健康人群网织红细胞参数及与成熟红细胞参数的比较研究

张时民,宋雪冬

(1.中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科，北京 100730;2.霸州市医院检验科,河北霸州 065700)



·论著·

健康人群网织红细胞参数及与成熟红细胞参数的比较研究

张时民1,宋雪冬2

(1.中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科，北京 100730;2.霸州市医院检验科,河北霸州 065700)

摘要:目的探讨网织红细胞的某些参数与成熟红细胞相应参数间的关系。方法应用西门子Advia 2120血细胞分析仪对112例男性和110例女性健康体检者进行多项网织红细胞参数测定，确认参考范围，并与成熟红细胞5项相应的参数进行比对分析。结果纳入研究者中，女性的网织红细胞百分比(Retic%)、网织红细胞绝对值(Retic#)、网织红细胞平均血红蛋白含量(CHr)、网织红细胞平均体积(MCVr)的参考范围分别为0.45%～1.76%、(22～86)×109/L、30.1～36.4 pg、99.5～113.7 fL；男性的这4项参数的参考范围分别为0.54%～1.93%、(29～104)×109/L、32.6～36.6 pg、97.6～112.7 fL。网织红细胞计数男性高于女性，差异有统计学意义(P<0.05)。MCVr明显大于成熟红细胞平均体积，且女性略高于男性；CHr明显高于成熟红细胞的平均血红蛋白量，而体积较大的网织红细胞内的平均血红蛋白浓度则低于成熟红细胞的平均血红蛋白浓度；网织红细胞体积分布宽度低于成熟红细胞体积分布宽度；成熟红细胞内血红蛋白含量的均一性则比网织红细胞内血红蛋白含量均一性好。结论建立了网织红细胞一些应用较少的参数的参考范围并与红细胞的相应参数进行了分析。

关键词:网织红细胞；血红蛋白；红细胞平均体积；红细胞体积分布宽度

网织红细胞是未成熟的红细胞，虽然已经有文献报道了不同类型血细胞分析仪测定网织红细胞的参考范围，但是仍有许多参数不被了解，如网织红细胞平均体积(MCVr)，网织红细胞平均血红蛋白含量(CHr)，网织红细胞平均血红蛋白浓度(CHCMr)，网织红细胞体积分布宽度(RDWr)和网织红细胞血红蛋白含量分布宽度(HDWr)等，特别是这些网织红细胞的参数与成熟红细胞之间的关系未见有报道。

网织红细胞是有核的晚幼红细胞脱核后到完全成熟之间的过渡型细胞。其胞质内仍然残存有核糖体、核糖核酸等嗜碱性物质，可用煌焦油蓝或新亚甲蓝染液进行活体染色后，显现其网状结构后，在显微镜下观察和计数。而传统的Wright染色法可观察呈现为嗜多色性红细胞。网织红细胞可根据红细胞内网状物质的形态进行初步分类，一般可分为4型。网织红细胞自动化检测技术是在近20余年中发展而来，特别是伴随自动化血细胞分析仪的发展而来，其检测技术和原理、试剂虽不相同，但其在检测速度、精密度、多参数化等方面是一致的[1]。

其实在具有网织红细胞分析功能的专用仪器和带有网织红细胞分析功能的血细胞计数仪器进入国内的初期，就已经有临床应用和评价以及参考范围的报道[2-3]，但因检测成本较高，检测例数相对较少，参数仅涉及网织红细胞百分比(Retic%)、网织红细胞绝对值(Retic#)、未成熟网织红细胞(IRF)、网织红细胞体积和低、中、高荧光强度网织红细胞(即所谓的网织红细胞分群)等参数。西门子Advia120/2120全自动血细胞分析仪是一款能提供白细胞6分类及网织红细胞分析的高端仪器，其在网织红细胞分析方面的能力表现卓越。它采用氧氮杂芑750(oxazine 750)染料对网织红细胞染色，采用低角度散射光检测网织红细胞体积，高角度散射光信号测定网织红细胞内血红蛋白(Hb)浓度，吸收光测定法判断网织红细胞内RNA水平，可以显示网织红细胞测定参数和计算参数、散点图和直方图数十项，其中的Retic和Retic#、CHr、网织红细胞分群即低中高吸光度的网织红细胞比率也较为广泛应用。但仍有许多具有研究价值的参数，例如MCVr、CHCMr、RDWr、HDWr等参数研究较少。本文对以上10项网织红细胞参数进行测定，推荐建立网织红细胞10项目参数的参考范围，并结合相关的红细胞参数进行比较研究，这对今后深入开展网织红细胞相关的研究、临床医疗实践和应用会有很大帮助。

