不同产地八月瓜总黄酮的含量比较

李晓艳 刘杰 刘义伟 严锐 许义红 李香

【摘要】目的：紫外分光光度法测定不同产地八月瓜中总黄酮的含量。方法：以70%乙醇、80℃水浴回流1h，料液比1∶25，测定波长510nm。结果：总黄酮回归方程为C=9.452×10-2A-4.362×10-3（R=0.9992），在0.0154～0.0769mg范围内有良好的线性关系，平均加样回收率为98.90%（RSD为1.91%）。结论：不同产地八月瓜总黄酮含量存在一定差异。

【关键词】八月瓜；不同产地；总黄酮；紫外分光光度法

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】A 【文章编号】1007-8517（2016）07-0013-02

Abstract：Objective To establish a method of determining the total flavonoids content of Holboellia latifolia in different regions by Uv-spectrophotometry.Methods With 70% ethanol， water circumfluence for an hour in 80℃，ratio of solid to liquid 1∶25，and detection wavelength 510nm.Result The total flavonoids has a good linear relationship in 0.0154-0.0769mg.The regression equation is C=9.452×10-2A-4.362×10-3（R=0.9992）. And the average sample recovery rate is 98.90%（RSD=1.91%）.Conclusion The total flavonoids content of Holboellia latifolia has some differences in different regions.

Keywords：Holboellia latifolia；different regions； total flavonoids；Uv- spectrophotometry

八月瓜为三叶木通Akebia trifoliate（Thunb.）Koidz的果实，具有消肿、镇痛、通乳、抗癌的作用。其主要化学成分为齐墩果酸、黄酮、多糖等成分[1-2]。实验采用紫外分光光度法测定5个不同产地八月瓜中总黄酮含量，为不同产地八月瓜的质量研究提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 紫外可见分光光度计（GBC cintra 20 澳大利亚）；WS205十万分之一电子天平（瑞士梅特公司）；DZG-6000电热恒温鼓风干燥箱（上海森信实验仪器有限公司）；HA-4恒温水浴锅（常州澳华仪器有限公司）；HS10260D超声波清洗机。

1.2 材料 葡萄糖（批号：20141110，天津市科密欧化学试剂开发中心）；芦丁对照品（批号：0080-9705，中国药品生物制品检定所）；所用试剂均为分析纯。八月瓜药材采于贵州云顶、大定、云雾、王司、都匀，由黔南民族医学高等专科学校李香副教授鉴定为木通科木通属落叶木质藤本植物Akebia trifoliate（Thunb.）Koidz的果实。

2 方法与结果

2.1 波长的确定 取芦丁对照品及八月瓜样品的铝配合物测定液，以相应试剂为空白对照，在波长200～600nm扫描，扫描结果显示两者在510nm处有最大吸收，故实验选取510nm作为测定波长。

2.2 对照品溶液的制备 精密称量芦丁对照品25.64mg，置50ml容量瓶中，加入60%的乙醇定容至刻度，摇匀，即配制成浓度为0.5128mg/ml的對照品溶液。

2.3 供试液的制备[3] 称取干燥至恒重、过四号筛的八月瓜药材约0.1 g，加入2.5ml的70%的乙醇80℃回流1h。过滤，水浴浓缩挥干溶剂。加入60%乙醇微热溶解转移至25ml容量瓶中，定容至刻度即得供试液。取0.5ml的各样品溶液至10ml的试管中，加入1ml的5%NaNO2溶液，摇匀，放置5min，加入1ml的10%Al（N03）3溶液，摇匀，放置5min，加入5ml的6%NaOH溶液，用60%乙醇定容至刻度，摇匀，放置5min，作为待测液。

2.4 方法学考察[4]

2.4.1 标准曲线的制备 精密吸取标准品母液0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5ml置10ml试管中。加5% NaNO21.0ml，摇匀放置5min；加10% Al（N03）3 1.0ml，摇匀放置5min；加6%NaOH溶液5.0ml，加60%乙醇至刻度，摇匀放置5min，得浓度为0.0154、0.0256、0.0359、0.0462、0.0564、0.0667、0.0769mg/ml的对照品溶液。以相应试剂作空白对照，于510nm处测定吸光值。得回归方程为：C=9.452×10-2A-4.362×10-3（R=0.9992）（C为浓度，A为吸光度）其。表明吸光度与浓度在0.0154～0.0769mg范围内有良好的线性关系。

2.4.2 精密度实验精密 称取八月瓜药材粉末约0.1 g，按“2.3”项制备供试液及显色。以相应试剂作空白对照，在510nm波长处测定吸光值，重复测定6次，记录吸光值，总黄酮质量分数的RSD为0.71%。

2.4.3 稳定性实验 精密称取八月瓜粉末约0.1g，同“2.3”项操作，以相应试剂作空白对照，在510nm波长处测定吸光度，每0.5h测定一次吸光值，共测定7次。记录吸光度，总黄酮质量分数的RSD为1.78%，表明在3h内样品溶液基本无变化。

2.4.4 重复性实验 按“2.3”项操作，制备供试液6份。进行显色。以相应试剂作空白对照，于510nm处测定吸光值，记录吸光度，总黄酮质量分数的RSD为1.54%，结果表明本方法重复性良好。

2.4.5 回收率实验 精密称取八月瓜粉末9份，每份约为0.1g，按80%、100%、120%比例量加入已配制好芦丁对照品溶液。按“2.3”项制备供试液并显色。以相应试剂作空白对照，于510nm处测定吸光值，记录吸光度，平均回收率为98.90%，总黄酮质量分数的RSD为1.91%，表明试验方法可行。见表1。

2.5 样品含量测定 取5种不同产地八月瓜，每个产地采集不同3个区域，各1.0g，据“2.3”项制备供试液，测定吸光度，计算各产地总黄酮含量。结果见表2。

3 讨论

八月瓜作为药食两用的一种野生中药，具有抗菌、抗肿瘤作用，实验以黄酮成分作为测定指标，采用分光光度法测定贵州不同产地八月瓜总黄酮含量，为八月瓜更好的开发研究提供一定依据。

实验中，云顶与王司两个产地的总黄酮含量相对高，不同产地的含量存在一定差异。

参考文献

[1]刘桂艳，王晔.木通属植物木通化学成分及药理活性研究概况[J].中国药学杂志，2004，39（5）：330-332.

[2]李金光，孪嘉瑞.三叶术通果实生物学特征盈营养成分的研究[J].广西植物，1991，11（2）：189-192.

[3]李香，孙济平，彭小冰.三叶木通中总黄酮的提取工艺研究[J].辽宁中医药大学学报，2008，10（12）：152-153.

[4]赵虹桥，唐克华.小血藤总黄酮的提取研究[J].食品科学，2007，27（7）：158-161.

（收稿日期：2016.01.22）