不同消解方式对测定鸡蛋中卵磷脂含量的影响

马光路，马晓丽（内蒙古化工职业学院，内蒙古呼和浩特010070）



不同消解方式对测定鸡蛋中卵磷脂含量的影响

马光路，马晓丽
（内蒙古化工职业学院，内蒙古呼和浩特010070）

摘要：对鸡蛋中的卵磷脂含量进行测定。采用干法灰化法、湿式消解法和微波消解3种方式进行消解，运用紫外分光光度法进行测定鸡蛋中的卵磷脂含量。结果：微波消解前处理具有简单快速、试剂用量少、准确度高等优点，优于干化消解法和湿式消解法。

关键词：鸡蛋；卵磷脂；干化灰化法；湿式消解法；微波消解；紫外分光光度法

卵磷脂，又称为蛋黄素，被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。卵磷脂可使大脑神经及时得到营养补充，有利于消除疲劳，缓解神经紧张[1-3]。

近几年来对鸡蛋中卵磷脂的研究不多，目前主要的测定方法有紫外分光光度法[1-7]、HPLC法[8]、ICP-MS 法[9]等等，其中紫外分光光度法比其他的方法具有简单、快速、费用低等优点，所以本文采用紫外分光光度法测定鸡蛋中的卵磷脂含量。在此试验中最耗时、也是最关键的环节就是消化方法，本文首次比较了干法灰化法、湿式消解法和微波消解法3种消解方式对卵磷脂含量的影响。

1　材料

1.1仪器

TU-1901/TU-1900紫外-可见分光光度计：北京普析通用仪器有限责任公司生产；TGL-16G高速离心机：北京佳缘兴业科技有限公司生产；85-2数显恒温磁力搅拌器：常州华冠仪器制造有限公司生产；FA2004N分析天平：上海菁海仪器有限公司生产；JC2005E烘干箱：济南精诚仪器公司生产。

1.2试剂

丙酮、无水乙醇、95 %乙醇、硝酸、硫酸、双氧水、钼酸铵、抗坏血酸、亚硫酸钠：天津大茂化学试剂厂。

磷标准储备溶液（浓度1 000 mg/L）购自国家标准物质研究中心。

1.3试样

鸡蛋：市购。

2　方法

2.1标准溶液的配制

磷标准使用溶液：准确吸取10 mL磷标准储备溶液，置于100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。

2.2样品的制备

准确称取5.000 g样品，置于烧瓶中，加人15 mL丙酮，用磁力搅拌器搅拌30 min，静置，分出油脂层，用丙酮润洗直至无色，倾出丙酮。将盛有丙酮不溶物的烧瓶置于烘干箱中，于60℃恒温30 min，挥发掉残余丙酮。然后向烧瓶中加人50 mL的无水乙醇，40℃下搅拌90 min，将样品液转移到100 mL容量瓶中，用无水乙醇定容，最后将溶液离心15 min待用。

称取10 g已经制备好的样品置于50 mL离心管中，加入30 mL无水乙醇，充分搅拌约5 min，离心2 min，将乙醇溶液收集于旋转蒸发瓶中。沉淀物再用无水乙醇洗涤两次（同上），合并乙醇提取液，并旋转蒸发至干。

2.3样品消解

2.3.1干法灰化法

准确称蒸发干的样品1.000 g，于酸洗的瓷坩埚中，在150℃电热板上小火碳化至无烟，再置于550℃马弗炉中灰化6 h，待灰化完全，取出坩埚，冷却后加入少量（1+9）硝酸溶解，然后在电热板上加热赶酸，少量多次的转入50 mL容量瓶中，再加水进行定容，放置30 min，待用。

2.3.2湿式消解法

准确称蒸发干的样品1.000 g，置于100 mL锥形瓶中，加入10 mL硝酸-高氯酸（5+1）混合液和3～4粒防沸玻璃珠，加盖过夜，加一小漏斗在电炉上消解，若变棕黑色，再加混合酸。直至冒白烟，消化液无色透明、放冷，然后在电热板上加热赶酸，移入50 mL容量瓶，用水定容至刻度，摇匀。同时做试剂空白。

2.3.3微波消解

准确称取1.000 g蒸发干的样品于微波消解罐中，加入硝酸4 mL、双氧水1 mL，静置5 min，旋紧密封盖，将罐放入微波炉内，在温度160℃和功率为800 W进行消5 min。消解完毕，取出消解罐冷却后，将消解液在电热板上加热赶酸，转移到50 mL容量瓶中，用水定容、摇匀待侧。