1资料与方法

1.1一般资料随机选择243例来自北京协和医院体检中心的健康体检者，对这些体检者进行初筛，排除患有贫血及血液系统疾病、肾脏病、消化道疾病等患者，其血常规检查结果在全国临床检验操作规程推荐的参考范围内，最终筛选出222例纳入研究。其中男112例，女110例；年龄分布：男性为20～65岁，女性为22～65岁。纳入研究者血常规检查中红细胞相关参数[包括红细胞计数(RBC)、Hb、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度(RDW)、血红蛋白分布宽度(HDW)]的分布范围见表1，白细胞和血小板数量正常。

表1　　入组人群血常规结果分布范围

1.2方法应用全自动血细胞分析仪ADVIA2120测定所有标本，该仪器已经校准，每日测定前完成高、中、低和网织红细胞共5个质控标本的测定，结果在控。选定标本均采用自动进样方式测定，最大限度克服实验误差，所有测定均在采血后4 h之内完成。本研究对网织红细胞的10项参数进行测定和统计分析。为便于在文章中应用，笔者列出了这些分析参数的缩写、中文名称和测定单位见表2(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)。

1.3统计学处理测定结果采用Excel2010软件记录并进行统计分析。计量资料的比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。选择双侧95%百分位数法确认健康人网织红细胞常规参数并将参数的P2.5～P97.5作为参考范围。

2结果

2.1不同年龄人群3项参数的分析首先了解不同年龄组人群间Retic%、Retic#、Chr 3个参数是否存在差异，按照年龄分布将被检者划分为4个年龄段：20～<31岁、31～<41岁、41～51岁、>51岁。各年龄段人群间3个参数水平两两比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

2.2按性别分析10项网织红细胞相关参数对110例女性和112例男性的测定结果分别进行统计。男女人群间，除高吸光度网织红细胞百分比(Retic H%)，其他数据[包括中吸光度网织红细胞百分比(Retic M%)、低吸光度网织红细胞百分比(Retic L%)]在男、女性间比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表3　　不同年龄人群Retic%、Retic#、Chr参数的

2.3不同性别人群的血液红细胞各项参数分布范围男性和女性红细胞各项参数分布范围，见表5。

2.4网织红细胞和成熟红细胞相关参数的对比分析网织红细胞是未完全成熟的红细胞群体，其中有许多参数与成熟红细胞的相应参数有密切关联。而Advia 2120仪器具有同时测定和分析这两群细胞的能力，因此可以将其用于这两群细胞间相应参数的对比分析。222例测定数据的对比分析结果见表6。

表4　　男性与女性10项网织红细胞相关参数参考范围的确定

表5　　男性和女性血液红细胞各项参数的分布范围

CH：单个细胞血红蛋白含量均值;CHCM：红细胞血红蛋白浓度平均值。

表6　　成熟红细胞与网织红细胞相应参数的比较±s)

3讨论

3.1网织红细胞Retic和Retic#是最重要的参数，作者参考了国内近年来的相关报道，选择比较有代表性的仪器和报道，其成年男女网织红细胞参考范围如下，见表7(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)。可以看出，不同仪器间在网织红细胞测定参考范围上除CD-3700型血液分析仪测得的网织红细胞各参数显著高于其他仪器外，其他仪器的结果较为接近，一般来说男性检测结果略高于女性。但是，在男女性别间的百分数结果上出现了两种不同的情况，这可能与所采用的检测系统以及选定的人群有所不同有关。在绝对数上的不同应该源于男女性在红细胞数量上的明显差异。

