酶—超声双辅助提取中华芦荟多糖的工艺分析

闵莉静　郑卫红　赵明星　葛海霞

摘 要 提出了酶-超声双辅助提取中华芦荟多糖工艺，并优化提取条件，最终获得到最佳提取工艺条件为，纤维素酶、果胶酶之比（V∶m）为1∶2、超声温度80 ℃、超声时间60 min、料液比1∶20、乙醇浓度80%、超声功率300 W、超声次数3次。

关键词 中华芦荟多糖；酶；超声；提取工艺

中图分类号：TQ461 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2016）01--02

中华芦荟又称斑纹芦荟，是库拉索芦荟的变种，属于可食芦荟。具有一定的药用价值。芦荟多糖能扶正祛邪，增強免疫，美容护肤，抗肿瘤，降血脂、血糖，有助于肝炎、肾炎、红斑狼疮等病的治疗，有利于老年人的保健[1]。

本文在参考传统提取方法的基础上，创新性地提出酶-超声双辅助提取中华芦荟多糖，并通过单因素和正交设计实验优化提取条件。

1 材料与方法

1.1 材料

无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、苯酚、浓硫酸、果胶酶、纤维素酶、中药粉碎机、超声清洗仪、烘箱、电子天平和紫外分光光度计。

1.2 方法

1.2.1 酶-超声双辅助提取中华芦荟多糖

新鲜、肥厚的中华芦荟若干，清洗，小心去皮，取肉质部分，搅碎，加水浸泡过夜，加果胶酶/纤维素酶作用2 h，超声恒温水浴加热，4层纱布过滤得滤液，浓缩，搅拌，滴加入乙醇溶液中，5 000 r/min离心5 min，取上清，用丙酮、无水乙醇、乙酸乙酯洗涤离心得沉淀，烘干。

称取样品若干溶于水，移入2 mL比色管中，加入1.0 mL 6%苯酚溶液及5.0 mL浓硫酸，静置20 min，摇匀，40 ℃放置15 min。以空白组作试剂空白，于490 nm处测吸光度值。

1.2.2 工艺优化实验

酶种类：果胶酶/纤维素（mL∶g）为0∶0、0 ∶0.1、0.1∶0、0.2∶0.1、0.1∶0.2、0.2∶0.2、0.2∶0.3。料液比为1∶5、1∶10、1∶20。超声时间：20、30、40、50、60 min。超声温度为40、50、60、70、80 ℃。超声功率为40、60、80、100 W。超声次数响：1、2、3、4、5次。乙醇浓度：滴加入1、2、2.5、3、3.5倍体积95%乙醇沉淀。

在单因素实验基础上设计正交设计实验见表1。

2 结果与分析

优化实验结果表明，酶的加入有利于多糖的提取，综合考虑成本及效率，确定纤维素酶：果胶酶（v∶m）比例为1∶2；溶剂的增加对产率为负增长，说明溶剂的量不是提取的关键，确定料液比1∶5；乙醇浓度为80%时，芦荟多糖提取产率最高。

超声时间对多糖产率的帮助呈现先增后趋于稳定，确定超声时间应为50 min；超声时间对多糖产率的帮助呈现先增后减，确定超声温度为70 ℃。超声功率和超声次数对芦荟多糖的提取产率影响均不是很大，考虑能耗和效率，最终超声功率为60 W、超声次数为3次；

正交试验结果表明，在4种因素的作用下，对中华芦荟多糖产率影响的排序为超声温度>超声时间>料液比>乙醇浓度，最终确定最佳提取条件为A3C3B3D2，即超声温度80 ℃、超声时间60 min、料液比1∶20、乙醇浓度80%。

3 结论与讨论

本试验优化了由酶-超声联用双辅助提取中华芦荟多糖的提取工艺，最佳提取工艺条件为，纤维素酶：果胶酶（v∶m）为1∶2、超声温度80 ℃、超声时间60 min、料液比1∶20、乙醇浓度80%、超声功率300 W、超声次数3次。

参考文献

[1]陈闯，邵淑丽，李怀永，等.芦荟多糖药理作用及提取工艺研究[J].高师理科学刊，2014（4）：55-57

（责任编辑：赵中正）