胞系统最强的细胞趋化因子，可以通过两种不同的信号转导途径作用T细胞[14]：低浓度的RANTES作为一种典型的趋化蛋白，可引起钙离子的内流，导致细胞受体的极化和细胞迁移；高浓度的RANTES引起持续的钙离子内流，过度的磷酸化和细胞活化。RANTES升高通过活化和趋化巨噬细胞和淋巴细胞到异位灶中，分泌大量的细胞因子如白介素和肿瘤坏死因子等[15]，诱导异位内膜表达大量的RANTES，而RANTES又进一步趋化淋巴细胞和巨噬细胞到异位内膜中。从而形成炎性细胞与RANTES相互作用形成的正反馈弧，大量的炎性细胞的聚集。又可以诱发机体的免疫反应，使免疫细胞的活性和数量出现明显变化，分泌炎性介质和细胞因子，参与局部血管形成、粘连和纤维化[16]。从而促进异位内膜的生长，参与EMs的病理生理过程。

本组研究发现EMs患者的FS水平与ENA-78和RANTES水平呈正相关，ENA-78水平与RANTES水平呈正相关。说明EMs的发生发展过程可能与多种细胞因子相互促进，相互作用具有明显的相关性，3个指标可能在EMs的复杂机制中起到关键性桥梁作用，在形成EMs疾病的细胞因子网络中均具有重要意义，随着对EMs研究的深入，有利于探索出诊断EMs的新方法，甚至为治疗EMs找到新的靶点。总之，FS，ENA-78和RANTES参与了EMs发生发展的过程，各指标之间相互协同，对于早期诊断EMs具有重要意义。

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Significance of FS, ENA-78 and RANTES in detection of patients with endometriosis

GUHuafen,ZHANGLiwen,MEIXiaohui,etal.

DepartmentofGynaecologyandObstetrics,TheFifthPeople’sHospitalofShanghaiCityAffiliatedtoFudanUniversity,Shanghai200240,China

【Abstract】ObjectiveTo observe the significance of follistatin (FS), epithelial neutrophil activating peptide (ENA)-78 and regulated upon activation, normal T cell expressed and secreted (RANTES) in detection of patients with endometriosis (EMs).MethodsOne hundred and twenty patients with EMs, from January 2014 to June 2015, were served as EMs group, who were divided into stageⅠ(n=19), stageⅡ(n=36), stage Ⅲ (n=39) and stage Ⅳ (n=26) according to the revised American Fertility Society (r-AFS),moreover,they were divided into 0 score (n=26), 1 score (n=48), 2 scores (n=31) and 3 scores (n=15) according to Dysmenorrhea Scoring. Besides the 30 patients with benign tumors were selected as eutopic endometrium group and the other 30 healthy women were served as control group. The levels of FS, ENA-78 and RANTES were detected and compared among EMs group, eutopic endometrium group and control group, and the levels of FS, ENA-78 and RANTES were observed in different EMs stages and dysmenorrhea scores, furthermore, the correlation among different indexes was analyzed.ResultsThe levels of FS, ENA-78 and RANTES in EMs group were significantly higher than those in eutopic endometrium group and control group (P<0.01), which in eutopic endometrium group were significantly higher than those in control group (P<0.01). The levels of FS, ENA-78 and RANTES were increased,with the increase of EMs staging and dysmenorrhea scoring (P<0.01). The FS levels in EMs group were positively correlated to those of ENA-78 (r=0.658,P<0.05) and RANTES (r=0.568,P<0.05),moreover ENA-78 levels were positively correlated to those of RANTES (r=0.725,P<0.05).ConclusionFS, ENA-78 and RANTES are involved in the pathogenesis and development of EMs, with synergism effects among them,which play an important role in early diagnosis of EMs.

【Key words】endometriosis; early diagnosis; dysmenorrhea; follistatin

(收稿日期：2015-11-03)

【中图分类号】R 711.71

【文献标识码】A

【文章编号】1002-7386(2016)10-1484-03

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.10.012