3.2MCV和MCVr网织红细胞是幼稚的红细胞，其直径大多为8.0～9.5 μm，而正常红细胞直径多为6.7～7.7 μm[4]，从直径上看网织红细胞明显大于成熟红细胞。正常平均红细胞体积一般在89.5 fL(本研究为88.8 fL)，分布范围为80～100 fL，网织红细胞体积从本研究结果看，平均值为105.4 fL，分布范围为97.0～113.8 fL，也明显大于成熟红细胞，两组数据间比较差异有统计学意义(P<0.05)。有关网织红细胞体积的研究和报道并不多，丛玉隆等[5]在1996年应用TechniconH3血液分析仪进行了相关研究，健康人群的MCVr为(111.8±5.3)fL。而Coulter公司仪器也具有类似的检测指标，一些作者也建立了成年人的正常参考范围，见表8(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)。本研究结果与这些报道相近，但可能因检测系统的因素，略低于这些文献的报道，但也同样可以证明网织红细胞是直径和体积均大于成熟红细胞的细胞群体。

3.3CH和CHrCH是通过高角度散射光直接测定的单个红细胞内CHr，与通过Hb和RBC测定后计算获得的MCH有相似的含义，但不受Hb和RBC测定误差和计算因素的影响。从检测结果上看CHr要明显高于成熟CH。网织红细胞是有核红细胞脱掉细胞核并进入外周血液内的新生红细胞，具有较大的体积和含有丰富的Hb，CHr平均为34.3 pg，明显高于成熟红细胞的CH(29.5 pg)，差异有统计学意义(P<0.05)。

在目前的血细胞分析系统中，Sysmex公司的XE-2100型血液分析仪在进行网织红细胞分析时也有CHr这一参数，其名称为“Ret-He”。该参数是目前较为广泛地用于缺铁性贫血诊断和治疗检测的新的指标。

3.4CHCM和CHCMrCHCM是仪器高角度散射光直接测定的Hb浓度均值，他与通过Hb和HCT测定后计算获得的MCHC有相似的含义，但不受Hb和HCT测定误差和计算因素的影响。从测定结果看CHCMr略低于CHCM，其均值分别为326.3 g/L和335.2 g/L，分布范围分别是300.9～351.7 g/L和317.2～353.2 g/L。两组数据间比较差异有统计学意义(P<0.05)。CHCM表达为Hb在成熟红细胞中的浓度，而CHCMr表达为Hb在网织红细胞内的浓度，虽然在单个网织红细胞内有较高的Hb含量，但因为网织红细胞的体积大于成熟红细胞，因此在体积相对较大的网织红细胞内的Hb浓度仍然低于成熟红细胞。因此CHr高于CH的主要是由于其体积大和所含血红蛋白较多。

3.5RDW和RDWr这两项参数分别反映了成熟红细胞和网织红细胞体积分布的均一性，其平均值分别为13.7%和9.3%，分布范围分别为12.5%～14.9%和7.5%～11.1%。判断一组细胞大小或所含物质均一性的参数即为这组数据的变异系数(CV%)，其数值小表明其变异较小，一致性较高，如果变异较大则代表该组数据的一致性较差。由此数据可以了解到虽然网织红细胞体积明显大于成熟红细胞，但其体积大小的均一性好于成熟红细胞。

