乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与临床病理参数及预后的关系

柴晓菲，孙亚冬，张　冰，刘　慧，于庆凯

(1.郑州大学附属肿瘤医院病理科，河南 郑州 450008；2.郑州大学附属肿瘤医院乳腺科，河南 郑州 450008)



乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与临床病理参数及预后的关系

柴晓菲1，孙亚冬2，张冰1，刘慧1，于庆凯1

(1.郑州大学附属肿瘤医院病理科，河南 郑州 450008；2.郑州大学附属肿瘤医院乳腺科，河南 郑州 450008)

[摘要]目的观察Wnt5a蛋白在乳腺癌组织中的表达情况，并分析其与乳腺癌相关临床病理参数的关系，初步探讨Wnt5a蛋白在人乳腺癌发生、发展过程中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测80例乳腺浸润性导管癌组织及相应癌旁组织中Wnt5a蛋白的表达。结果Wnt5a蛋白在乳腺癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为33.8%(27/80)和63.8%(51/80)，差异有统计学意义(P<0.05)；乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)；与ER和PR的表达呈正相关(rs=0.294、0.316，P<0.05)。结论乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达减少，提示其在乳腺癌发生、发展中发挥重要作用，有可能成为乳腺癌早期诊断和预后判断的指标及治疗的新靶点。

[关键词]Wnt5a蛋白；乳腺癌；免疫组织化学

乳腺癌是最常见的女性恶性肿瘤之一，虽然预后相对较好，但仍然对女性健康造成很大威胁，其发病机制与激素水平关系密切，除此之外，环境、饮食习惯、遗传及免疫等因素也可能与乳腺癌的发生有关。Wnt5a是Wnt蛋白家族成员之一，由Clark等[1]首先发现，该基因存在于3p14.2-p21.1染色体，编码富含半胱氨酸的生长因子，参与细胞生长及分化。Wnt5a通过激活非经典Wnt信号途径发挥生物学作用[2]。在胰腺癌、胃癌、肠癌、肝癌、肺癌及恶性黑色素瘤等恶性肿瘤中的作用均有研究，本文研究Wnt5a与乳腺癌的关系，以期为乳腺癌的早期诊断和预后判断提供参考意见，为乳腺的靶向治疗提供方向。

1材料与方法

1.1材料收集选取河南省肿瘤医院病理科2012年1月至2014年1月的80例乳腺浸润性导管癌石蜡标本及其相应的癌旁组织(癌旁组织距离癌组织>5 cm)，术前均未接受放、化疗，术后病理结果均经2位以上我院病理科医生确认，且都有完整的临床病理资料。

1.2试剂Wnt5a兔抗人单克隆抗体购自美国Abcam公司，其余试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3检测方法采用免疫组化S-P法检测组织中Wnt5a蛋白的表达，阳性结果判断：细胞质内出现棕黄色、黄色或棕褐色为染色阳性。根据染色的程度和阳性细胞百分数来判断Wnt5a的表达情况。百分数<25%为1分，25%～<50%为2分，50%～<75%为3分，≥75%为4分，染色强度：黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。每例标本以半定量积分法来判断结果，计算公式为：综合分数=染色强度×阳性细胞百分数，综合评分≥4为阳性表达，<4为阴性表达。

1.4统计学处理采用SPSS 17.0进行数据分析，计数资料比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearman相关分析，检验水准α=0.05。

2结果

2.1乳腺癌和癌旁组织中Wnt5a蛋白的表达Wnt5a蛋白在乳腺癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为33.8%(27/80)和63.8%(51/80)，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与临床病理参数的关系乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。见表1。

2.3乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与ER和PR表达的相关性乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与ER和PR的表达呈正相关(rs=0.294、0.316，P<0.05)。见表2、3。

表1乳腺癌组织中Wnt5a蛋白

的表达与临床病理参数的相关性

临床病理参数nWnt5a蛋白阳性χ2P年龄/岁 >5042160.7470.388 ≤503811肿瘤直径/cm >258190.0930.761 ≤2228组织学分级 Ⅰ148 Ⅱ48163.3800.184 Ⅲ185淋巴结转移 无32178.9540.003 有4810TNM分期 Ⅰ～Ⅱ29169.3370.002 Ⅲ～Ⅳ5111ER 阳性56254.4740.006 阴性242PR 阳性54245.4900.019 阴性263