2.4标准曲线的绘制

准确吸取磷标准使用溶液0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL于10 mL比色管中，依次加入1 mL钼酸铵溶液，静置10 s。加入0.5 mL亚硫酸钠溶液，1 mL抗坏血酸溶液，加水至刻度，摇匀。静置0.5 h后，在660 nm波长处分别测定其吸光度，以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

2.5样品的测定

准确吸取样品消解液及试剂空白溶液分别置于10 mL比色管中，按照操作步骤测定吸光度。

3　结果与分析

3.1标准曲线方程

根据标准曲线绘制线性回归方程为y=290.33x-0.283 3，其相关系数为0.998 9，说明线性关系良好。

3.2重复性试脸

标准溶液在660 nm下重复测定吸光值6次，计算卵磷脂的含量，结果RSD的范围为1.5 %～2.7 %，均小于5 %，表明本试验具有良好的重现性。

3.3稳定性试验

将标准液与样品液在660 nm下每隔15 min检测吸光度值，计算样品液中卵磷脂的含量，标准液与样品液中卵磷脂含量的RSD范围为2.3 %～3.1 %，均小于5 %，表明卵磷脂在1 h内测定结果稳定。

3.4回收率试验

准确称取样品5.000 g 1号、3号、5号样品各3份，分别加入磷标液0.5、2.5、5 mL，按样品液制备方法制备供试液，在660 nm测量吸光值，并计算样品加标回收率，结果见表1。

3.5不同消化方式对卵磷脂含量的影响

干法灰化法、湿式消解法和微波消解法对于卵磷脂含量的影响结果见表2（n=3）。

表2　不同消化方式测定卵磷脂的含量Table 2 The determination of lecithin by different digestion methods

由表2可知，干法处理试验结果明显偏低，因为在消解过程中有损失；湿式消解法处理具有原理简单、消化完全、成本低、过程容易控制等优点，但是耗时长；微波消解法结果令人满意，操作简单、快速、损耗少等优点，所以应该选择微波消解法处理。

4　结论

比较干法灰化法、湿式消解法和微波消解法对样品进行消解，结果微波消解法因为操作简单、快速、损耗少等特点具有优势。

表1　回收率结果Table 1 The results of recovery

参考文献：

[1]朱云芬,陈宽维,葛庆联,等.分光光度法测定鸡蛋黄卵磷脂含量[J].江苏农业学报,2010, 26(4): 853-856

[2]陈卫涛,张德权,张柏林,等.紫外分光光度法测定保健品中卵磷脂的含量[J].中国粮油学报,2006,21(3):189-191

[3]黄岛平,莫建光,劳燕文,等.紫外分光光度法测定脑维营养麦片中的卵磷脂[J].光谱实验室,2001,18(3):288-290

[4]陈艳辉,玉现新,李超柱,等.鸡蛋黄中卵磷脂的分离及分析方法研究[J].食品研究与开发,2011,32(10):8-12

[5]熊建华,董开发,欧阳建华.泰和乌骨鸡蛋中磷脂含量的测定研究[J].江西畜牧兽医杂志,1999(2):8-9

[6]张金鹏,张婧,雷芮,等.食品中磷测定方法的改进[J].食品工程, 2014(4):37-39

[7]王继波.蛋黄卵磷脂的纯化及含量的测定[J].广西轻工业,2006 (5):59

[8]王雅蕾,黄建国,马春建.高效液相色谱法测定鸡蛋中的脑磷脂和卵磷脂[J].分析仪器,2010(3):34-36

[9]陈红,张亿,朱蓉.ICP-MS法测定蛋黄卵磷脂中微量元素含量[J].药物分析杂志,2010,30(7):1279-1281

Effect of Different Digestion Methods on the Content of Lecithin in Eggs

MA Guang-lu，MA Xiao-li
（Inner Mongolia Vocational College of Chemical Engineering，Hohhot 010070，Inner Mongolia，China）

Abstract：To determine the content of egg lecithin，the dry ashing，wet digestion and microwave digestion were used to digest. The spectrophotometric method were used to determine the content of lecithin in eggs. Results showed that the microwave digestion had simple，rapid，less reagent，the advantages of higher accuracy than bry ashing and wet digestion method.

Key words：eggs；lecithin；dry digestion；wet digestion；microwave digestion；spectrophotometric method

收稿日期：2015-11-28

作者简介：马光路（1982—），女（汉），讲师，本科，研究方向：工业分析、有机分析。

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.08.036