3.6HDW和HDWr这两项参数是Advia2120仪器特有的参数，分别反映成熟红细胞和网织红细胞内所含Hb的均一性。其测定结果平均值分别为24.5%和27.8%，分布范围分别为19.9%～29.1%和22.2%～33.4%，两组数据间比较差异有统计学意义(P<0.05)。本研究显示，成熟红细胞内所含Hb的均一性比较好。而网织红细胞可能因成熟程度不同，在外周血涂片上可以见到Ⅳ型或Ⅲ型的网织红细胞，仪器测定则可以见到含高、中、低不同水平Hb的网织红细胞，说明外周血中网织红细胞成熟度是不同的，所含Hb量也会存在差异，因此导致其所含Hb分布的均一性比成熟红细胞变异更大。

根据仪器性能的不同，网织红细胞的测定和计算参数有多种，目前本研究所采用的Advia2120血细胞分析仪是最多的。本研究所涉及的网织红细胞体积、RDWr、CHr、CHCMr、HDWr等许多参数到目前为止很少有文献报道，而这些参数也是Advia2120仪器所特有的参数。这些参数在对各种贫血患者的筛查、诊断、鉴别诊断，特别是在治疗监控和预后观察等方面有临床应用价值，期望能够进行更多的临床应用研究，发现和发挥这些独特参数的临床应用价值。

参考文献

[1]张时民，李晓京．网织红细胞检测技术的进展和临床应用[J]．中国医疗器械信息，2007，13(6)：15-23．

[2]卫生部临床检验中心临检室，解放军总医院临检科.R-3000网织红细胞分析仪临床试验[J]．中华医学检验杂志，1996，19(6)：379-380．

[3]丛玉隆，乐家新，丁颖．网织红细胞各项参数正常值调查[J]．上海医学检验杂志，1996，11(1)：7．

[4]熊立凡，刘成玉．临床检验基础[M]．4版．北京：人民卫生出版社，2007．

[5]丛玉隆，乐家新，袁家颖．实用血细胞分析技术与临床[M]．北京：人民军医出版社，2011．

Reticulocyte parameters of normal human and its relationship with mature erythrocyte parameters

ZhangShimin1,SongXuedong2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,PekingUnionMedicalCollegehospital,ChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollege，Beijing100730,China;2.theHospitalofBazhouCity,Bazhou,Hebei065700)

Abstract:ObjectiveTo investigate the relationship between the parameters of the red blood cells and the corresponding parameters of mature red blood cells.MethodsBlood samples of 112 healthy males and 110 healthy females were tested for these reticulocyte parameters by using Siemens Advia2120 hematology analyzer.Reference intervals were established.Comparisons between these reticulocyte parameters and the corresponding parameters of mature erythrocytes were drawn.ResultsReference intervals for the healthy group recruited in this study were determined as follows.Females,percentage of reticulocyte (Retic%):0.45%～1.76%,absolute reticulocyte number(Retic#):(22～86)×109/L,mean corpuscular hemoglobin content of reticulocyte(CHr):30.1～36.4 pg,mean corpuscular volume of reticulocyte(MCVr):99.5～113.7 fL.Male,Retic%:0.54%～1.93%,Retic#:(29～104)×109/L,CHr:32.6～36.6 pg,MCVr:97.6～112.7 fL.The absolute reticulocyte of male is significantly higher than that of female;MCVr was significantly larger than mean corpuscular volume of mature erythrocytes,which was also slightly larger in male than that in female;CHr was significantly higher than mean corpuscular hemoglobin of mature erythrocytes while mean corpuscular hemoglobin concentration of large reticulocytes was lower than that of mature erythrocytes;red blood cell volume distribution width of reticulocytes was lower than that of mature erythrocytes;the hemoglobin content distribution width of mature erythrocytes has a higher uniformity compared with reticulocytes.ConclusionThe reference ranges of not commonly used parameters of reticulocytes were established,and were compared with the corresponding parameters of red blood cells.

Key words:reticulocyte;hemoglobin；mean corpuscular volume；red blood cell volume distribution width

(收稿日期：2015-12-15)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.014

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)08-1049-04

作者简介：张时民，男，副主任技师，主要从事临床检验基础血液、体液检验及形态学检验等方面的研究。