HPLC法测定民族药材蒙古山萝卜中金丝桃苷的含量△

2016-05-20李甫泉周雪梅

中国民族医药杂志 2016年11期

关键词：桃苷金丝蒙古

李甫泉于蕾周雪梅

(1.内蒙古自治区中医医院，内蒙古呼和浩特 010020; 2.内蒙古食品药品检验所，内蒙古呼和浩特 010070)

HPLC法测定民族药材蒙古山萝卜中金丝桃苷的含量△

李甫泉1于蕾1周雪梅2

(1.内蒙古自治区中医医院，内蒙古呼和浩特 010020; 2.内蒙古食品药品检验所，内蒙古呼和浩特 010070)

目的：建立民族药材蒙古山萝卜中金丝桃苷的HPLC测定方法。方法：采用HPLC法测定；流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺溶液(25：30：0.1：0.15)，流速1.0mL·min-1，检测波长为350nm，柱温为30℃。结果：金丝桃苷在0.0058～0.464μg范围内呈良好的线性关系，r=0.9999；平均回收率100.21%，RSD=0.77%(n=6)。不同采集地点的药材金丝桃苷平均含量为0.68%。结论：蒙古山萝卜中金丝桃苷含量高，成分稳定，测定方法简便、可靠，重现性好。

HPLC法；蒙古山萝卜；金丝桃苷

蒙古山萝卜Scabiosa comosa Fisch主要含有氯原酸、金丝桃苷等化学成分。该类成分具有抗氧化、抗炎、抗肝纤维化和免疫调节作用。目前有关蒙古山萝卜药材中金丝桃苷含量测定方法未见报道。本文采用HPLC方法对药材中金丝桃苷测定方法进行研究，为蒙古山萝卜药材质量分析、评价与控制提供新的依据。

1 仪器与试剂

1.1 仪器：1100型高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司)，SPD-2A紫外检测器(岛津)，TJ-912型色谱分析平台(太极计算机公司)，IN-180型柱温箱(上海英泰科技研究所)，SH6150D超生波清洗器(上海昆山)，电子天平(梅特勒)

1.2 试药：金丝桃苷对照品(111521-200303)由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；其他均为分析纯试剂；水为纯化水；蒙古山萝卜与2015年7～8月采自内蒙古大青山圣水梁、南天门、蛮汗山。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件：Kromasi -C18柱(200mm×4.6mm,5μm)；流动相：甲醇-水-磷酸-三乙胺溶液(25：30：0.1：0.15)；流速：1mL·min-1；温度：30℃；检测波长：350nm nm；进样量10μL。在此条件下待测组分可达到基线分离。样品中金丝桃苷与其它组分有较好的分离，见图1。

2.2 对照品溶液的制备：精密称取金丝桃苷对照品适量，加甲醇制成0.58mg·mL-1的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备：取本品,粉碎，过筛，精密称定50mg，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称质量，超声处理40min ，放冷，称重，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液备用，即得。

2.4 线性关系考察：精密吸取对照品溶液0.1、0.2、0.4、1、2、4、8mL,分别加到10mL量瓶中，加甲醇稀释到刻度，摇匀，注入高效液相色谱仪，测定峰面积；以峰面积为纵坐标(Y)，进样量为横坐标(X)做线性回归, 回归方程为Y = 2284159X +58465，r=0.9999。结果表明，金丝桃苷在0.0058～0.464μg范围内呈良好的线性关系。

2.5 稳定性实验：取同一份供试品溶液，分别在0，2，4，8，12h进样测定，以金丝桃苷峰面积值计算RSD为0.31%。结果表明，供试品溶液在12h内稳定。

2.6 精密度实验：吸取同一批供试品溶液，在上述色谱条件下重复进样6次，测得金丝桃苷峰面积RSD为0.33%。

2.7 重复性实验：取同批药材(201111)按2.3项下平行制备6份样品溶液，并按2.1项下测定，金丝桃苷的平均含量为0.66%， RSD=0.39%。

2.8 加样回收率实验：取同批药材(201111)已知含量的样品6份，每份取约50mg，精密称定，分别精密加入金丝桃苷对照品溶液1.0 mL(0.31 mg)，按2.3项下制备样品溶液，同法操作，测定含量，计算回收率。金丝桃苷平均回收率为100.21%，RSD为1.21%