表2乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与ER的相关性

ERWnt5a蛋白阳性阴性合计阳性253459阴性21921合计275380

注：rs=0.294，P=0.008

表2乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与PR的相关性

PRWnt5a蛋白阳性阴性合计阳性243458阴性31922合计275380

注：rs=0.316，P=0.004

3讨论

Wnt5a可通过抑制Wnt/beta-catenin经典通路及其下游分子的表达发挥抑癌作用[3]。在不同的恶性肿瘤中的研究[4-5]表明，Wnt5a既具有肿瘤启动的作用，又具备肿瘤抑制的作用，在恶性黑色素瘤中能够增强肿瘤细胞的运动性和侵袭性，在肺癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌和前列腺癌中Wnt5a基因表达上调，而在血液系统恶性肿瘤、直肠癌和甲状腺癌中Wnt5a基因表达下调，起到肿瘤抑制的作用。

本研究通过免疫组化法检测乳腺癌和癌旁组织标本中Wnt5a蛋白的表达情况，分析其差异表达与临床病理参数之间的关系，进一步探讨Wnt5a蛋白与乳腺癌患者的预后可能存在的关系。结果表明：Wnt5a蛋白在乳腺癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为33.8%(27/80)和66.7%(51/80)，差异有统计学意义(P<0.05)；乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)；乳腺癌组织中Wnt5a蛋白的表达与ER和PR的表达呈正相关(rs=0.294、0.316，P<0.05)。

综上所述，乳腺癌组织中Wnt5a蛋白表达下调，Wnt5a蛋白的表达与淋巴结转移、TNM分期有关。本研究与国内大多数研究结果一致，提示Wnt5a在乳腺癌发生、发展中发挥重要作用，有可能成为乳腺癌早期诊断和预后判断的指标及治疗的新靶点。

参考文献：

[1]Clark CC,Cohen I,Eichstetter I,et al.Molecular cloning of the human proto-oncogene Wnt-5A and mapping of the gene (WNT5A) to chromosome 3p14-p21[J].Genomics,1993,18(2):249-260.

[2]Ma L,Wang HY.Suppression of cyclic GMP-dependent protein kinase is essential to the Wnt/cGMP/Ca2+pathway[J].J Biol Chem,2006,281(41):30990-31001.

[3]王新纲.乳腺癌中Wnt5a的表达及其对Wnt经典信号通路调控的研究[D].山东：山东大学医学院，2015.

[4]Malgor R,Crouser S,Greco D,et al.Correlation of Wnt5a expression with histopathological grade/stage in urothelial carcinoma of the bladder[J].Diagn Pathol,2013,8:139.

[5]Ying J,Li H,Yu J,et al.WNT5A exhibits tumor-suppressive activity through antagonizing the Wnt/beta-catenin signaling,and is frequently methylated in colorectal cancer[J].Clin Cancer Res,2008,14(1):55-61.

Expression of Wnt5a in the Breast Carcinoma and Its Correlation with Clinicopathological Pathology and Prognosis

Chai Xiaofei1,Sun Yadong2,Zhang Bing1,Liu Hui1,Yu Qingkai1

(1.DepartmentofPathology,theCancerHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450008,China;2.DepartmentofBreastSurgery,theCancerHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450008,China)

[Abstract]ObjectiveTo detect the expression of Wnt5a in the breast carcinoma,and to analyze the association with clinicopathological parameters of breast carcinoma,and to discuss the relationship between Wnt5a and its effect in the development process of protein in the breast carcinoma.MethodsImmunohistochemistry S-P method was used to detect the Wnt5a protein expressions in the 80 patients with breast infiltrating ductal carcinoma tissues and the corresponding paraneoplastic tissues.ResultsThe Wnt5a protein positive expression rates in the breast carcinoma and the paraneoplastic tissues were 33.8% (27/80) and 63.8% (51/80),the difference was statistically significant (P<0.05); Wnt5a protein expression in the breast carcinoma was associated with lymph node metastasis and TNM stages (P<0.05); Wnt5a protein expression in the breast carcinoma was positively related with ER and PR expression (rs=0.294,0.316; P<0.05).ConclusionAbnormal expression of Wnt5a protein in the breast carcinoma play an important role in the occurrence and development of breast carcinoma,and has the potential to be early diagnosis and prognostic indicators in the breast carcinoma and new treatment targets.

[Key words]Wnt5a protein; breast carcinoma; immunohistochemistry

(收稿日期：2015-10-12)

[中图分类号]R737.9；R730.23

[文献标识码]A

[文章编号]1673-5412(2016)02-0110-03

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2016.02.005

作者简介：柴晓菲(1983-)，女，硕士，主治医师，主要从事肿瘤病理诊断工作。E-mail：chai1861@163.com通信作者：于庆凯(1957-)，女，博士，主任医师，主要从事肿瘤病理诊断工作。E-mail：yuqingkai@hotmail.com